馬鈴薯（Solanum tuberosum L.）是全球第四大糧食作物,僅次于小麥、稻谷和玉米。2015年,農(nóng)業(yè)部將馬鈴薯主糧化工作列入重要議程。馬鈴薯在我國(guó)的種植范圍很廣,環(huán)境脅迫是限制馬鈴薯產(chǎn)量和品質(zhì)進(jìn)一步提高的主要瓶頸之一。馬鈴薯在受到環(huán)境脅迫后,會(huì)有不同程度的減產(chǎn),嚴(yán)重的甚至減產(chǎn)70%左右。前期,我們從煙草中克隆得到一個(gè)編碼非特異性脂轉(zhuǎn)移蛋白的基因Nt LTP4,研究表明,超表達(dá)Nt LTP4基因能夠增強(qiáng)煙草對(duì)非生物脅迫和生物脅迫的耐受性。在此基礎(chǔ)上,本研究開(kāi)展了Nt LTP4基因轉(zhuǎn)化馬鈴薯的研究,培育獲得了抗鹽堿、干旱和青枯病的馬鈴薯新種質(zhì),為馬鈴薯品種改良奠定了基礎(chǔ)。主要的研究結(jié)果和結(jié)論如下:（1）ubi3啟動(dòng)子的克隆及表達(dá)活性分析利用PCR技術(shù),從馬鈴薯克隆了ubi3啟動(dòng)子,該啟動(dòng)子長(zhǎng)度為921bp。將ubi3啟動(dòng)子插入p X6載體中,獲得載體ubi3::p X6。進(jìn)而,在載體ubi3::p X6中ubi3啟動(dòng)子的下游插入GFP基因,構(gòu)建帶GFP標(biāo)簽植物表達(dá)載體ubi3::p X6-GFP。用載體ubi3::p X6-GFP侵染煙草,2d后在上部葉片觀察到熒光,說(shuō)明ubi... 

【文章來(lái)源】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】：67 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

重組植物表達(dá)載體的構(gòu)建策略A:ubi3啟動(dòng)子GFP表達(dá)載體的構(gòu)建；B:NtLTP4過(guò)表達(dá)載體的構(gòu)建Fig.2-1ConstructionstrategyofrecombinantplantexpressionvectorA:constructionoftheubi3promoterGFPexpressionvector.B:NtLTP4overexpressionoftheconstruct.

分析瞬時(shí)表達(dá)載體，轉(zhuǎn)化到農(nóng)，每天觀察葉片是否有熒圖 3-2），表明 ubi3 具有2 dpi圖 3-1 PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物的瓊脂糖凝膠電PCR 產(chǎn)物的分析；1-7：ubi3 基因的Fig. 3-1 Cloning of the ubi3 promotR analysis of the liquid culture. 1-7: P

圖 3-1 PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物的瓊脂糖凝膠電泳動(dòng)子的克��；B：菌液 PCR 產(chǎn)物的分析；1-7：ubi3 基因的 PCR 產(chǎn)物；N：陰性對(duì)照；MFig. 3-1 Cloning of the ubi3 promotertion of ubi3 gene. B: PCR analysis of the liquid culture. 1-7: PCR product of ubi3 gene. N: neg

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Mapping QTL underlying tuber starch content and plant maturity in tetraploid potato[J]. Jianwu Li,Yihang Wang,Guohong Wen,Gaofeng Li,Zhang Li,Rong Zhang,Sheng Ma,Jun Zhou,Conghua Xie.  The Crop Journal. 2019(02)
[2]馬鈴薯抗旱節(jié)水豐產(chǎn)高效技術(shù)研究與示范[J]. 劉羽,劉富強(qiáng),云庭,侯佳秀,張智芳,李樹(shù)生,昊翔,石曉華,孫宇燕,梁東超,雷利君,馬麗榮.  北方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2019(01)
[3]馬鈴薯晚疫病的危害及防治措施[J]. 黃強(qiáng),鄭敏,王釧,舒婷,歐陽(yáng)滿.  江西農(nóng)業(yè). 2019(02)
[4]馬鈴薯雜交育種的障礙及解決途徑[J]. 李峰,王志剛,王占海,金穎璐,楊茜,安倩倩.  農(nóng)業(yè)開(kāi)發(fā)與裝備. 2019(01)
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[6]馬鈴薯抗旱品種篩選及鑒定試驗(yàn)[J]. 杜培兵,楊文靜.  中國(guó)蔬菜. 2018(09)
[7]馬鈴薯對(duì)土壤水分脅迫響應(yīng)的研究進(jìn)展[J]. 趙鴻,任麗雯,趙福年,齊月,蔡迪花,王春玲,陳斐,雷俊,王潤(rùn)元,王鶴齡,張凱,姚玉璧,王興.  干旱氣象. 2018(04)
[8]分根區(qū)交替灌溉對(duì)馬鈴薯葉片超微結(jié)構(gòu)及生理性狀的影響[J]. 宿飛飛,孫慕華,李勇,劉尚武,劉振宇,王紹鵬,萬(wàn)書明,陳曦,高云飛,張靜華,秦斐斐,胡林雙,呂典秋.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2018(19)
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[10]模擬干旱脅迫下馬鈴薯StNCED1表達(dá)量及與ABA含量的相關(guān)性分析[J]. 鞏檑,宋繼玲,甘曉燕,劉璇,陳虞超,郭志乾,宋玉霞.  植物遺傳資源學(xué)報(bào). 2018(03)

博士論文
[1]非特異性脂轉(zhuǎn)移蛋白NtLTP4作為正調(diào)控因子參與煙草對(duì)非生物和生物脅迫的響應(yīng)[D]. 徐揚(yáng).山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[2]馬鈴薯油菜素內(nèi)酯合成限速酶基因StCPD和StDWF4對(duì)干旱和鹽脅迫的響應(yīng)[D]. 周香艷.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[3]原生質(zhì)體融合創(chuàng)造抗青枯病的馬鈴薯新種質(zhì)及其遺傳分析[D]. 蔡興奎.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2004

碩士論文
[1]馬鈴薯StCPI基因的分子克隆、表達(dá)純化及抗逆功能表征[D]. 李亞倫.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[2]轉(zhuǎn)SPDS基因馬鈴薯植株耐寒性的研究[D]. 楊金輝.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[3]煙草NtLTP4基因的克隆及功能分析[D]. 鄭新新.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[4]滲透脅迫下馬鈴薯試管苗結(jié)構(gòu)與生理響應(yīng)以及StSnRK2基因表達(dá)的研究[D]. 高慧娟.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[5]AtCBF3提高轉(zhuǎn)基因馬鈴薯耐熱性的研究[D]. 竇海鷗.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[6]農(nóng)桿菌介導(dǎo)hrap基因的馬鈴薯遺傳轉(zhuǎn)化及抗病性鑒定[D]. 蔣敏華.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007



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