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桔小實(shí)蠅ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因鑒定與表達(dá)模式分析

發(fā)布時(shí)間:2021-02-21 11:35
  桔小實(shí)蠅Bactrocera dorsalis(Hendel)屬于雙翅目Dipetera,實(shí)蠅Trypetidae,寡鬃實(shí)蠅亞科Dacinae,果實(shí)蠅屬Bactrocera Macquart,是一種重要的果蔬害蟲。目前,化學(xué)防治仍是防控桔小實(shí)蠅的主要手段,但由于長期不合理地大量施用化學(xué)藥劑,導(dǎo)致桔小實(shí)蠅對(duì)常用化學(xué)藥劑產(chǎn)生了較高水平的抗性。腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(ATP-binding cassette transporter,ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白)作為一種外排泵,是一種可利用三磷酸腺苷(ATP)進(jìn)而促使物質(zhì)逆濃度梯度跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)的膜蛋白。ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白能夠降低胞內(nèi)外源物質(zhì)的濃度,從而導(dǎo)致昆蟲對(duì)藥劑的敏感性下降。迄今,對(duì)桔小實(shí)蠅抗藥性機(jī)制的研究主要集中于初級(jí)代謝和次級(jí)代謝,而對(duì)轉(zhuǎn)運(yùn)代謝研究甚少。據(jù)此,本學(xué)位論文基于桔小實(shí)蠅基因組和轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù),鑒定桔小實(shí)蠅ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因,并通過定量表達(dá)、RNAi等手段解析桔小實(shí)蠅ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白在殺蟲劑轉(zhuǎn)運(yùn)中的功能,研究結(jié)果對(duì)于深入闡明桔小實(shí)蠅抗藥性機(jī)制具有重要的意義。本學(xué)位論文的主要研究結(jié)果如下:基于桔小實(shí)蠅基因組和轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù),鑒定出47個(gè)ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因。... 

【文章來源】:西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:64 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
文獻(xiàn)綜述
    1 桔小實(shí)蠅抗性發(fā)生現(xiàn)狀
    2 殺蟲劑抗性研究進(jìn)展
    3 ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因及其介導(dǎo)的抗藥性
    4 RNA干擾技術(shù)在基因功能研究中的應(yīng)用
引言
    1 論文的研究背景及意義
    2 論文的研究思路與大致框架
第一章 桔小實(shí)蠅ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因的鑒定及分析
    1 材料與方法
        1.1 供試蟲源
        1.2 主要儀器
        1.3 基因鑒定以及系統(tǒng)發(fā)育分析
    2 結(jié)論與分析
        2.1 桔小實(shí)蠅ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白序列鑒定
        2.2 桔小實(shí)蠅ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因的系統(tǒng)發(fā)育分析
    3 小結(jié)
第二章 桔小實(shí)蠅ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因在成蟲不同組織間的表達(dá)模式解析
    1 材料與方法
        1.1 供試蟲源
        1.2 主要儀器以及試劑
        1.3 桔小實(shí)蠅整蟲及不同體段組織RNA的提取及cDNA的合成
        1.4 PCR擴(kuò)增
        1.5 桔小實(shí)蠅ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因在成蟲不同組織間的表達(dá)模式分析
        1.6 不同組織轉(zhuǎn)錄組的比較分析
    2 結(jié)論與分析
    3 小結(jié)
第三章 桔小實(shí)蠅ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因應(yīng)對(duì)藥劑處理的表達(dá)模式解析
    1 材料與方法
        1.1 供試蟲源
        1.2 主要儀器以及試劑
        1.3 幾種藥劑對(duì)桔小實(shí)蠅生物活性的測(cè)定
        1.4 桔小實(shí)蠅整蟲及組織總RNA的提取以及cDNA的合成
        1.5 桔小實(shí)蠅ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因應(yīng)對(duì)藥劑處理后的表達(dá)模式分析
        1.6 PCR擴(kuò)增
        1.7 生物信息學(xué)分析
    2 結(jié)論與分析
        2.1 桔小實(shí)蠅ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因應(yīng)對(duì)藥劑劑量效應(yīng)的表達(dá)模式分析
        2.2 桔小實(shí)蠅ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因響應(yīng)藥劑脅迫的時(shí)間效應(yīng)
    3 小結(jié)
第四章 基于RNAi技術(shù)的桔小實(shí)蠅ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因的功能分析
    1 材料與方法
        1.1 供試蟲源
        1.2 主要儀器以及試劑
        1.3 dsRNA的引物合成
        1.4 dsRNA的制備
        1.5 顯微注射法
        1.6 沉默效率以及馬拉硫磷對(duì)桔小實(shí)蠅生物活性的測(cè)定
        1.7 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
        1.8 生物信息學(xué)分析
    2 結(jié)論與分析
        2.1 沉默效率檢測(cè)
        2.2 馬拉硫磷對(duì)桔小實(shí)蠅生物活性的測(cè)定結(jié)果
    3 小結(jié)
第五章 主要結(jié)果、結(jié)論與研究展望
    1 主要結(jié)果與結(jié)論
        1.1 桔小實(shí)蠅ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因的鑒定與分析
        1.2 桔小實(shí)蠅ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因在成蟲不同組織間的表達(dá)模式分析
        1.3 桔小實(shí)蠅ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因響應(yīng)藥劑處理后表達(dá)模式分析
        1.4 基于RNAi技術(shù)的桔小實(shí)蠅BdABCB7在馬拉硫磷藥劑代謝中的功能研究
    2 研究展望
參考文獻(xiàn)
在讀期間發(fā)表的論文
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]桔小實(shí)蠅研究進(jìn)展[J]. 張彬,劉映紅,趙嵐嵐,周旭.  中國農(nóng)學(xué)通報(bào). 2008(11)
[2]華南地區(qū)桔小實(shí)蠅田間種群抗藥性的監(jiān)測(cè)[J]. 章玉蘋,曾玲,陸永躍,梁廣文.  華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2008(04)
[3]華南地區(qū)桔小實(shí)蠅抗藥性動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)[J]. 章玉蘋,曾玲,陸永躍,梁廣文.  華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2007(03)
[4]桔小實(shí)蠅生物學(xué)特性[J]. 張清源,林振基,劉金耀,陳華忠,高泉準(zhǔn),孫國坤,洪贊僑,孫德華,陳加福.  華東昆蟲學(xué)報(bào). 1998(02)
[5]桔小實(shí)蠅形態(tài)特征及其生活習(xí)性[J]. 梁廣勤.  江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 1985(01)

博士論文
[1]桔小實(shí)蠅細(xì)胞色素P450酶系及其在馬拉硫磷抗性中的作用[D]. 黃勇.西南大學(xué) 2016

碩士論文
[1]α羧酸酯酶介導(dǎo)桔小實(shí)蠅馬拉硫磷抗性的分子機(jī)理研究[D]. 汪犖犖.西南大學(xué) 2015



本文編號(hào):3044292

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