甲基乙二醛（Methylglyoxal,MG）是一種細(xì)胞毒素代謝副產(chǎn)物,廣泛產(chǎn)生于糖、氨基酸、丙酮等代謝過(guò)程。它可通過(guò)蛋白質(zhì)的糖基化修飾和不可逆交聯(lián)影響蛋白、核酸、脂質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)和功能,導(dǎo)致細(xì)胞損傷甚至死亡。乙二醛酶系統(tǒng)是MG的主要清除途徑,可以將甲基乙二醛轉(zhuǎn)化為乳酸,參與植物的生長(zhǎng)發(fā)育調(diào)節(jié),并在非生物脅迫響應(yīng)中發(fā)揮重要作用。本研究根據(jù)玉米響應(yīng)MG處理的轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析,篩選到一個(gè)MG表達(dá)上調(diào)的乙二醛酶II基因。通過(guò)RT-PCR從玉米自交系B73基因組中同源克隆該基因,命名為ZmGLYⅡ-2。對(duì)該基因的序列特征、表達(dá)特性及其生物學(xué)功能進(jìn)行了系統(tǒng)分析和鑒定。主要研究結(jié)果如下:序列分析表明,該基因的CDS全長(zhǎng)777bp,編碼長(zhǎng)258個(gè)氨基酸的肽鏈,預(yù)測(cè)蛋白分子量為28755.8Da,等電點(diǎn)為5.67,含有有金屬β-內(nèi)酰胺酶中保守的離子結(jié)合基序（THXHXDH）和活性位點(diǎn)（C/GHT）。蛋白序列比對(duì)及進(jìn)化分析表明,ZmGLYⅡ-2及其直系同源蛋白是植物基因組中廣泛存在的一個(gè)乙二醛酶II家族成員,高粱同源蛋白與之相似性最高。構(gòu)建35S::ZmGLYⅡ-2-GFP植物融合表達(dá)載體后,利用農(nóng)桿菌侵染法... 

【文章來(lái)源】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】：73 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

甲基乙二醛的合成、損傷作用及解毒系統(tǒng)（Hasanuzzamanetal.,2017）

圖 1-2 生物體內(nèi)的乙二醛酶系統(tǒng)Fig. 1-2 glyoxalase system in biology能肽裂解酶（Lactoylglutathione lyase）蟲(chóng)等生物體中，屬于細(xì)胞內(nèi)解毒酶系1978; Deswal and Sopory., 1991; Espa 2005）。在 GLYI 的作用下，MG 和和組織中 MG 的生理活性濃度。）酶，需要二價(jià)金屬陽(yáng)離子來(lái)結(jié)合并生物中 GLYI 是鎳離子（Ni2+）依賴(lài)但隨著研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn)原核生

分析ZmGLYII-2 基因的克隆及序列分析葉片響應(yīng) MG 的差異基因表達(dá)譜中，我們檢測(cè)到 B73 玉2G031825 呈顯著誘導(dǎo)表達(dá)，基因注釋表明此基因編碼一個(gè)源基因命名為 ZmGLYII-2。從玉米自交系 B73 中克隆此基和生物學(xué)功能鑒定。ZmGLYII-2 cDNA 的分離Izol 法從玉米葉片中提取總 RNA，然后反轉(zhuǎn)錄為 cDNA。到自交系 B73 基因組中的基因 GRMZM2G031825 的核苷YII/F 和 ZmGLYII/R，以反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增A B

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]玉米乙二醛酶系統(tǒng)的基因組學(xué)分析及ZmGLYI-8基因的功能鑒定[D]. 董偉.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016



本文編號(hào)：3016060