三種病毒性出血熱熒光與可視化基因芯片檢測(cè)方法的建立
發(fā)布時(shí)間:2021-01-16 12:00
病毒性出血熱(Viral hemorrhagic fevers, VHFs)常由4種科的心A病毒引起,均以發(fā)熱和出血為主要癥狀。目前,大多數(shù)病毒性出血熱無(wú)有效疫苗及治療藥物?死锩讈-剛果出血熱(Crimean-Congo hemorrhagic fever, CCHF)是一種由克里米亞-剛果出血熱病毒(Crimean-Congo hemorrhagic fever virus, CCHFV)引起經(jīng)蜱傳播的病毒性疾病,在非洲,亞洲,歐洲南部,中東的30多個(gè)國(guó)家都有感染病例的報(bào)道。裂谷熱(Rift Valley fever, RVF)是由裂谷熱病毒(Rift Valley fever virus, RVF V)引起一種人畜共患病。該病在非洲、中東及也門地區(qū)流行,危害人身安全和畜牧業(yè)發(fā)展。拉沙熱(Lassa fever,LF)是一種由拉沙病毒(Lassa fever virus, LAV)引起的病毒性出血熱,在西非呈地方性流行。由于該病傳染性強(qiáng),在其他歐美國(guó)家也有輸入性病例報(bào)道。目前,病毒分離、血清學(xué)試驗(yàn)、分子生物學(xué)檢測(cè)是VHFs的主要實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法。病毒分離,費(fèi)時(shí)、費(fèi)力,不適宜在疫區(qū)外開...
【文章來(lái)源】:廣西大學(xué)廣西壯族自治區(qū) 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:68 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
英文縮寫詞表
第一章 前言
1.1 病毒性出血熱的概況
1.2 克里米亞-剛果出血的概況
1.2.1 CCHFV的基因組結(jié)構(gòu)及功能
1.2.2 CCHFV的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)
1.3 裂谷熱的概況
1.3.1 RVFV的基因組結(jié)構(gòu)及功能
1.3.2 RVFV的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)
1.4 拉沙熱的概況
1.4.1 LAV的基因組結(jié)構(gòu)及功能
1.4.2 LAV的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)
1.5 基因芯片技術(shù)的概況
1.6 基因芯片技術(shù)的應(yīng)用
1.7 納米金顆粒的概述
1.8 納米金顆粒在基因芯片技術(shù)中的應(yīng)用
1.9 研究的目的與意義
第二章 材料與方法
2.1 材料
2.1.1 質(zhì)粒與病毒
2.1.2 主要試劑
2.1.3 耗材與設(shè)備
2.2 方法
2.2.1 實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線
2.2.2 三種病毒基因序列的比對(duì)及人工合成
2.2.3 探針與引物的設(shè)計(jì)
2.2.4 主要溶液的配制
2.2.5 檢測(cè)樣本的提取
2.2.6 建立多重PCR體系
2.2.7 熒光基因芯片的制備
2.2.8 雜交條件的優(yōu)化
2.2.9 可視化基因芯片的制備
2.2.10 特異性試驗(yàn)
2.2.11 敏感性試驗(yàn)
2.2.12 重復(fù)性試驗(yàn)
第三章 結(jié)果與分析
3.1 CCHFV、RVFV、LAV的目的基因合成結(jié)果
3.2 引物設(shè)計(jì)結(jié)果
3.3 探針設(shè)計(jì)結(jié)果
3.4 探針特異性評(píng)價(jià)
3.5 病毒cDNA的PCR鑒定
3.6 雜交條件的優(yōu)化結(jié)果
3.6.1 雜交時(shí)間的優(yōu)化結(jié)果
3.6.2 雜交溫度的優(yōu)化結(jié)果
3.7 熒光基因芯片雜交結(jié)果
3.8 可視化基因芯片雜交結(jié)果
3.9 兩種基因芯片檢測(cè)方法特異性驗(yàn)證結(jié)果
3.10 兩種基因芯片檢測(cè)方法靈敏性檢測(cè)結(jié)果
3.11 兩種基因芯片檢測(cè)方法重復(fù)性驗(yàn)證結(jié)果
第四章 討論
4.1 兩種基因芯片的比較分析
4.2 探針的設(shè)計(jì)影響檢測(cè)的特異性和雜交效率
4.3 微陣列的制備
4.4 雜交試驗(yàn)的優(yōu)化
4.5 標(biāo)記系統(tǒng)影響雜交效率
4.6 檢測(cè)結(jié)果的靈敏性分析
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
研究生期間發(fā)表論文情況
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]病毒性出血熱實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)[J]. 龐正,李德新. 病毒學(xué)報(bào). 2013(03)
本文編號(hào):2980791
【文章來(lái)源】:廣西大學(xué)廣西壯族自治區(qū) 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:68 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
英文縮寫詞表
第一章 前言
1.1 病毒性出血熱的概況
1.2 克里米亞-剛果出血的概況
1.2.1 CCHFV的基因組結(jié)構(gòu)及功能
1.2.2 CCHFV的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)
1.3 裂谷熱的概況
1.3.1 RVFV的基因組結(jié)構(gòu)及功能
1.3.2 RVFV的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)
1.4 拉沙熱的概況
1.4.1 LAV的基因組結(jié)構(gòu)及功能
1.4.2 LAV的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)
1.5 基因芯片技術(shù)的概況
1.6 基因芯片技術(shù)的應(yīng)用
1.7 納米金顆粒的概述
1.8 納米金顆粒在基因芯片技術(shù)中的應(yīng)用
1.9 研究的目的與意義
第二章 材料與方法
2.1 材料
2.1.1 質(zhì)粒與病毒
2.1.2 主要試劑
2.1.3 耗材與設(shè)備
2.2 方法
2.2.1 實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線
2.2.2 三種病毒基因序列的比對(duì)及人工合成
2.2.3 探針與引物的設(shè)計(jì)
2.2.4 主要溶液的配制
2.2.5 檢測(cè)樣本的提取
2.2.6 建立多重PCR體系
2.2.7 熒光基因芯片的制備
2.2.8 雜交條件的優(yōu)化
2.2.9 可視化基因芯片的制備
2.2.10 特異性試驗(yàn)
2.2.11 敏感性試驗(yàn)
2.2.12 重復(fù)性試驗(yàn)
第三章 結(jié)果與分析
3.1 CCHFV、RVFV、LAV的目的基因合成結(jié)果
3.2 引物設(shè)計(jì)結(jié)果
3.3 探針設(shè)計(jì)結(jié)果
3.4 探針特異性評(píng)價(jià)
3.5 病毒cDNA的PCR鑒定
3.6 雜交條件的優(yōu)化結(jié)果
3.6.1 雜交時(shí)間的優(yōu)化結(jié)果
3.6.2 雜交溫度的優(yōu)化結(jié)果
3.7 熒光基因芯片雜交結(jié)果
3.8 可視化基因芯片雜交結(jié)果
3.9 兩種基因芯片檢測(cè)方法特異性驗(yàn)證結(jié)果
3.10 兩種基因芯片檢測(cè)方法靈敏性檢測(cè)結(jié)果
3.11 兩種基因芯片檢測(cè)方法重復(fù)性驗(yàn)證結(jié)果
第四章 討論
4.1 兩種基因芯片的比較分析
4.2 探針的設(shè)計(jì)影響檢測(cè)的特異性和雜交效率
4.3 微陣列的制備
4.4 雜交試驗(yàn)的優(yōu)化
4.5 標(biāo)記系統(tǒng)影響雜交效率
4.6 檢測(cè)結(jié)果的靈敏性分析
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
研究生期間發(fā)表論文情況
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]病毒性出血熱實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)[J]. 龐正,李德新. 病毒學(xué)報(bào). 2013(03)
本文編號(hào):2980791
本文鏈接:http://sikaile.net/kejilunwen/jiyingongcheng/2980791.html
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