發(fā)布時(shí)間：2021-01-22 13:48

　　智利小植綏螨是防治害螨最重要的天敵種類之一。過(guò)去對(duì)影響其生殖的因素進(jìn)行了許多研究,但是對(duì)相關(guān)的分子機(jī)制的研究十分有限。在本文中,我們選擇了智利小植綏_的可能與生殖相關(guān)的 4 個(gè)基因:ribosomal protein L11（RpL11）,ribosomalprotein S2（RpS2）,transformer-2（tra-2）和 Bric-a-brac2（Balb2）,利用RNAi 飼喂法對(duì)初羽化雌成螨中這四個(gè)基因進(jìn)行了干擾,并用Real-time PCR驗(yàn)證目的基因是否被成功抑制。結(jié)果顯示當(dāng)RpL11或RpS2受到干擾時(shí),分別有42%和30%的智利小植綏螨個(gè)體變得不育,而其余的可育雌螨的產(chǎn)卵期與對(duì)照相比分別縮短了 31.8%和49.9%,產(chǎn)卵量減少了 48.1%和67.8%,卵的孵化率降低了 20.4%和22.4%。此外,當(dāng)產(chǎn)卵量較低時(shí),這兩個(gè)處理的后代性別比例顯著偏向雄性;當(dāng)tra-2受到干擾時(shí),未觀察到產(chǎn)卵量方面的顯著差異,但卵的孵化率與對(duì)照相比降低了 30.6%;當(dāng)Bab2被成功干擾后,其生殖參數(shù)沒(méi)有發(fā)生顯著的變化,可能該基因在智利小植綏螨雌性的生殖中沒(méi)... 

【文章來(lái)源】：安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)安徽省

【文章頁(yè)數(shù)】：59 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１智利小植綏螨總ＲＮＡ電泳圖??Ｆｉｇ．ｌ?Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ?ｏｆ?Ｐｈｙｔｏｓｅｉｕｌｕｓ?ｐｅｒｓｉｍｉｌｉｓ??

（４８６ｂｐ）、（４６５ｂｐ）、ｒｒａ－２?（４２５ｂｐ）預(yù)估大小的目的基因片段（圖２）。??１〇。〇｜?：：二??７５０１?ｊ??２５０?＾＾＾ＭｒｐＬＩＩ?ＲｐＳ２?Ｂａｂ２ｔｒａ－２＼??圖２智利小植緩螨目的基因ＰＣＲ擴(kuò)增片段??Ｆｉｇ．２?ＰＣＲ?ｆｒａｇｍｅｎｔｓ?ｏｆ?ｔａｒｇｅｔ?ｇｅｎｅ?ｏｆ?尸Ａ少??４．１．３凝膠回收與產(chǎn)物純化??對(duì)得到的ＰＣＲ產(chǎn)物進(jìn)行膠回收及純化，用凝膠電泳檢測(cè)，獲得大小正確，條帶??單一明亮的目的基因片段（圖３）。??丨ｔｒａ．２?Ｂ〇ｂ２??Ｉ?ＲｐＬｌｌ?ＲｐＳ２?｜??圖３目的基因膠回收純化片段??Ｆｉｇ．３?Ｔａｒｇｅｔ?ｆｒａｇｍｅｎｔｓ?ｏｆ?Ｇｅｌ?Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ?ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ??１９??

（４８６ｂｐ）、（４６５ｂｐ）、ｒｒａ－２?（４２５ｂｐ）預(yù)估大小的目的基因片段（圖２）。??１〇。〇｜?：：二??７５０１?ｊ??２５０?＾＾＾ＭｒｐＬＩＩ?ＲｐＳ２?Ｂａｂ２ｔｒａ－２＼??圖２智利小植緩螨目的基因ＰＣＲ擴(kuò)增片段??Ｆｉｇ．２?ＰＣＲ?ｆｒａｇｍｅｎｔｓ?ｏｆ?ｔａｒｇｅｔ?ｇｅｎｅ?ｏｆ?尸Ａ少??４．１．３凝膠回收與產(chǎn)物純化??對(duì)得到的ＰＣＲ產(chǎn)物進(jìn)行膠回收及純化，用凝膠電泳檢測(cè)，獲得大小正確，條帶??單一明亮的目的基因片段（圖３）。??丨ｔｒａ．２?Ｂ〇ｂ２??Ｉ?ＲｐＬｌｌ?ＲｐＳ２?｜??圖３目的基因膠回收純化片段??Ｆｉｇ．３?Ｔａｒｇｅｔ?ｆｒａｇｍｅｎｔｓ?ｏｆ?Ｇｅｌ?Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ?ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ??１９??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]朱砂葉螨β-COP和Sro基因鑒定及其沉默致死效果[J]. 敖已倩云,申光茂,王夢(mèng)瑤,劉家路,潘宇,何林.  中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2017(18)
[2]伽馬輻照對(duì)智利小植綏螨生殖及性別決定的影響[J]. 張保賀,王恩東,呂佳樂(lè),徐學(xué)農(nóng).  中國(guó)生物防治學(xué)報(bào). 2016(06)
[3]The role of ribosomal proteins in the regulation of cell proliferation, tumorigenesis, and genomic integrity[J]. Xilong Xu,Xiufang Xiong,Yi Sun.  Science China（Life Sciences）. 2016(07)
[4]昆蟲(chóng)RNA干擾中雙鏈RNA的轉(zhuǎn)運(yùn)方式[J]. 劉吉升,朱文輝,廖文麗,卜曉玲,江婉儀.  昆蟲(chóng)學(xué)報(bào). 2016(06)
[5]捕食螨繁育與應(yīng)用[J]. 徐學(xué)農(nóng),呂佳樂(lè),王恩東.  中國(guó)生物防治學(xué)報(bào). 2015(05)
[6]國(guó)際捕食螨研發(fā)與應(yīng)用的熱點(diǎn)問(wèn)題及啟示[J]. 徐學(xué)農(nóng),呂佳樂(lè),王恩東.  中國(guó)生物防治學(xué)報(bào). 2013(02)

碩士論文
[1]利用伽馬輻照研究智利小植綏螨的生殖機(jī)理[D]. 張保賀.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2016
[2]柑橘全爪螨幾丁質(zhì)酶基因RNAi載體構(gòu)建及其在柑橘中的轉(zhuǎn)化研究[D]. 李俊麗.西南大學(xué) 2013
[3]擬長(zhǎng)毛鈍綏螨后代性比之影響因素研究[D]. 姜曉環(huán).中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2010



本文編號(hào)：2993338