草莓TT10基因的克隆及在原花青素合成中的功能研究
發(fā)布時間:2021-01-29 15:04
本試驗以‘紅顏’草莓(Fragaria×ananassa cv.Bebihoppe)為材料,通過同源克隆獲得Transparent Testa 10(TT10)的基因序列并對其進行了生物信息學(xué)分析和時空表達模式分析。通過構(gòu)建沉默和過表達載體在草莓果實中分別沉默和過表達TT10基因,結(jié)合果實中原花青素單體的含量變化,來初步闡明草莓TT10基因在草莓果實原花青素合成中的功能。主要研究結(jié)果如下:1、通過同源克隆獲得‘紅顏’草莓TT10基因全長編碼序列(Full Coding Sequences,CDS),命名為FaTT10。序列分析表明:草莓FaTT10 CDS區(qū)全長1704bp,編碼567個氨基酸殘基;將其推定編碼的氨基酸序列與其他植物漆酶氨基酸序列比對發(fā)現(xiàn),草莓FaTT10蛋白序列中具有漆酶蛋白典型的Cu2+結(jié)合區(qū)域(L1-L4),即4個His-rich結(jié)構(gòu)。2、采用定量PCR分析FaTT10基因的時空表達模式,結(jié)果表明:FaTT10基因在草莓各組織中有特異性表達,在果實(小綠期)中表達量最高,其次是在莖、花、根和匍匐莖中表達量較高,在葉中表達量很低;其在草莓果實中...
【文章來源】:四川農(nóng)業(yè)大學(xué)四川省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:75 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
原花青素二聚體B2、B5和A2的化學(xué)結(jié)構(gòu)
也是合成原花青素和花青苷必經(jīng)的公共途輔酶 A(malonyl-CoA)經(jīng)查爾酮合酶(chalcone syn酮,然后查爾酮異構(gòu)酶(chalcone isomerase,CHI)將-羥化酶(flavanone 3-hydroxylase,F(xiàn)3H)和類黃酮-3’-F3’H)進行羥化并生成黃烷酮醇(Dihydroflavonols)原酶(dihydroflavonol reductase,DFR)的作用,nidins),最后花青素合成酶(anthocyanidin synthase而后花青素作為底物,進入原花青素特異途徑。青素特異途徑:進入原花青素特異途徑的花青素reductase,ANR)作用下,生成表兒茶素(2,3-順式黃體。在葡萄、茶(Camellia sinensis)、紅豆(Abrus pa)等植物中,無色花青素還原酶(leucoanthocyanidi花青素轉(zhuǎn)化成兒茶素(2,3-反式黃烷-3-醇),但擬南芥
圖 1-3 原花青素轉(zhuǎn)運和聚合模型[10]Fig.1-3 Model for PAtransport and polymerization生物合成的結(jié)構(gòu)基因可分為前期基因(early biosybiosynthetic genes, LBGs)兩部分[58,41]。前期基因碼的蛋白質(zhì)參與原花青素、花青素和黃酮醇三種:DFR、ANS、ANR、TT12、AHA10 和 TT19[43,44,體物質(zhì)的合成外,也參與原花青素的修飾和劃分[。成的分子調(diào)控機制合成途徑主要受到 MBW(MYB–bHLH–WDR)復(fù)(如:TT2/MYB123 和 MYB5),R/B-like basic hel,EGL3/bHLH002,和 TT8/bHLH042)以及 WD re
【參考文獻】:
期刊論文
[1]原花青素的研究進展[J]. 張慧文,張玉,馬超美. 食品科學(xué). 2015(05)
[2]OsCYP2基因?qū)氩葺^表達提高植株耐鹽性[J]. 王淑珍,阮松林,肖文斐,馬華升,周歷萍,裘劼人,童建新,來文國. 果樹學(xué)報. 2014(02)
[3]擬南芥漆酶基因AtLAC4參與生長及非生物脅迫響應(yīng)[J]. 張盛春,鞠常亮,王小菁. 植物學(xué)報. 2012(04)
[4]擬南芥漆酶基因AtLAC2調(diào)控植物生長發(fā)育的研究[J]. 張盛春,張玉平,王小菁. 植物生理學(xué)報. 2012(06)
[5]原花青素聚合作用機理研究進展[J]. 彭清忠,謝德玉. 西北植物學(xué)報. 2012(03)
[6]葡萄籽原花青素預(yù)防大鼠動脈粥樣硬化作用機制研究[J]. 薛燕濰,王峰. 中國實用醫(yī)藥. 2010(13)
[7]葡萄籽提取物抗氧化作用人體實驗研究[J]. 高峰,張琨,宋昕恬,吳曉剛,張晶瑩. 中國衛(wèi)生工程學(xué). 2010(02)
[8]原花色素抗氧化生物活性研究進展[J]. 張長貴,董加寶,謝伍容. 糧食與油脂. 2009(06)
[9]草莓果實外源基因瞬時表達系統(tǒng)的建立[J]. 劉敏,滕文靜,董清華,晁慧娟,李鳳嵐,邱德有. 果樹學(xué)報. 2009(01)
[10]高粱原花青素對α-淀粉酶和蛋白酶活力影響的DSC研究[J]. 劉睿,潘思軼,謝筆鈞. 食品與發(fā)酵工業(yè). 2006(07)
博士論文
[1]中國甜柿自然脫澀相關(guān)基因ADH和PDC的分離及功能驗證[D]. 莫榮利.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
碩士論文
[1]利用VIGS技術(shù)對草莓FaMYB5基因功能的研究[D]. 王玲.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[2]原花青素四聚體干預(yù)變形鏈球菌血清型c體外粘附途徑及機理研究[D]. 黃曼.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[3]ANS、ANR和LAR基因在草莓花青素代謝途徑中的調(diào)控作用[D]. 張曉楠.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
本文編號:3007089
【文章來源】:四川農(nóng)業(yè)大學(xué)四川省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:75 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
原花青素二聚體B2、B5和A2的化學(xué)結(jié)構(gòu)
也是合成原花青素和花青苷必經(jīng)的公共途輔酶 A(malonyl-CoA)經(jīng)查爾酮合酶(chalcone syn酮,然后查爾酮異構(gòu)酶(chalcone isomerase,CHI)將-羥化酶(flavanone 3-hydroxylase,F(xiàn)3H)和類黃酮-3’-F3’H)進行羥化并生成黃烷酮醇(Dihydroflavonols)原酶(dihydroflavonol reductase,DFR)的作用,nidins),最后花青素合成酶(anthocyanidin synthase而后花青素作為底物,進入原花青素特異途徑。青素特異途徑:進入原花青素特異途徑的花青素reductase,ANR)作用下,生成表兒茶素(2,3-順式黃體。在葡萄、茶(Camellia sinensis)、紅豆(Abrus pa)等植物中,無色花青素還原酶(leucoanthocyanidi花青素轉(zhuǎn)化成兒茶素(2,3-反式黃烷-3-醇),但擬南芥
圖 1-3 原花青素轉(zhuǎn)運和聚合模型[10]Fig.1-3 Model for PAtransport and polymerization生物合成的結(jié)構(gòu)基因可分為前期基因(early biosybiosynthetic genes, LBGs)兩部分[58,41]。前期基因碼的蛋白質(zhì)參與原花青素、花青素和黃酮醇三種:DFR、ANS、ANR、TT12、AHA10 和 TT19[43,44,體物質(zhì)的合成外,也參與原花青素的修飾和劃分[。成的分子調(diào)控機制合成途徑主要受到 MBW(MYB–bHLH–WDR)復(fù)(如:TT2/MYB123 和 MYB5),R/B-like basic hel,EGL3/bHLH002,和 TT8/bHLH042)以及 WD re
【參考文獻】:
期刊論文
[1]原花青素的研究進展[J]. 張慧文,張玉,馬超美. 食品科學(xué). 2015(05)
[2]OsCYP2基因?qū)氩葺^表達提高植株耐鹽性[J]. 王淑珍,阮松林,肖文斐,馬華升,周歷萍,裘劼人,童建新,來文國. 果樹學(xué)報. 2014(02)
[3]擬南芥漆酶基因AtLAC4參與生長及非生物脅迫響應(yīng)[J]. 張盛春,鞠常亮,王小菁. 植物學(xué)報. 2012(04)
[4]擬南芥漆酶基因AtLAC2調(diào)控植物生長發(fā)育的研究[J]. 張盛春,張玉平,王小菁. 植物生理學(xué)報. 2012(06)
[5]原花青素聚合作用機理研究進展[J]. 彭清忠,謝德玉. 西北植物學(xué)報. 2012(03)
[6]葡萄籽原花青素預(yù)防大鼠動脈粥樣硬化作用機制研究[J]. 薛燕濰,王峰. 中國實用醫(yī)藥. 2010(13)
[7]葡萄籽提取物抗氧化作用人體實驗研究[J]. 高峰,張琨,宋昕恬,吳曉剛,張晶瑩. 中國衛(wèi)生工程學(xué). 2010(02)
[8]原花色素抗氧化生物活性研究進展[J]. 張長貴,董加寶,謝伍容. 糧食與油脂. 2009(06)
[9]草莓果實外源基因瞬時表達系統(tǒng)的建立[J]. 劉敏,滕文靜,董清華,晁慧娟,李鳳嵐,邱德有. 果樹學(xué)報. 2009(01)
[10]高粱原花青素對α-淀粉酶和蛋白酶活力影響的DSC研究[J]. 劉睿,潘思軼,謝筆鈞. 食品與發(fā)酵工業(yè). 2006(07)
博士論文
[1]中國甜柿自然脫澀相關(guān)基因ADH和PDC的分離及功能驗證[D]. 莫榮利.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
碩士論文
[1]利用VIGS技術(shù)對草莓FaMYB5基因功能的研究[D]. 王玲.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[2]原花青素四聚體干預(yù)變形鏈球菌血清型c體外粘附途徑及機理研究[D]. 黃曼.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[3]ANS、ANR和LAR基因在草莓花青素代謝途徑中的調(diào)控作用[D]. 張曉楠.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
本文編號:3007089
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