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對蝦急性肝胰腺壞死病病原毒素基因在不同環(huán)境下表達差異研究

發(fā)布時間:2021-01-26 06:06
  急性肝胰腺壞死病(AHPND)是由副溶血弧菌引起的對蝦病害,給世界養(yǎng)蝦業(yè)造成了嚴重的經(jīng)濟損失。本文旨在研究主要致病因子Pir毒素基因在不同環(huán)境因素處理下的表達差異,初步探究抑制Pir毒素基因表達的可能措施。應用熒光定量RT-PCR技術(shù),采用比較CT值法檢測致病菌中Pir毒素基因在不同溫度和pH條件下的表達量。結(jié)果表明,試驗分離株為引發(fā)對蝦AHPND毒素蛋白Pir的致病株,在18℃、24℃、30℃和36℃條件下,Pir毒素基因的表達量隨溫度的增加而升高,在pH 7、pH 8和pH 9條件下,Pir毒素基因的表達量隨pH的上升而降低,且p H因素對其表達量差別較大。研究結(jié)果為探究副溶血弧菌致病力強弱和環(huán)境因素的關(guān)系提供了基礎(chǔ)數(shù)據(jù),同時也為養(yǎng)殖生產(chǎn)中AHPND防控策略的制定提供了科學依據(jù)。 

【文章來源】:中國農(nóng)學通報. 2020,36(36)

【文章頁數(shù)】:5 頁

【部分圖文】:

對蝦急性肝胰腺壞死病病原毒素基因在不同環(huán)境下表達差異研究


Pir毒素電泳結(jié)果

電泳圖,細菌,電泳,比值


提取不同試驗處理組樣品總RNA電泳圖,如圖2所示,細菌總RNA條中23S r RNA和16S r RNA電泳條帶分布清晰,表明所提取RNA完整,可以用于后續(xù)研究。分別取1μL RNA樣品用Bio Tek酶標儀的核酸測定功能測定OD280、OD260和OD230值,OD260/280比值在1.8~2.0,OD260/230比值>1.8。說明所提取RNA質(zhì)量較好。2.3 溫度變化對Pir毒素基因表達差異分析

基因,處理組,毒素,溫度


攜帶Pir毒素基因的副溶血弧菌在不同的溫度條件處理下,Pir毒素基因表達均有明顯不同。如圖3所示,以溫度條件30℃為參照組,應用ABI 7500 Fast熒光定量PCR系統(tǒng)分析軟件,采用2-ΔΔCt法進行Pir毒素基因的表達差異對比,在18℃、24℃、30℃和36℃條件下,Pir毒素基因相對表達量的值分別為0.4,0.6,1和1.4。2.4 p H變化對毒素Pir基因表達差異分析

【參考文獻】:
期刊論文
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[6]實時熒光定量PCR技術(shù)研究進展及其應用[J]. 王玉倩,薛秀花.  生物學通報. 2016(02)
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[9]熒光定量PCR法檢測副溶血弧菌tlh和tdh基因的表達差異[J]. 陳星,潘迎捷,孫曉紅,趙勇.  微生物學通報. 2011(07)
[10]浙江沿海地區(qū)海產(chǎn)品及環(huán)境中副溶血弧菌的分離與主要毒力基因分析[J]. 金培婕,吳蓓蓓,王淑娜,俞盈,錢永華,方維煥.  微生物學通報. 2009(07)

博士論文
[1]副溶血弧菌tdh、trh和tlh基因的克隆、表達及基因敲除對其溶血活性的影響[D]. 趙永剛.中國海洋大學 2010



本文編號:3000605

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