對蝦急性肝胰腺壞死病病原毒素基因在不同環(huán)境下表達(dá)差異研究
發(fā)布時(shí)間：2021-01-26 06:06
急性肝胰腺壞死病（AHPND）是由副溶血弧菌引起的對蝦病害,給世界養(yǎng)蝦業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。本文旨在研究主要致病因子Pir毒素基因在不同環(huán)境因素處理下的表達(dá)差異,初步探究抑制Pir毒素基因表達(dá)的可能措施。應(yīng)用熒光定量RT-PCR技術(shù),采用比較CT值法檢測致病菌中Pir毒素基因在不同溫度和pH條件下的表達(dá)量。結(jié)果表明,試驗(yàn)分離株為引發(fā)對蝦AHPND毒素蛋白Pir的致病株,在18℃、24℃、30℃和36℃條件下,Pir毒素基因的表達(dá)量隨溫度的增加而升高,在pH 7、pH 8和pH 9條件下,Pir毒素基因的表達(dá)量隨pH的上升而降低,且p H因素對其表達(dá)量差別較大。研究結(jié)果為探究副溶血弧菌致病力強(qiáng)弱和環(huán)境因素的關(guān)系提供了基礎(chǔ)數(shù)據(jù),同時(shí)也為養(yǎng)殖生產(chǎn)中AHPND防控策略的制定提供了科學(xué)依據(jù)。
【文章來源】：中國農(nóng)學(xué)通報(bào). 2020,36(36)
【文章頁數(shù)】：5 頁
【部分圖文】：
Pir毒素電泳結(jié)果
提取不同試驗(yàn)處理組樣品總RNA電泳圖，如圖2所示，細(xì)菌總RNA條中23S r RNA和16S r RNA電泳條帶分布清晰，表明所提取RNA完整，可以用于后續(xù)研究。分別取1μL RNA樣品用Bio Tek酶標(biāo)儀的核酸測定功能測定OD280、OD260和OD230值，OD260/280比值在1.8～2.0,OD260/230比值>1.8。說明所提取RNA質(zhì)量較好。2.3 溫度變化對Pir毒素基因表達(dá)差異分析
攜帶Pir毒素基因的副溶血弧菌在不同的溫度條件處理下，Pir毒素基因表達(dá)均有明顯不同。如圖3所示，以溫度條件30℃為參照組，應(yīng)用ABI 7500 Fast熒光定量PCR系統(tǒng)分析軟件，采用2-ΔΔCt法進(jìn)行Pir毒素基因的表達(dá)差異對比，在18℃、24℃、30℃和36℃條件下，Pir毒素基因相對表達(dá)量的值分別為0.4,0.6,1和1.4。2.4 p H變化對毒素Pir基因表達(dá)差異分析
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]2株副溶血弧菌不同鹽度下致病性和毒力基因差異分析[J]. 黃倞,王元,馬清揚(yáng),英娜,趙姝,吳越,房文紅. 海洋漁業(yè). 2019(06)
[2]上海地區(qū)蝦源弧菌分離鑒定及分子分型研究[J]. 安偉,張海強(qiáng),高曉華. 中國農(nóng)學(xué)通報(bào). 2018(36)
[3]凡納濱對蝦急性肝胰腺壞死病（AHPND）病原分離鑒定及其致病性分析[J]. 賈丹,史成銀,黃倢,張慶利,萬曉媛,許華,劉冉陽,王海波,郭程程,謝國駟. 漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展. 2018(03)
[4]凡納濱對蝦急性肝胰腺壞死綜合征研究進(jìn)展[J]. 蔣葛,沈輝,萬夕和,喬毅. 動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2018(04)
[5]副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）中溶源噬菌體與其宿主菌致病力的相關(guān)性[J]. 王娜,王海亮,白楠,黃倢,謝達(dá)祥,謝起浪,於俊琦,萬夕和. 漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展. 2016(02)
[6]實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)研究進(jìn)展及其應(yīng)用[J]. 王玉倩,薛秀花. 生物學(xué)通報(bào). 2016(02)
[7]副溶血性弧菌毒力基因表達(dá)時(shí)內(nèi)參基因的選擇[J]. 李沁,彭織云,陳鑫鵬,孫曉紅,潘迎捷,趙勇. 微生物學(xué)報(bào). 2013(03)
[8]一株凡納濱對蝦病原菌的分離、鑒定及其致病力分析[J]. 張寶存,劉飛,邊慧慧,劉杰,潘魯青,黃倢. 漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展. 2012(02)
[9]熒光定量PCR法檢測副溶血弧菌tlh和tdh基因的表達(dá)差異[J]. 陳星,潘迎捷,孫曉紅,趙勇. 微生物學(xué)通報(bào). 2011(07)
[10]浙江沿海地區(qū)海產(chǎn)品及環(huán)境中副溶血弧菌的分離與主要毒力基因分析[J]. 金培婕,吳蓓蓓,王淑娜,俞盈,錢永華,方維煥. 微生物學(xué)通報(bào). 2009(07)
博士論文
[1]副溶血弧菌tdh、trh和tlh基因的克隆、表達(dá)及基因敲除對其溶血活性的影響[D]. 趙永剛.中國海洋大學(xué) 2010
本文編號(hào)：3000605
【文章來源】：中國農(nóng)學(xué)通報(bào). 2020,36(36)
【文章頁數(shù)】：5 頁
【部分圖文】：
Pir毒素電泳結(jié)果
提取不同試驗(yàn)處理組樣品總RNA電泳圖，如圖2所示，細(xì)菌總RNA條中23S r RNA和16S r RNA電泳條帶分布清晰，表明所提取RNA完整，可以用于后續(xù)研究。分別取1μL RNA樣品用Bio Tek酶標(biāo)儀的核酸測定功能測定OD280、OD260和OD230值，OD260/280比值在1.8～2.0,OD260/230比值>1.8。說明所提取RNA質(zhì)量較好。2.3 溫度變化對Pir毒素基因表達(dá)差異分析
攜帶Pir毒素基因的副溶血弧菌在不同的溫度條件處理下，Pir毒素基因表達(dá)均有明顯不同。如圖3所示，以溫度條件30℃為參照組，應(yīng)用ABI 7500 Fast熒光定量PCR系統(tǒng)分析軟件，采用2-ΔΔCt法進(jìn)行Pir毒素基因的表達(dá)差異對比，在18℃、24℃、30℃和36℃條件下，Pir毒素基因相對表達(dá)量的值分別為0.4,0.6,1和1.4。2.4 p H變化對毒素Pir基因表達(dá)差異分析
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]2株副溶血弧菌不同鹽度下致病性和毒力基因差異分析[J]. 黃倞,王元,馬清揚(yáng),英娜,趙姝,吳越,房文紅. 海洋漁業(yè). 2019(06)
[2]上海地區(qū)蝦源弧菌分離鑒定及分子分型研究[J]. 安偉,張海強(qiáng),高曉華. 中國農(nóng)學(xué)通報(bào). 2018(36)
[3]凡納濱對蝦急性肝胰腺壞死病（AHPND）病原分離鑒定及其致病性分析[J]. 賈丹,史成銀,黃倢,張慶利,萬曉媛,許華,劉冉陽,王海波,郭程程,謝國駟. 漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展. 2018(03)
[4]凡納濱對蝦急性肝胰腺壞死綜合征研究進(jìn)展[J]. 蔣葛,沈輝,萬夕和,喬毅. 動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2018(04)
[5]副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）中溶源噬菌體與其宿主菌致病力的相關(guān)性[J]. 王娜,王海亮,白楠,黃倢,謝達(dá)祥,謝起浪,於俊琦,萬夕和. 漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展. 2016(02)
[6]實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)研究進(jìn)展及其應(yīng)用[J]. 王玉倩,薛秀花. 生物學(xué)通報(bào). 2016(02)
[7]副溶血性弧菌毒力基因表達(dá)時(shí)內(nèi)參基因的選擇[J]. 李沁,彭織云,陳鑫鵬,孫曉紅,潘迎捷,趙勇. 微生物學(xué)報(bào). 2013(03)
[8]一株凡納濱對蝦病原菌的分離、鑒定及其致病力分析[J]. 張寶存,劉飛,邊慧慧,劉杰,潘魯青,黃倢. 漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展. 2012(02)
[9]熒光定量PCR法檢測副溶血弧菌tlh和tdh基因的表達(dá)差異[J]. 陳星,潘迎捷,孫曉紅,趙勇. 微生物學(xué)通報(bào). 2011(07)
[10]浙江沿海地區(qū)海產(chǎn)品及環(huán)境中副溶血弧菌的分離與主要毒力基因分析[J]. 金培婕,吳蓓蓓,王淑娜,俞盈,錢永華,方維煥. 微生物學(xué)通報(bào). 2009(07)
博士論文
[1]副溶血弧菌tdh、trh和tlh基因的克隆、表達(dá)及基因敲除對其溶血活性的影響[D]. 趙永剛.中國海洋大學(xué) 2010
本文編號(hào)：3000605
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