植物生長經常受到不利環(huán)境條件的挑戰(zhàn),包括極端溫度、干旱和高鹽度。近年來,研究認為硫化氫（H2S）能夠提高植物對逆境脅迫的耐受性。目前關于H2S生理作用的研究多是通過外源施加H2S的供體、H2S清除劑或H2S合成抑制劑后,研究植物的生理生化變化,并測定相應的生理指標,關于內源性H2S生理功能的研究過少。植物內源性H2S產生的主要途徑是以半胱氨酸（Cys）為底物,經半胱氨酸脫巰基（CDes）酶催化降解生成。以Cys為底物合成H2S的關鍵酶L/D-CDes的編碼基因LCD和DCD已經在擬南芥中克隆得到,但是小麥中這兩個基因的序列還沒有人報導,因此,實驗室前期首次從小麥中克隆得到L/D-CD基因,轉入擬南芥中過表達,得到轉基因株系,為研究這兩個基因的功能打下了基礎。本實驗以野生型擬南芥（WT）和TaLCD、TaDCD過表達株系為實驗材料,探討TaLCD、TaDCD基因對ABA、干旱及鹽脅迫的調節(jié)作用。主要實驗結果如下:本實驗通過對TaDCD過表達擬南芥的種子萌發(fā)、根系生長、氣孔關閉和抗旱性進行研究,確定了 TaD-CDes的生理效應。結果表明,與野生型株系（WT）相比,TaDCD過表達植株的種... 

【文章來源】：河南農業(yè)大學河南省

【文章頁數】：53 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２植物體內ＩｈＳ合成的主要途徑＾??Ｆｉｇ．２?Ｔｈｅ?ｍａｉｎ?ｐａｔｈｗａｙ?ｆｏｒ?ｆｈＳ?ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ?ｉｎ?ｐｌａｎｔｓ??

３．４?結果與分析??３．４．１?ｒｆｌＤＣ￡）過表達植株鑒定??本實驗對７Ｖ／ＤＣＤ過表達株系進行了轉錄水平和酶活水平鑒定，結果表明轉基因擬南??芥中Ｄ型半胱氨酸脫巰基酶的轉錄水平和酶活性均高于野生型。其中Ｌｍｅ?１中Ｄ－ＣＤｅｓ酶??活性是野生型的３．４９倍，Ｌｉｎｅ?２的酶活性是ＷＴ的２．６倍（圖３）。??ａ?，：．，〇〇〇，?８?４０］?．??１?－ＪＳ＿?ａｍ??�。海�?１?，?Ｉ?＿?圍??ＷＴ?Ｌｉｎｅ！?Ｌｉｎｃ２?Ｌｉｎｅ?Ｉ?Ｌｉｎｒ２??圖３野生型（ＷＴ）和轉基因株系中ＴａＤ－ＣＤｅｓ的轉錄表達（Ａ）和酶活性（Ｂ）??ＷＴ和７Ｖ／ＺＸＶ）過表達的兩個株系（用Ｌｉｎｅｌ＆Ｌｉｎｅ２表示）種植在１／２ＭＳ培養(yǎng)基上，生長丨０天后取樣收集??幼苗，進行ｑＲＴ－ＰＣＲ和酶活性檢測，值是三次重復的平均值：ｔＳＤ，在每個重復中使用每種基因型至少２０??株幼苗。星號＊表明轉基因株系與野生型（ＷＴ）之間存在顯著差異（Ｐ＜０．０５）??Ｆｉｇ．３?Ｔｈｅ?ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?（ａ）?ａｎｄ?ｅｎｚｙｍｅ?ａｃｔｉｖｉｔｙ?（ｂ）?ｏｆ?ＴａＤ－ＣＤｃｓ??ｉｎ?ｗｉｌｄ－ｔｙｐｅ?（ＷＴ）?ａｎｄ?ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ?ｐｌａｎｔｓ．??ＷＴ?ａｎｄ?Ｉａｖｏ?ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｓｔｒａｉｎ?ｏｆ?ＴａＤＣＤ?（ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｅｄ?ｂｙ?Ｌｉｎｅｌ?＆?Ｌｉｎｅ?２）?ｗｅｒｅ?ｐｌａｎｔｅｄ?ｏｎ?１／２?ＭＳ?ｍｅｄｉｕｍ．??Ａｆｔｅｒ?１０?ｄａｙｓ?ｏｆ?ｇｒｏｗｔｈ，?ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ?ｗｅｒｅ?ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ?ａｎｄ?ｔｅｓｔｅｄ?ｆｏｒ

１５０ｉ?ＣＤ?ＷＴ??＾?ｍｍ?Ｕｎｅ１??ｌｌ〇ａ?＊■Ｌｉｎｅ２??ｉ?ｍ?ｒ．??Ｉ＂?Ｉ?ｆＴｌ?ｒｋ？??Ｌ?Ｊ?—．１—：麗??Ｃｏｎｔｒｏｌ?０?２５?０．５?ｐＭ?ＡＢＡ??圖４不同濃度ＡＢＡ處理下擬南芥的發(fā)芽率??Ｆｉｇ．４?Ａ．ｔｌｉａｌｉａｎａ?ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ?ｒａｔｅ?ｕｎｄｅｒ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ＡＢＡ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ??Ｃｏｎｔｒｏｌ?０．２５?ｐＭ?ＡＢＡ??１??十＿十＿??（＝３?ＷＴ??１Ｓ０－１?．?．?？??ｓｉ?Ｌｉｎｅｉ??＃?ｓ？ｓＢ?Ｌｉｎｅ２??Ｉ１，?ｍ??ｔ?ｆｉ?．??Ｃ?ＳＯ－?ｉｄ?ｆ??＾?０?，ｉ?■??Ｃｏｎｔｒｏｌ?０．２５?０．５?ｐＭ?ＡＢＡ??圖５不同濃度ＡＢＡ處理下擬南芥子葉綠化率??Ｆｉｇ．５?Ａ．ｔｈａｌｉａｎａ?ｃｏｔｙｌｅｄｏｎ?ｇｒｅｅｎｉｎｇ?ｒａｔｅ?ｕｎｄｅｒ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ?ｏｆ?ＡＢＡ??１９??


本文編號：2975767