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miR-556-3p通過靶基因SASH1調(diào)控子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的活力、遷移和侵襲

發(fā)布時(shí)間:2021-01-17 21:18
  目的:研究微小RNA-556-3p(miR-556-3p)是否通過靶向SASH1基因調(diào)控子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的活力、遷移和侵襲。方法:采用RT-qPCR和Western blot檢測(cè)miR-556-3p和SASH1的mRNA和蛋白在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)。向子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細(xì)胞轉(zhuǎn)染anti-miR-556-3p或pcDNA-SASH1,采用MTT法檢測(cè)細(xì)胞活力,Transwell小室法檢測(cè)細(xì)胞遷移和侵襲能力,Western blot檢測(cè)細(xì)胞周期蛋白D1(cyclin D1)、p21、基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9蛋白的表達(dá)。StarBase預(yù)測(cè)和雙螢光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)分析miR-556-3p和SASH1的靶向關(guān)系。將anti-miR-556-3p和si-SASH1共轉(zhuǎn)染Ishikawa細(xì)胞,采用上述方法檢測(cè)其對(duì)細(xì)胞活力、遷移和侵襲能力的影響。結(jié)果:與癌旁組織比較,子宮內(nèi)膜癌組織中miR-556-3p的表達(dá)量顯著增加,SASH1的mRNA和蛋白表達(dá)量顯著減少(P<0.05)。抑制miR-556-3p表達(dá)或使SASH1過表達(dá)顯著降低Ishikawa細(xì)胞活力、遷移細(xì)胞數(shù)、侵... 

【文章來源】:中國(guó)病理生理雜志. 2020,36(12)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】:8 頁(yè)

【文章目錄】:
材料和方法
    1 臨床組織標(biāo)本
    2 細(xì)胞與主要試劑
    3 方法
        3.1 細(xì)胞培養(yǎng)、分組與轉(zhuǎn)染
        3.2 RT-q PCR檢測(cè)子宮內(nèi)膜癌組織、癌旁組織和
        3.3 MTT法檢測(cè)Ishikawa細(xì)胞的活力
        3.4 Transwell小室法檢測(cè)Ishikawa細(xì)胞的遷移和侵襲能力
        3.5 Western blot檢測(cè)SASH1、cyclin D1、p21、MMP-2和MMP-9的蛋白表達(dá)
        3.6 Star Base預(yù)測(cè)和雙螢光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)分析mi R-556-3p和SASH1的靶向關(guān)系
    4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié)果
    1 mi R-556-3p和SASH1在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)
    2抑制mi R-556-3p表達(dá)對(duì)子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細(xì)胞活力、遷移和侵襲的影響
    3 SASH1過表達(dá)對(duì)子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細(xì)胞活力、遷移和侵襲的影響
    4 mi R-556-3p靶向調(diào)控SASH1的表達(dá)
    5 敲減SASH1表達(dá)逆轉(zhuǎn)了抑制mi R-556-3p表達(dá)對(duì)子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細(xì)胞活力、遷移和侵襲的作用
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本文編號(hào):2983610

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