桔小實蠅Bactrocera dorsalis（Hendel）屬于雙翅目Dipetera,實蠅Trypetidae,寡鬃實蠅亞科Dacinae,果實蠅屬Bactrocera Macquart,是一種重要的果蔬害蟲。目前,化學防治仍是防控桔小實蠅的主要手段,但由于長期不合理地大量施用化學藥劑,導致桔小實蠅對常用化學藥劑產(chǎn)生了較高水平的抗性。腺苷三磷酸結合盒轉(zhuǎn)運蛋白（ATP-binding cassette transporter,ABC轉(zhuǎn)運蛋白）作為一種外排泵,是一種可利用三磷酸腺苷（ATP）進而促使物質(zhì)逆濃度梯度跨膜轉(zhuǎn)運的膜蛋白。ABC轉(zhuǎn)運蛋白能夠降低胞內(nèi)外源物質(zhì)的濃度,從而導致昆蟲對藥劑的敏感性下降。迄今,對桔小實蠅抗藥性機制的研究主要集中于初級代謝和次級代謝,而對轉(zhuǎn)運代謝研究甚少。據(jù)此,本學位論文基于桔小實蠅基因組和轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù),鑒定桔小實蠅ABC轉(zhuǎn)運蛋白基因,并通過定量表達、RNAi等手段解析桔小實蠅ABC轉(zhuǎn)運蛋白在殺蟲劑轉(zhuǎn)運中的功能,研究結果對于深入闡明桔小實蠅抗藥性機制具有重要的意義。本學位論文的主要研究結果如下:基于桔小實蠅基因組和轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù),鑒定出47個ABC轉(zhuǎn)運蛋白基因。... 

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【文章頁數(shù)】：64 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
文獻綜述
    1 桔小實蠅抗性發(fā)生現(xiàn)狀
    2 殺蟲劑抗性研究進展
    3 ABC轉(zhuǎn)運蛋白基因及其介導的抗藥性
    4 RNA干擾技術在基因功能研究中的應用
引言
    1 論文的研究背景及意義
    2 論文的研究思路與大致框架
第一章 桔小實蠅ABC轉(zhuǎn)運蛋白基因的鑒定及分析
    1 材料與方法
        1.1 供試蟲源
        1.2 主要儀器
        1.3 基因鑒定以及系統(tǒng)發(fā)育分析
    2 結論與分析
        2.1 桔小實蠅ABC轉(zhuǎn)運蛋白序列鑒定
        2.2 桔小實蠅ABC轉(zhuǎn)運蛋白基因的系統(tǒng)發(fā)育分析
    3 小結
第二章 桔小實蠅ABC轉(zhuǎn)運蛋白基因在成蟲不同組織間的表達模式解析
    1 材料與方法
        1.1 供試蟲源
        1.2 主要儀器以及試劑
        1.3 桔小實蠅整蟲及不同體段組織RNA的提取及cDNA的合成
        1.4 PCR擴增
        1.5 桔小實蠅ABC轉(zhuǎn)運蛋白基因在成蟲不同組織間的表達模式分析
        1.6 不同組織轉(zhuǎn)錄組的比較分析
    2 結論與分析
    3 小結
第三章 桔小實蠅ABC轉(zhuǎn)運蛋白基因應對藥劑處理的表達模式解析
    1 材料與方法
        1.1 供試蟲源
        1.2 主要儀器以及試劑
        1.3 幾種藥劑對桔小實蠅生物活性的測定
        1.4 桔小實蠅整蟲及組織總RNA的提取以及cDNA的合成
        1.5 桔小實蠅ABC轉(zhuǎn)運蛋白基因應對藥劑處理后的表達模式分析
        1.6 PCR擴增
        1.7 生物信息學分析
    2 結論與分析
        2.1 桔小實蠅ABC轉(zhuǎn)運蛋白基因應對藥劑劑量效應的表達模式分析
        2.2 桔小實蠅ABC轉(zhuǎn)運蛋白基因響應藥劑脅迫的時間效應
    3 小結
第四章 基于RNAi技術的桔小實蠅ABC轉(zhuǎn)運蛋白基因的功能分析
    1 材料與方法
        1.1 供試蟲源
        1.2 主要儀器以及試劑
        1.3 dsRNA的引物合成
        1.4 dsRNA的制備
        1.5 顯微注射法
        1.6 沉默效率以及馬拉硫磷對桔小實蠅生物活性的測定
        1.7 實時熒光定量PCR
        1.8 生物信息學分析
    2 結論與分析
        2.1 沉默效率檢測
        2.2 馬拉硫磷對桔小實蠅生物活性的測定結果
    3 小結
第五章 主要結果、結論與研究展望
    1 主要結果與結論
        1.1 桔小實蠅ABC轉(zhuǎn)運蛋白基因的鑒定與分析
        1.2 桔小實蠅ABC轉(zhuǎn)運蛋白基因在成蟲不同組織間的表達模式分析
        1.3 桔小實蠅ABC轉(zhuǎn)運蛋白基因響應藥劑處理后表達模式分析
        1.4 基于RNAi技術的桔小實蠅BdABCB7在馬拉硫磷藥劑代謝中的功能研究
    2 研究展望
參考文獻
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致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]桔小實蠅研究進展[J]. 張彬,劉映紅,趙嵐嵐,周旭.  中國農(nóng)學通報. 2008(11)
[2]華南地區(qū)桔小實蠅田間種群抗藥性的監(jiān)測[J]. 章玉蘋,曾玲,陸永躍,梁廣文.  華中農(nóng)業(yè)大學學報. 2008(04)
[3]華南地區(qū)桔小實蠅抗藥性動態(tài)監(jiān)測[J]. 章玉蘋,曾玲,陸永躍,梁廣文.  華南農(nóng)業(yè)大學學報. 2007(03)
[4]桔小實蠅生物學特性[J]. 張清源,林振基,劉金耀,陳華忠,高泉準,孫國坤,洪贊僑,孫德華,陳加福.  華東昆蟲學報. 1998(02)
[5]桔小實蠅形態(tài)特征及其生活習性[J]. 梁廣勤.  江西農(nóng)業(yè)大學學報. 1985(01)

博士論文
[1]桔小實蠅細胞色素P450酶系及其在馬拉硫磷抗性中的作用[D]. 黃勇.西南大學 2016

碩士論文
[1]α羧酸酯酶介導桔小實蠅馬拉硫磷抗性的分子機理研究[D]. 汪犖犖.西南大學 2015



本文編號：3044292