對蝦急性肝胰腺壞死病病原毒素基因在不同環(huán)境下表達差異研究
發(fā)布時間:2021-01-26 06:06
急性肝胰腺壞死病(AHPND)是由副溶血弧菌引起的對蝦病害,給世界養(yǎng)蝦業(yè)造成了嚴重的經(jīng)濟損失。本文旨在研究主要致病因子Pir毒素基因在不同環(huán)境因素處理下的表達差異,初步探究抑制Pir毒素基因表達的可能措施。應用熒光定量RT-PCR技術(shù),采用比較CT值法檢測致病菌中Pir毒素基因在不同溫度和pH條件下的表達量。結(jié)果表明,試驗分離株為引發(fā)對蝦AHPND毒素蛋白Pir的致病株,在18℃、24℃、30℃和36℃條件下,Pir毒素基因的表達量隨溫度的增加而升高,在pH 7、pH 8和pH 9條件下,Pir毒素基因的表達量隨pH的上升而降低,且p H因素對其表達量差別較大。研究結(jié)果為探究副溶血弧菌致病力強弱和環(huán)境因素的關(guān)系提供了基礎(chǔ)數(shù)據(jù),同時也為養(yǎng)殖生產(chǎn)中AHPND防控策略的制定提供了科學依據(jù)。
【文章來源】:中國農(nóng)學通報. 2020,36(36)
【文章頁數(shù)】:5 頁
【部分圖文】:
Pir毒素電泳結(jié)果
提取不同試驗處理組樣品總RNA電泳圖,如圖2所示,細菌總RNA條中23S r RNA和16S r RNA電泳條帶分布清晰,表明所提取RNA完整,可以用于后續(xù)研究。分別取1μL RNA樣品用Bio Tek酶標儀的核酸測定功能測定OD280、OD260和OD230值,OD260/280比值在1.8~2.0,OD260/230比值>1.8。說明所提取RNA質(zhì)量較好。2.3 溫度變化對Pir毒素基因表達差異分析
攜帶Pir毒素基因的副溶血弧菌在不同的溫度條件處理下,Pir毒素基因表達均有明顯不同。如圖3所示,以溫度條件30℃為參照組,應用ABI 7500 Fast熒光定量PCR系統(tǒng)分析軟件,采用2-ΔΔCt法進行Pir毒素基因的表達差異對比,在18℃、24℃、30℃和36℃條件下,Pir毒素基因相對表達量的值分別為0.4,0.6,1和1.4。2.4 p H變化對毒素Pir基因表達差異分析
【參考文獻】:
期刊論文
[1]2株副溶血弧菌不同鹽度下致病性和毒力基因差異分析[J]. 黃倞,王元,馬清揚,英娜,趙姝,吳越,房文紅. 海洋漁業(yè). 2019(06)
[2]上海地區(qū)蝦源弧菌分離鑒定及分子分型研究[J]. 安偉,張海強,高曉華. 中國農(nóng)學通報. 2018(36)
[3]凡納濱對蝦急性肝胰腺壞死。ˋHPND)病原分離鑒定及其致病性分析[J]. 賈丹,史成銀,黃倢,張慶利,萬曉媛,許華,劉冉陽,王海波,郭程程,謝國駟. 漁業(yè)科學進展. 2018(03)
[4]凡納濱對蝦急性肝胰腺壞死綜合征研究進展[J]. 蔣葛,沈輝,萬夕和,喬毅. 動物醫(yī)學進展. 2018(04)
[5]副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)中溶源噬菌體與其宿主菌致病力的相關(guān)性[J]. 王娜,王海亮,白楠,黃倢,謝達祥,謝起浪,於俊琦,萬夕和. 漁業(yè)科學進展. 2016(02)
[6]實時熒光定量PCR技術(shù)研究進展及其應用[J]. 王玉倩,薛秀花. 生物學通報. 2016(02)
[7]副溶血性弧菌毒力基因表達時內(nèi)參基因的選擇[J]. 李沁,彭織云,陳鑫鵬,孫曉紅,潘迎捷,趙勇. 微生物學報. 2013(03)
[8]一株凡納濱對蝦病原菌的分離、鑒定及其致病力分析[J]. 張寶存,劉飛,邊慧慧,劉杰,潘魯青,黃倢. 漁業(yè)科學進展. 2012(02)
[9]熒光定量PCR法檢測副溶血弧菌tlh和tdh基因的表達差異[J]. 陳星,潘迎捷,孫曉紅,趙勇. 微生物學通報. 2011(07)
[10]浙江沿海地區(qū)海產(chǎn)品及環(huán)境中副溶血弧菌的分離與主要毒力基因分析[J]. 金培婕,吳蓓蓓,王淑娜,俞盈,錢永華,方維煥. 微生物學通報. 2009(07)
博士論文
[1]副溶血弧菌tdh、trh和tlh基因的克隆、表達及基因敲除對其溶血活性的影響[D]. 趙永剛.中國海洋大學 2010
本文編號:3000605
【文章來源】:中國農(nóng)學通報. 2020,36(36)
【文章頁數(shù)】:5 頁
【部分圖文】:
Pir毒素電泳結(jié)果
提取不同試驗處理組樣品總RNA電泳圖,如圖2所示,細菌總RNA條中23S r RNA和16S r RNA電泳條帶分布清晰,表明所提取RNA完整,可以用于后續(xù)研究。分別取1μL RNA樣品用Bio Tek酶標儀的核酸測定功能測定OD280、OD260和OD230值,OD260/280比值在1.8~2.0,OD260/230比值>1.8。說明所提取RNA質(zhì)量較好。2.3 溫度變化對Pir毒素基因表達差異分析
攜帶Pir毒素基因的副溶血弧菌在不同的溫度條件處理下,Pir毒素基因表達均有明顯不同。如圖3所示,以溫度條件30℃為參照組,應用ABI 7500 Fast熒光定量PCR系統(tǒng)分析軟件,采用2-ΔΔCt法進行Pir毒素基因的表達差異對比,在18℃、24℃、30℃和36℃條件下,Pir毒素基因相對表達量的值分別為0.4,0.6,1和1.4。2.4 p H變化對毒素Pir基因表達差異分析
【參考文獻】:
期刊論文
[1]2株副溶血弧菌不同鹽度下致病性和毒力基因差異分析[J]. 黃倞,王元,馬清揚,英娜,趙姝,吳越,房文紅. 海洋漁業(yè). 2019(06)
[2]上海地區(qū)蝦源弧菌分離鑒定及分子分型研究[J]. 安偉,張海強,高曉華. 中國農(nóng)學通報. 2018(36)
[3]凡納濱對蝦急性肝胰腺壞死。ˋHPND)病原分離鑒定及其致病性分析[J]. 賈丹,史成銀,黃倢,張慶利,萬曉媛,許華,劉冉陽,王海波,郭程程,謝國駟. 漁業(yè)科學進展. 2018(03)
[4]凡納濱對蝦急性肝胰腺壞死綜合征研究進展[J]. 蔣葛,沈輝,萬夕和,喬毅. 動物醫(yī)學進展. 2018(04)
[5]副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)中溶源噬菌體與其宿主菌致病力的相關(guān)性[J]. 王娜,王海亮,白楠,黃倢,謝達祥,謝起浪,於俊琦,萬夕和. 漁業(yè)科學進展. 2016(02)
[6]實時熒光定量PCR技術(shù)研究進展及其應用[J]. 王玉倩,薛秀花. 生物學通報. 2016(02)
[7]副溶血性弧菌毒力基因表達時內(nèi)參基因的選擇[J]. 李沁,彭織云,陳鑫鵬,孫曉紅,潘迎捷,趙勇. 微生物學報. 2013(03)
[8]一株凡納濱對蝦病原菌的分離、鑒定及其致病力分析[J]. 張寶存,劉飛,邊慧慧,劉杰,潘魯青,黃倢. 漁業(yè)科學進展. 2012(02)
[9]熒光定量PCR法檢測副溶血弧菌tlh和tdh基因的表達差異[J]. 陳星,潘迎捷,孫曉紅,趙勇. 微生物學通報. 2011(07)
[10]浙江沿海地區(qū)海產(chǎn)品及環(huán)境中副溶血弧菌的分離與主要毒力基因分析[J]. 金培婕,吳蓓蓓,王淑娜,俞盈,錢永華,方維煥. 微生物學通報. 2009(07)
博士論文
[1]副溶血弧菌tdh、trh和tlh基因的克隆、表達及基因敲除對其溶血活性的影響[D]. 趙永剛.中國海洋大學 2010
本文編號:3000605
本文鏈接:http://sikaile.net/kejilunwen/jiyingongcheng/3000605.html
最近更新
教材專著