ALOG（ArabidopsisLSH1andOryza G1）基因家族成員廣泛存在于陸生植物中,并在其生長發(fā)育的過程中起到關(guān)鍵的作用。在水稻中ALOG基因家族共有10個成員（Gi,G1I1～G1L9）。其中三個成員（G1,G1L5和G1L6）的功能已被研究,它們都參與了水稻花發(fā)育的過程,而其它7個成員的功能尚屬未知。本項目主要關(guān)注水稻功能未知的7個ALOG基因和已經(jīng)報道過的G1L6基因,通過CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù),構(gòu)建它們的基因敲除株系,并進一步地構(gòu)建基因過表達株系,以此來研究它們的基因功能。觀察發(fā)現(xiàn),所有的基因家族成員過表達株系都沒有明顯的發(fā)育缺陷表型,而大多數(shù)的家族成員的基因敲除株系也沒有明顯的發(fā)育缺陷表型（G1L1和G1L2的基因敲除株系除外）。考慮到這些基因家族成員之間序列有相似性,這種家族內(nèi)單基因突變未出現(xiàn)缺陷表型的原因可能跟他們之間功能冗余性有關(guān)。G1L6轉(zhuǎn)基因敲除植株表型跟之前報道過的內(nèi)外稃變窄,呈現(xiàn)“鳥嘴”狀的表型很相似,但是其純合植株表現(xiàn)出明顯的不育性狀。G1L1和G1L2的轉(zhuǎn)基因敲除株系表現(xiàn)出穗發(fā)育缺陷的表型,具體表現(xiàn)為主穗軸變長,而且上面的小穗變少。... 

【文章來源】：廣西大學廣西壯族自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

通過~lappingPCR方法構(gòu)建sgRNA表達盒方法示意圖

圖２－２轉(zhuǎn)錄組測序?qū)嶒灹鞒虉D??Ｆｉｇ．?２－２?Ｔｈｅ?ｆｌｏｗ?ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?ＲＮＡ－ｓｅｑ??樣品的質(zhì)量好壞是整個實驗是否成下方法對樣品進行檢測，檢測結(jié)果Ａ的純度（ＯＤ２６０／２８０）、濃度、核酸檢測１＾六的完整性，檢測指標包括：檢測合格后，便可以進行文庫的構(gòu)建品的二級結(jié)構(gòu)，用帶有Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）的２６??

．??上機測序??圖２－２轉(zhuǎn)錄組測序?qū)嶒灹鞒虉D??Ｆｉｇ．?２－２?Ｔｈｅ?ｆｌｏｗ?ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?ＲＮＡ－ｓｅｑ??２．３．２?ＲＮ?Ａ樣品檢測??高通量測序的ＲＮＡ樣品的質(zhì)量好壞是整個實驗是否成功的基礎(chǔ)，為保證得到高質(zhì)??量的數(shù)據(jù)，本實驗采用以下方法對樣品進行檢測，檢測結(jié)果達到要求后方可進行建庫：??１）


本文編號：2990266