基于RNA-Seq的3T3-L1前脂肪細胞分化過程中差異表達基因研究
發(fā)布時間:2021-01-28 20:29
脂肪細胞不僅是脂肪組織的主要構成組分,而且在整個生命體的新陳代謝穩(wěn)態(tài)調(diào)控過程中發(fā)揮重要作用。脂肪生成是指由成纖維細胞狀的前脂肪細胞發(fā)育成為成熟脂肪細胞的過程,并且脂肪生成是一個需要大量轉錄因子按次序活化的多級精準調(diào)控過程,如過氧化物增殖體激活受體γ(peroxisome proliferator activated receptor-γ,PPAR-γ)和CCAAT/增強子結合蛋白(CCAAT/enhancer-binding protein,C/EBP)基因家族。為了研究調(diào)控脂肪生成的轉錄組事件,對3T3-L1前脂肪細胞(D0)和其分化的成熟脂肪細胞(D13)進行了RNA-Seq測序。與前脂肪細胞(D0)相比,成熟脂肪細胞(D13)共有4443個倍性變化≥2.0的差異表達基因。通過對RNA-Seq數(shù)據(jù)分析,發(fā)現(xiàn)在3T3-L1前脂肪細胞脂肪分化過程中甲基固醇單加氧酶1(Methylsterol monooxygenase1,MSMO1)的表達是顯著下調(diào)的。這表明MSMO1可能是脂肪細胞分化過程中一個新的調(diào)控因子,但它在脂肪生成中的作用尚未報道,因此重點對該基因在脂肪生成中的功能進行研究。...
【文章來源】:聊城大學山東省
【文章頁數(shù)】:48 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
脂肪細胞分化過程及關鍵調(diào)控因子的功能相互關系
2-1. 3T3-L1 前脂肪細胞在體外分化成為成熟脂肪細胞。色;(B)前脂肪細胞(D0)和脂肪細胞(D13)脂肪標志基(**P<0.01. β-actin 作為內(nèi)參)檢測本進行轉錄組數(shù)據(jù)分析,由表2-2可見,經(jīng)過質量(D0-1、D0-2、D13-1和D13-2)RNA完整性指數(shù)RIN ≥ 9.0;OD 260/OD 280 ≥ 2.0;28 S/18 S的污染,同時也沒有降解,可以用于下一步的RN表 2-2. 樣本RNA質量OD 260/OD 280 RIN 22.02 9.1 2.04 9.2 2.03 9.1
肪細胞(D0)和脂肪細胞(D13)中分別獲得了約120.5 million和122.8 million的cleeads;在四個樣品中,uniquely mapped reads 的范圍是43.1~53.9 million;定位到參因組中的比例的范圍是88.8 ~ 91.7%(圖2-2B)。大約有95.9%的mapped sequeneads定位到外顯子區(qū)(圖2-2C)?傊@些數(shù)據(jù)顯示RNA-Seq的數(shù)據(jù)是高質量的表 2-3. 測序數(shù)據(jù)統(tǒng)計表ample Reads Q20 (%) GC (%)0-1 61216586 93.69 51.760-2 61793042 95.01 51.6713-1 56638666 93.67 53.6713-2 69187806 94.33 53.06注:Q20(%)表示 Phred 數(shù)值大于 20 的堿基占總體堿基的百分比,GC content(%)表示 G 和 C 的數(shù)量總和占總的堿基數(shù)量的百分比。
【參考文獻】:
期刊論文
[1]單細胞轉錄組測序技術原理及其應用[J]. 李麗娟,師書玥,張村宇,賀花,雷初朝,陳宏,黃永震. 中國畜牧雜志. 2019(02)
[2]肉雞MSMO1基因的克隆及表達模式分析[J]. 徐鳳華,宋琪,邢晉祎,孫煒涵. 西南農(nóng)業(yè)學報. 2017(12)
[3]利用RNA-seq技術篩選大白豬皮下和肌內(nèi)脂肪組織差異表達基因[J]. 黃萬龍,張秀秀,李嬡,苗向陽. 遺傳. 2017(06)
[4]番茄轉錄組學研究進展[J]. 劉冠,趙婷婷,楊歡歡,張冬野,姜景彬,李景富,許向陽. 基因組學與應用生物學. 2016(10)
[5]北京鴨腹部脂肪組織的轉錄組特征分析[J]. 陳黎,李國勤,田勇,沈軍達,陶爭榮,徐堅,曾濤,盧立志. 浙江農(nóng)業(yè)學報. 2016(05)
[6]基于RNA-Seq識別山羊肉品質候選基因[J]. 孟憲然,杜琛,王靜,付紹印,鄭竹清,張文廣,李金泉. 畜牧獸醫(yī)學報. 2015(08)
[7]高通量測序技術的發(fā)展及其在生命科學中的應用[J]. 杜玲,劉剛,陸健,劉丑生,哈福. 中國畜牧獸醫(yī). 2014(12)
博士論文
[1]KLF3和KLF15基因對牛前體脂肪細胞分化和脂質代謝調(diào)控研究[D]. 郭紅芳.西北農(nóng)林科技大學 2018
[2]延黃牛脂肪細胞轉錄組學及相關功能基因對成脂分化作用的研究[D]. 云巾宴.延邊大學 2018
[3]基于轉錄組桑葉DNJ類多羥基生物堿合成關鍵酶基因的挖掘及分析[D]. 王篤軍.江蘇大學 2018
[4]銅代謝及銅轉運蛋白CTR1在小鼠脂肪組織中的功能研究[D]. 王超.中國農(nóng)業(yè)科學院 2017
[5]豬皮下與內(nèi)臟脂肪組織mRNA轉錄組鑒定和差異分析[D]. 王滔.四川農(nóng)業(yè)大學 2013
[6]脂肪細胞分化相關因子基因表達在豬生長過程中的變化規(guī)律研究[D]. 姜俊芳.浙江大學 2006
碩士論文
[1]維生素D受體在SD大鼠原代脂肪細胞分化過程中的表達規(guī)律及脂質沉積研究[D]. 楊祎琦.陜西理工學院 2016
[2]ATP抑制小鼠3T3-L1前體脂肪細胞增殖的轉錄組分析[D]. 何劉軍.四川農(nóng)業(yè)大學 2016
[3]基于二代測序數(shù)據(jù)研究神經(jīng)母細胞瘤中的RNA編輯現(xiàn)象[D]. 史彩萍.華東師范大學 2014
[4]神經(jīng)肽Y對3T3-L1前脂肪細胞增殖與分化的影響及其作用機制的研究[D]. 唐浩能.中南大學 2012
[5]棕色脂肪組織特異性基因在抵抗肥胖中作用的研究[D]. 孫慧.華中科技大學 2011
[6]西雜牛PPARγ2、PGC-1α、MEF2C基因表達量及其與肌內(nèi)脂肪含量、嫩度的相關分析[D]. 李健.四川農(nóng)業(yè)大學 2010
[7]骨髓間質干細胞在高脂飼料誘導肥胖大鼠體內(nèi)的遷移分化[D]. 蔣茂瑩.重慶醫(yī)科大學 2009
[8]野豬、野家雜交豬及家豬LPL基因表達規(guī)律及定量比較研究[D]. 丁琳琳.東北農(nóng)業(yè)大學 2008
本文編號:3005642
【文章來源】:聊城大學山東省
【文章頁數(shù)】:48 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
脂肪細胞分化過程及關鍵調(diào)控因子的功能相互關系
2-1. 3T3-L1 前脂肪細胞在體外分化成為成熟脂肪細胞。色;(B)前脂肪細胞(D0)和脂肪細胞(D13)脂肪標志基(**P<0.01. β-actin 作為內(nèi)參)檢測本進行轉錄組數(shù)據(jù)分析,由表2-2可見,經(jīng)過質量(D0-1、D0-2、D13-1和D13-2)RNA完整性指數(shù)RIN ≥ 9.0;OD 260/OD 280 ≥ 2.0;28 S/18 S的污染,同時也沒有降解,可以用于下一步的RN表 2-2. 樣本RNA質量OD 260/OD 280 RIN 22.02 9.1 2.04 9.2 2.03 9.1
肪細胞(D0)和脂肪細胞(D13)中分別獲得了約120.5 million和122.8 million的cleeads;在四個樣品中,uniquely mapped reads 的范圍是43.1~53.9 million;定位到參因組中的比例的范圍是88.8 ~ 91.7%(圖2-2B)。大約有95.9%的mapped sequeneads定位到外顯子區(qū)(圖2-2C)?傊@些數(shù)據(jù)顯示RNA-Seq的數(shù)據(jù)是高質量的表 2-3. 測序數(shù)據(jù)統(tǒng)計表ample Reads Q20 (%) GC (%)0-1 61216586 93.69 51.760-2 61793042 95.01 51.6713-1 56638666 93.67 53.6713-2 69187806 94.33 53.06注:Q20(%)表示 Phred 數(shù)值大于 20 的堿基占總體堿基的百分比,GC content(%)表示 G 和 C 的數(shù)量總和占總的堿基數(shù)量的百分比。
【參考文獻】:
期刊論文
[1]單細胞轉錄組測序技術原理及其應用[J]. 李麗娟,師書玥,張村宇,賀花,雷初朝,陳宏,黃永震. 中國畜牧雜志. 2019(02)
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[4]番茄轉錄組學研究進展[J]. 劉冠,趙婷婷,楊歡歡,張冬野,姜景彬,李景富,許向陽. 基因組學與應用生物學. 2016(10)
[5]北京鴨腹部脂肪組織的轉錄組特征分析[J]. 陳黎,李國勤,田勇,沈軍達,陶爭榮,徐堅,曾濤,盧立志. 浙江農(nóng)業(yè)學報. 2016(05)
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[7]高通量測序技術的發(fā)展及其在生命科學中的應用[J]. 杜玲,劉剛,陸健,劉丑生,哈福. 中國畜牧獸醫(yī). 2014(12)
博士論文
[1]KLF3和KLF15基因對牛前體脂肪細胞分化和脂質代謝調(diào)控研究[D]. 郭紅芳.西北農(nóng)林科技大學 2018
[2]延黃牛脂肪細胞轉錄組學及相關功能基因對成脂分化作用的研究[D]. 云巾宴.延邊大學 2018
[3]基于轉錄組桑葉DNJ類多羥基生物堿合成關鍵酶基因的挖掘及分析[D]. 王篤軍.江蘇大學 2018
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[5]豬皮下與內(nèi)臟脂肪組織mRNA轉錄組鑒定和差異分析[D]. 王滔.四川農(nóng)業(yè)大學 2013
[6]脂肪細胞分化相關因子基因表達在豬生長過程中的變化規(guī)律研究[D]. 姜俊芳.浙江大學 2006
碩士論文
[1]維生素D受體在SD大鼠原代脂肪細胞分化過程中的表達規(guī)律及脂質沉積研究[D]. 楊祎琦.陜西理工學院 2016
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[6]西雜牛PPARγ2、PGC-1α、MEF2C基因表達量及其與肌內(nèi)脂肪含量、嫩度的相關分析[D]. 李健.四川農(nóng)業(yè)大學 2010
[7]骨髓間質干細胞在高脂飼料誘導肥胖大鼠體內(nèi)的遷移分化[D]. 蔣茂瑩.重慶醫(yī)科大學 2009
[8]野豬、野家雜交豬及家豬LPL基因表達規(guī)律及定量比較研究[D]. 丁琳琳.東北農(nóng)業(yè)大學 2008
本文編號:3005642
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