北方白菜型冬油菜具有優(yōu)異抗寒性,是我國(guó)北方寒區(qū)唯一可越冬的冬油菜類型,研究發(fā)現(xiàn),生長(zhǎng)緩慢,根系發(fā)達(dá),生長(zhǎng)錐凹、苗期匍匐生長(zhǎng)等植物學(xué)性狀與抗寒密切相關(guān)。大量試驗(yàn)結(jié)果表明,生長(zhǎng)錐表現(xiàn)為凹陷的品種抗寒性遠(yuǎn)遠(yuǎn)強(qiáng)于生長(zhǎng)錐凸起的品種,由此推測(cè)抗寒性不同的品種的生長(zhǎng)錐形態(tài)特征的調(diào)控機(jī)制可能存在差異。本研究挑選與生長(zhǎng)錐調(diào)控相關(guān)且與實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)比較差異顯著的6個(gè)基因,定量分析其在不同抗寒性白菜型冬油菜生長(zhǎng)錐中的表達(dá)量差異,篩選出兩個(gè)差異顯著的基因進(jìn)行功能分析,主要研究結(jié)果如下:1.篩選出STM與CUC2兩個(gè)與生長(zhǎng)錐形態(tài)相關(guān)的基因,其中,STM在抗寒性強(qiáng)、生長(zhǎng)錐凹陷的品種中相對(duì)表達(dá)量低于抗寒性弱、生長(zhǎng)錐凸起的品種,而CUC2基因相對(duì)表達(dá)量與STM基因相反,在抗寒性強(qiáng)、生長(zhǎng)錐凹陷生長(zhǎng)的品種中相對(duì)表達(dá)量高于抗寒性差、生長(zhǎng)錐凸起生長(zhǎng)的品種。2.克隆獲得長(zhǎng)度分別為1554bp和1104bp的STM和CUC2基因。低溫脅迫后,STM和CUC2基因上調(diào)表達(dá),﹣4℃時(shí)達(dá)最高值。不同品種間STM和CUC2基因相對(duì)表達(dá)存在顯著差異,STM基因在生長(zhǎng)錐凸起的Lenox中相對(duì)表達(dá)量高于生長(zhǎng)錐凹陷的隴油7號(hào)等品種,而CUC2... 

【文章來(lái)源】：甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)甘肅省

【文章頁(yè)數(shù)】：81 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Summary
縮略詞
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 植物生長(zhǎng)錐研究
        1.1 植物生長(zhǎng)錐形態(tài)結(jié)構(gòu)研究
        1.2 植物生長(zhǎng)錐分化發(fā)育研究
    2 生長(zhǎng)錐分化發(fā)育過(guò)程中的影響因素
        2.1 外界環(huán)境對(duì)生長(zhǎng)錐分化的影響
        2.2 生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素對(duì)生長(zhǎng)錐分化的影響
        2.3 活性氧對(duì)生長(zhǎng)錐分化的影響
    3 生長(zhǎng)錐分化發(fā)育過(guò)程中的分子調(diào)控
        3.1 生長(zhǎng)錐分化中CLV3-WUS反饋調(diào)節(jié)機(jī)制的研究
        3.2 生長(zhǎng)錐分化中STM-WUS協(xié)同調(diào)節(jié)機(jī)制的研究
        3.3 生長(zhǎng)錐分化中STM與 CUC2 調(diào)節(jié)機(jī)制的研究
        3.4 生長(zhǎng)錐分化中轉(zhuǎn)錄調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的研究
        3.5 其它生長(zhǎng)錐分化調(diào)控基因的研究
    4 生長(zhǎng)錐分化與植物抗寒性研究
    5 研究目的及意義
        5.1 研究目的及意義
        5.2 主要研究?jī)?nèi)容
        5.3 技術(shù)路線
第二章 白菜型冬油菜生長(zhǎng)錐分化調(diào)控基因的篩選
    1 材料與方法
        1.1 試驗(yàn)材料
        1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
        1.3 白菜型冬油菜生長(zhǎng)錐相關(guān)基因的篩選
        1.4 白菜型冬油菜生長(zhǎng)錐總RNA的提取及反轉(zhuǎn)錄
        1.5 實(shí)時(shí)熒光定量引物設(shè)計(jì)
        1.6 實(shí)時(shí)熒光定量反應(yīng)條件
        1.7 基因的表達(dá)分析
        1.8 數(shù)據(jù)處理
    2 結(jié)果與分析
        2.1 總RNA的提取與引物退火溫度的篩選
        2.2 生長(zhǎng)錐分化相關(guān)基因在不同抗寒性白菜型冬油菜生長(zhǎng)錐中的表達(dá)
            2.2.1 STM在白菜型冬油菜生長(zhǎng)錐中的表達(dá)
            2.2.2 WUS在白菜型冬油菜生長(zhǎng)錐中的表達(dá)
            2.2.3 CLV3在白菜型冬油菜生長(zhǎng)錐中的表達(dá)
            2.2.4 YUC1在白菜型冬油菜生長(zhǎng)錐中的表達(dá)
            2.2.5 WOX4在白菜型冬油菜生長(zhǎng)錐中的表達(dá)
            2.2.6 CUC2在白菜型冬油菜生長(zhǎng)錐中的表達(dá)
        2.3 生長(zhǎng)錐分化基因的表達(dá)與白菜冬油菜生長(zhǎng)錐凹陷及抗寒性的關(guān)系
    3 討論
    4 結(jié)論
第三章 白菜型冬油菜生長(zhǎng)錐STM、CUC2 基因的克隆及其在低溫脅迫下的表達(dá)
    1 材料與方法
        1.1 試驗(yàn)材料
        1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
        1.3 白菜型冬油菜生長(zhǎng)錐RNA的提取及反轉(zhuǎn)錄
        1.4 引物設(shè)計(jì)
        1.5 培養(yǎng)基配方及抗生素
        1.6 基因克隆
        1.7 基因序列的生物信息學(xué)分析
        1.8 基因的表達(dá)分析
        1.9 數(shù)據(jù)處理
    2 結(jié)果與分析
        2.1 隴油7號(hào)生長(zhǎng)錐STM基因的克隆
            2.1.1 隴油7號(hào)生長(zhǎng)錐STM基因編碼蛋白質(zhì)的特性分析
            2.1.2 隴油7號(hào)生長(zhǎng)錐STM基因編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)分析
            2.1.3 隴油7號(hào)生長(zhǎng)錐STM基因編碼的氨基酸分析
            2.1.4 隴油7號(hào)生長(zhǎng)錐STM基因的系統(tǒng)進(jìn)化分析
            2.1.5 低溫脅迫下白菜型冬油菜生長(zhǎng)錐STM的表達(dá)分析
        2.2 隴油7號(hào)生長(zhǎng)錐CUC2基因的克隆
            2.2.1 隴油7號(hào)生長(zhǎng)錐CUC2基因編碼蛋白質(zhì)的特性分析
            2.2.2 隴油7號(hào)生長(zhǎng)錐CUC2基因編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)分析
            2.2.3 隴油7號(hào)CUC2基因編碼的氨基酸分析
            2.2.4 隴油7號(hào)生長(zhǎng)錐CUC2基因的系統(tǒng)進(jìn)化分析
            2.2.5 低溫脅迫下白菜型冬油菜生長(zhǎng)錐CUC2的表達(dá)分析
    3 討論
    4 結(jié)論
第四章 白菜型冬油菜生長(zhǎng)錐STM、CUC2 組織表達(dá)及定位分析
    1 材料與方法
        1.1 試驗(yàn)材料
            1.1.1 藥品及試劑材料
        1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
        1.3 Gateway入門克隆引物設(shè)計(jì)
        1.4 Gateway入門克隆
        1.5 表達(dá)載體構(gòu)建
        1.6 擬南芥的遺傳轉(zhuǎn)化及GUS染色
        1.7 基因的組織表達(dá)分析
        1.8 數(shù)據(jù)處理
    2 結(jié)果與分析
        2.1 STM與 CUC2 基因在不同組織中的表達(dá)
            2.1.1 常溫下STM與 CUC2 基因在不同組織中的表達(dá)
            2.1.2 低溫脅迫下STM與 CUC2 在各組織中的表達(dá)分析
        2.2 STM啟動(dòng)子功能分析
            2.2.1 STM啟動(dòng)子克隆
            2.2.2 STM啟動(dòng)子順式作用元件分析
        2.3 CUC2啟動(dòng)子功能分析
            2.3.1 CUC2啟動(dòng)子克隆
            2.3.2 CUC2啟動(dòng)子順式作用元件分析
            2.3.3 CUC2基因的組織定位
    3 討論
    4 結(jié)論
第五章 白菜型冬油菜生長(zhǎng)錐STM、CUC2 基因的遺傳轉(zhuǎn)化及功能分析
    1 材料與方法
        1.1 試驗(yàn)材料
            1.1.1 植物材料
            1.1.2 藥品及試劑材料
        1.2 試驗(yàn)方法
            1.2.1 植物過(guò)表達(dá)載體構(gòu)建
            1.2.2 擬南芥的遺傳轉(zhuǎn)化
            1.2.3 轉(zhuǎn)基因抗性植株的篩選
            1.2.4 轉(zhuǎn)基因抗性植株的鑒定
        1.3 轉(zhuǎn)基因擬南芥功能分析
            1.3.1 轉(zhuǎn)基因擬南芥的表型觀察
            1.3.2 低溫處理后轉(zhuǎn)基因擬南芥的耐寒性分析
            1.3.3 轉(zhuǎn)基因擬南芥低溫處理后生理指標(biāo)的測(cè)定
        1.4 數(shù)據(jù)處理
    2 結(jié)果與分析
        2.1 轉(zhuǎn)STM基因過(guò)表擬南芥的篩選及鑒定
            2.1.1 轉(zhuǎn)STM基因過(guò)表擬南芥的篩選
            2.1.2 轉(zhuǎn)STM基因過(guò)表達(dá)擬南芥基因組DNA PCR鑒定
            2.1.3 轉(zhuǎn)STM基因過(guò)表達(dá)植株RT-PCR鑒定
        2.2 轉(zhuǎn)STM基因過(guò)表達(dá)擬南芥功能分析
            2.2.1 轉(zhuǎn)STM基因過(guò)表達(dá)擬南芥表型觀察
            2.2.2 低溫處理后轉(zhuǎn)STM基因過(guò)表達(dá)植株的表型分析
            2.2.3 低溫處理后轉(zhuǎn)STM基因過(guò)表達(dá)植株的存活率分析
            2.2.4 低溫處理后轉(zhuǎn)STM基因過(guò)表達(dá)植株生理生化指標(biāo)的測(cè)定
        2.3 轉(zhuǎn)CUC2基因過(guò)表擬南芥的篩選及鑒定
            2.3.1 轉(zhuǎn)CUC2基因過(guò)表擬南芥的篩選
            2.3.2 轉(zhuǎn)CUC2 基因過(guò)表達(dá)擬南芥基因組DNA PCR鑒定
            2.3.3 轉(zhuǎn)CUC2 基因過(guò)表達(dá)植株RT-PCR鑒定
        2.4 轉(zhuǎn)CUC2基因過(guò)表達(dá)擬南芥功能分析
            2.4.1 轉(zhuǎn)CUC2基因過(guò)表達(dá)擬南芥表型觀察
            2.4.2 低溫處理后轉(zhuǎn)CUC2基因過(guò)表達(dá)植株的表型分析
            2.4.3 低溫處理后轉(zhuǎn)CUC2基因過(guò)表達(dá)植株的存活率分析
            2.4.4 低溫處理后轉(zhuǎn)CUC2基因過(guò)表達(dá)植株生理生化指標(biāo)的測(cè)定
    3 討論
    4 結(jié)論
第六章 全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介
在讀期間發(fā)表論文和研究成果等
導(dǎo)師簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]黃淮南片麥區(qū)小麥耐倒春寒育種研究初探[J]. 歐行奇,王玉玲.  麥類作物學(xué)報(bào). 2019(05)
[3]甘藍(lán)型油菜BnDMC1.A01基因的分離及序列分析[J]. 魯?shù)さ?李保全,安素妨,徐文,侯錦娜.  中國(guó)油料作物學(xué)報(bào). 2018(06)
[4]陸地棉GRF基因家族的鑒定和生物信息學(xué)分析[J]. 張書芹,樂(lè)愉,武斐.  分子植物育種. 2019(12)
[5]蒺藜苜蓿MtAAO3基因克隆及序列分析[J]. 趙忠祥,張鐵軍,徐玉鵬,黃素芳,劉震,劉青松,肖宇,閻旭東.  分子植物育種. 2019(16)
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博士論文
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[2]冷脅迫下高山離子芥表觀遺傳修飾變化和ADH1功能研究[D]. 劉麗君.蘭州大學(xué) 2017
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[4]擬南芥STM、WUS和CLV3相互作用調(diào)控莖端分生組織干細(xì)胞活性的研究[D]. 周超.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[5]生長(zhǎng)素合成與轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)基因在玉米雌花序發(fā)育過(guò)程中的表達(dá)分析[D]. 李文蘭.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014

碩士論文
[1]擬南芥TIR3基因調(diào)控莖端分生組織和胚胎發(fā)育的機(jī)理研究[D]. 王珊珊.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[2]鹽生草HgNHX1基因及其啟動(dòng)子的功能研究[D]. 鄒蘭.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[3]生長(zhǎng)素響應(yīng)基因OsCLE48對(duì)擬南芥頂端分生組織發(fā)生的影響[D]. 郭紅雁.東北師范大學(xué) 2016
[4]白樺BpCUC2基因的表達(dá)特性及遺傳轉(zhuǎn)化[D]. 徐煥文.東北林業(yè)大學(xué) 2016
[5]白菜型油菜多室基因BrCLV3的功能研究[D]. 武語(yǔ)笛.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[6]歐洲白樺BpCUC2基因及其啟動(dòng)子的克隆與功能研究[D]. 王遂.東北林業(yè)大學(xué) 2015
[7]白菜型冬油菜抗寒機(jī)理與選擇指標(biāo)體系研究[D]. 楊寧寧.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[8]白菜型冬油菜生物學(xué)特性及根部蛋白質(zhì)表達(dá)對(duì)低溫脅迫的響應(yīng)[D]. 張朋飛.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[9]加拿大披堿草生長(zhǎng)錐分化及開(kāi)花習(xí)性的研究[D]. 許圣德.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[10]幾種禾草種子顯微結(jié)構(gòu)研究與半透層定位[D]. 顏欣娟.蘭州大學(xué) 2008



本文編號(hào)：3042542