目的:利用原核表達(dá)載體pGEX-6p-1-PTD4-apoptin表達(dá)PTD4-apoptin,分離純化后驗證PTD4-apoptin誘導(dǎo)Hela細(xì)胞凋亡的作用;探討PTD4-apoptin對促凋亡基因bak/b ax、細(xì)胞色素c和Caspase-3及細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)因子（apoptosis inducing factor AIF）的影響,研究apoptin誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的部分機(jī)制。方法:將原核表達(dá)載體pGEX-6p-1-PTD4-apoptin轉(zhuǎn)化至Ecoli.BL21（DE3）菌株中,通過IPTG誘導(dǎo)表達(dá),提取純化得到目的蛋白。將PTD4-apoptin,加入Hela細(xì)胞的培養(yǎng)基中作用后,觀察Hela細(xì)胞凋亡現(xiàn)象,驗證PTD4-apoptin的凋亡作用,并使用CCK8試劑盒檢測其對Hela細(xì)胞的抑制效果。然后,采用RT-PCR、western-blot檢測PTD4-apoptin作用后,Hela細(xì)胞中bak/bax表達(dá)量、細(xì)胞色素c和Caspase-3在細(xì)胞質(zhì)中的含量,及AIF在線粒體和細(xì)胞質(zhì)中的含量變化。利用環(huán)孢霉素A,抑制AIF從線粒體中釋放,檢測PTD4-apoptin對Hel... 

【文章來源】：佳木斯大學(xué)黑龍江省

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言
文獻(xiàn)綜述
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
英文縮寫
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文
附圖


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3011125