目的:觀察新型抗Aβ31-35單鏈抗體（scFv17）對APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因阿爾茨海默�。ˋD）模型小鼠腦內(nèi)病理特征淀粉樣β蛋白（Aβ）的清除效應(yīng),并從神經(jīng)炎性反應(yīng)和Aβ產(chǎn)生相關(guān)酶入手研究scFv17發(fā)揮神經(jīng)保護作用的可能機制,為AD免疫學治療提供新的策略和手段。方法:將15月齡APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因AD小鼠隨機分為以下三組:對照組（Saline）、抗體6E10組和抗體scFv17組。各組小鼠于雙側(cè)前額葉皮層與海馬區(qū)分別行顱內(nèi)注射scFv17或6E10（左右各2μL,1 mg/m L）,對照組給予等體積的0.01 M的磷酸緩沖液（PBS）。一次性給藥7天后,取腦組織進行以下實驗:（1）免疫組織化學實驗:將小鼠灌注、固定后取腦組織,冷凍保存于-80℃冰箱。隨后進行冰凍切片免疫組織化學實驗。腦片厚度為25μm,山羊血清封閉,孵育一抗,4℃過夜,二抗孵育2小時,每步結(jié)束后PBS清洗3次,每次清洗5分鐘,隨后DAB顯色,封片。顯微鏡下觀察比較各組小鼠前額葉皮層與海馬區(qū)的Aβ斑塊、激活的小膠質(zhì)細胞（CD45陽性細胞）數(shù)量。（2）ELISA檢測:將給藥后各組小鼠新鮮腦組織取出,高速離心提取前額葉... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學山西省

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 抗Aβ31-35單鏈抗體對APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠腦內(nèi)Aβ病理特征的影響
    1 材料與方法
        1.1 主要儀器、軟件和試劑
        1.2 實驗方法
    2 結(jié)果
        2.1 scFv17減少APP/PS1小鼠腦內(nèi)Aβ斑塊面積
        2.2 scFv17比6E10更有效地清除APP/PS1小鼠腦內(nèi)Aβ寡聚體
    3 結(jié)論
第二部分 抗Aβ31-35單鏈抗體調(diào)節(jié)APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠腦內(nèi)神經(jīng)炎性反應(yīng)
    1 材料與方法
        1.1 主要儀器和試劑
        1.2 實驗方法
    2 結(jié)果
        2.1 scFv17輕微激活小膠質(zhì)細胞
        2.2 scFv17促進抗炎因子釋放
    3 結(jié)論
第三部分 scFv17調(diào)節(jié)APP/PS1小鼠腦內(nèi)Aβ相關(guān)酶的分泌
    1 材料與方法
        1.1 主要儀器和試劑
        1.2 實驗方法
    2 結(jié)果
        2.1 scFv17顯著提高了海馬組織中的sAPPα表達
        2.2 6E10顯著降低了海馬組織中BACE1的表達
        2.3 6E10與scFv17均大幅減少了海馬組織中的內(nèi)皮素含量
    3 結(jié)論
    4 討論
參考文獻
綜述 單鏈抗體與阿爾茨海默病免疫治療
    參考文獻
致謝
個人簡歷


【參考文獻】：
期刊論文
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[3]神經(jīng)免疫炎癥與阿爾茨海默病[J]. 左麗君,張巍.  中華臨床醫(yī)師雜志(電子版). 2013(14)
[4]小膠質(zhì)細胞與阿爾茨海默病[J]. 蔡志友,晏勇.  生命科學. 2008(01)
[5]β-淀粉樣蛋白31-35片段對海馬神經(jīng)元分離膜片Ca2+激活大電導(dǎo)鉀通道的抑制[J]. 祁金順,喬健天.  生理學報. 2001(03)



本文編號：3038371