黃瓜單性結(jié)實QTL精細定位及候選基因表達驗證
發(fā)布時間:2021-01-10 01:41
黃瓜是世界范圍內(nèi)廣泛栽培的重要蔬菜作物之一。具有強單性結(jié)實性的黃瓜品種在不利于授粉受精的生長環(huán)境中也可以獲得穩(wěn)定的結(jié)實率,保證產(chǎn)量,而且單性結(jié)實的黃瓜果實無籽,口感較好。因此,探明黃瓜單性結(jié)實的分子遺傳機制是創(chuàng)新黃瓜單性結(jié)實種質(zhì)、培育強單性結(jié)實性黃瓜新品種的必要基礎(chǔ)。本研究以單性結(jié)實性具有明顯差異的兩個黃瓜品系(‘ZK’:弱單性結(jié)實品系;‘BY’:強單性結(jié)實品系)的F2群體為作圖群體,利用90個在親本間有多態(tài)性的SSR標記構(gòu)建了一張黃瓜遺傳連鎖圖譜,利用此圖譜對黃瓜單性結(jié)實主效QTL進行了初步定位;對以弱單性結(jié)實的親本為輪回親本的回交后代BC1、BC2和BC3群體進行了重組株的篩選;對雙親進行了重測序并基于重測序結(jié)果在初步定位得到的主效QTL區(qū)間內(nèi)發(fā)掘SNP和InDel位點,開發(fā)出相應(yīng)標記后以BC3重組株為作圖群體構(gòu)建物理遺傳圖譜,完成黃瓜單性結(jié)實QTL的精細定位。對精細定位主效QTL區(qū)間內(nèi)的候選基因在3種激素處理和不同黃瓜品系的果實中進行qRT-PCR表達驗證。主要研究結(jié)果如下:1.利用SSR標記構(gòu)建的遺傳連鎖圖包含7個連鎖群,圖譜總長為652 cM。經(jīng)過初步定位獲得3個與黃瓜單性結(jié)...
【文章來源】:揚州大學(xué)江蘇省
【文章頁數(shù)】:53 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖2-1父本的正常授粉結(jié)實的果實(左)和不授粉條件下座果失敗的果實(右)??Fig.?2-1?Pollinated?fruit?(left)?and?failing?fruit-set?which?without?pollination?(right)?of?the?male?parent??
2.1材料與方法??2.1.1實驗材料??父本:‘ZK’,弱單性結(jié)實性自交系,華北型黃瓜品系(圖2-1?),其單性結(jié)實率為9.8%;??母本:‘BY’,強單性結(jié)實性自交系,歐洲水果型黃瓜品系(圖2-2),其單性結(jié)實率為90.2%。??這兩個親本不僅在單性結(jié)實能力上差異非常大,在果實外形上也明顯不同:‘ZK’果實果??長較長,有刺瘤;‘BY’果實較短小,表皮光滑。2016年3月15在穴盤中播下‘ZK’和??‘BY’各20粒,4月20日定植于揚州大學(xué)園藝與植物保護學(xué)院蔬菜試驗田中,雜交得到??F,群體。2016年8月10日在穴盤中播下20粒?,單株,9月15日定植于揚州大學(xué)園藝與??植物保護學(xué)院蔬菜試驗田中,做自交構(gòu)建F2分離群體。??iira??圖2-1父本的正常授粉結(jié)實的果實(左)和不授粉條件下座果失敗的果實(右)??Fig.?2-1?Pollinated?fruit?(left)?and?failing?fruit-set?which?without?pollination?(right)?of?the?male?parent??‘ZK,??
2.2.2親本間SSR引物的篩選及多態(tài)性引物在F2群體中的驗證??本研宄選用了?510對SSR引物在親本間篩選多態(tài)性引物,總共有452對引物可以拔增??出穩(wěn)定的條帶,其中有90對SSR引物在雙親中表現(xiàn)出特異性,多態(tài)率為19.9%?(圖24)。??然后再利用親本間具有多態(tài)性的SSR引物在88株「2群體中進行多態(tài)性驗證(圖2-5),它??們都可在F2群體中擴增出穩(wěn)定的條帶。??;篇籣”:暴-i?j?I?^?。??■??Marker??圖24親本間多態(tài)性SSR引物篩選的電泳圖(最左邊為Marker,其余為親本)??Fig.?2-4?Screening?of?polymorphic?SSR?primers?among?parents?(The?left?one?is?Marker,?parents?is?on?the?right)??
【參考文獻】:
期刊論文
[1]辣椒抗黃瓜花葉病毒病研究進展[J]. 郭廣君,刁衛(wèi)平,劉金兵,潘寶貴,戈偉,王述彬. 華北農(nóng)學(xué)報. 2014(S1)
[2]黃瓜子房內(nèi)源多胺含量的變化及其與單性結(jié)實的關(guān)系[J]. 杜慶平,于杰,徐強,陳學(xué)好. 江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2012(02)
[3]雌雄同株黃瓜單性結(jié)實性遺傳分析[J]. 閆立英,婁麗娜,李曉麗,婁群峰,馮志紅,陳勁楓. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(06)
[4]雌雄同株黃瓜單性結(jié)實性主基因+多基因混合遺傳分析[J]. 閆立英,婁麗娜,馮志紅,李曉麗,婁群峰,陳勁楓. 西北植物學(xué)報. 2009(06)
[5]大豆MYB轉(zhuǎn)錄因子基因GmMYBJ6和GmMYBJ7的克隆及表達分析[J]. 杜海,楊文杰,劉蕾,唐曉鳳,吳燕民,黃玉碧,唐益雄. 作物學(xué)報. 2008(07)
[6]黃瓜單性結(jié)實的遺傳分析[J]. 王莉莉,司龍亭,鄒芳斌. 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué). 2008(04)
[7]一個與黃瓜單性結(jié)實基因連鎖的ISSR標記[J]. 陳學(xué)好,王佳,徐強,嵇怡,梁國華. 分子植物育種. 2008(01)
[8]InDel和SNP標記在水稻圖位克隆中的應(yīng)用[J]. 潘存紅,王子斌,馬玉銀,殷躍軍,張亞芳,左示敏,陳宗祥,潘學(xué)彪. 中國水稻科學(xué). 2007(05)
[9]作物QTL定位方法研究進展[J]. 章元明. 科學(xué)通報. 2006(19)
[10]水稻InDel和SSR標記多態(tài)性的比較分析[J]. 馮芳君,羅利軍,李熒,周立國,徐小艷,吳金紅,陳宏偉,陳亮,梅捍衛(wèi). 分子植物育種. 2005(05)
碩士論文
[1]黃瓜果長和果把長的遺傳分析及定位研究[D]. 劉倩雅.揚州大學(xué) 2018
[2]柱花草遺傳圖譜構(gòu)建和重要性狀的QTL定位[D]. 丁澤婷.海南大學(xué) 2017
[3]黃瓜早花基因的QTL定位[D]. 路洪鳳.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2014
[4]茄子[Solanum melongena Linn.]單性結(jié)實生殖發(fā)育特性及內(nèi)源激素調(diào)控研究[D]. 陳靜.西南大學(xué) 2013
[5]黃瓜單性結(jié)實相關(guān)基因的分離、表達及SSR標記分析[D]. 王壘.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
本文編號:2967810
【文章來源】:揚州大學(xué)江蘇省
【文章頁數(shù)】:53 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖2-1父本的正常授粉結(jié)實的果實(左)和不授粉條件下座果失敗的果實(右)??Fig.?2-1?Pollinated?fruit?(left)?and?failing?fruit-set?which?without?pollination?(right)?of?the?male?parent??
2.1材料與方法??2.1.1實驗材料??父本:‘ZK’,弱單性結(jié)實性自交系,華北型黃瓜品系(圖2-1?),其單性結(jié)實率為9.8%;??母本:‘BY’,強單性結(jié)實性自交系,歐洲水果型黃瓜品系(圖2-2),其單性結(jié)實率為90.2%。??這兩個親本不僅在單性結(jié)實能力上差異非常大,在果實外形上也明顯不同:‘ZK’果實果??長較長,有刺瘤;‘BY’果實較短小,表皮光滑。2016年3月15在穴盤中播下‘ZK’和??‘BY’各20粒,4月20日定植于揚州大學(xué)園藝與植物保護學(xué)院蔬菜試驗田中,雜交得到??F,群體。2016年8月10日在穴盤中播下20粒?,單株,9月15日定植于揚州大學(xué)園藝與??植物保護學(xué)院蔬菜試驗田中,做自交構(gòu)建F2分離群體。??iira??圖2-1父本的正常授粉結(jié)實的果實(左)和不授粉條件下座果失敗的果實(右)??Fig.?2-1?Pollinated?fruit?(left)?and?failing?fruit-set?which?without?pollination?(right)?of?the?male?parent??‘ZK,??
2.2.2親本間SSR引物的篩選及多態(tài)性引物在F2群體中的驗證??本研宄選用了?510對SSR引物在親本間篩選多態(tài)性引物,總共有452對引物可以拔增??出穩(wěn)定的條帶,其中有90對SSR引物在雙親中表現(xiàn)出特異性,多態(tài)率為19.9%?(圖24)。??然后再利用親本間具有多態(tài)性的SSR引物在88株「2群體中進行多態(tài)性驗證(圖2-5),它??們都可在F2群體中擴增出穩(wěn)定的條帶。??;篇籣”:暴-i?j?I?^?。??■??Marker??圖24親本間多態(tài)性SSR引物篩選的電泳圖(最左邊為Marker,其余為親本)??Fig.?2-4?Screening?of?polymorphic?SSR?primers?among?parents?(The?left?one?is?Marker,?parents?is?on?the?right)??
【參考文獻】:
期刊論文
[1]辣椒抗黃瓜花葉病毒病研究進展[J]. 郭廣君,刁衛(wèi)平,劉金兵,潘寶貴,戈偉,王述彬. 華北農(nóng)學(xué)報. 2014(S1)
[2]黃瓜子房內(nèi)源多胺含量的變化及其與單性結(jié)實的關(guān)系[J]. 杜慶平,于杰,徐強,陳學(xué)好. 江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2012(02)
[3]雌雄同株黃瓜單性結(jié)實性遺傳分析[J]. 閆立英,婁麗娜,李曉麗,婁群峰,馮志紅,陳勁楓. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(06)
[4]雌雄同株黃瓜單性結(jié)實性主基因+多基因混合遺傳分析[J]. 閆立英,婁麗娜,馮志紅,李曉麗,婁群峰,陳勁楓. 西北植物學(xué)報. 2009(06)
[5]大豆MYB轉(zhuǎn)錄因子基因GmMYBJ6和GmMYBJ7的克隆及表達分析[J]. 杜海,楊文杰,劉蕾,唐曉鳳,吳燕民,黃玉碧,唐益雄. 作物學(xué)報. 2008(07)
[6]黃瓜單性結(jié)實的遺傳分析[J]. 王莉莉,司龍亭,鄒芳斌. 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué). 2008(04)
[7]一個與黃瓜單性結(jié)實基因連鎖的ISSR標記[J]. 陳學(xué)好,王佳,徐強,嵇怡,梁國華. 分子植物育種. 2008(01)
[8]InDel和SNP標記在水稻圖位克隆中的應(yīng)用[J]. 潘存紅,王子斌,馬玉銀,殷躍軍,張亞芳,左示敏,陳宗祥,潘學(xué)彪. 中國水稻科學(xué). 2007(05)
[9]作物QTL定位方法研究進展[J]. 章元明. 科學(xué)通報. 2006(19)
[10]水稻InDel和SSR標記多態(tài)性的比較分析[J]. 馮芳君,羅利軍,李熒,周立國,徐小艷,吳金紅,陳宏偉,陳亮,梅捍衛(wèi). 分子植物育種. 2005(05)
碩士論文
[1]黃瓜果長和果把長的遺傳分析及定位研究[D]. 劉倩雅.揚州大學(xué) 2018
[2]柱花草遺傳圖譜構(gòu)建和重要性狀的QTL定位[D]. 丁澤婷.海南大學(xué) 2017
[3]黃瓜早花基因的QTL定位[D]. 路洪鳳.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2014
[4]茄子[Solanum melongena Linn.]單性結(jié)實生殖發(fā)育特性及內(nèi)源激素調(diào)控研究[D]. 陳靜.西南大學(xué) 2013
[5]黃瓜單性結(jié)實相關(guān)基因的分離、表達及SSR標記分析[D]. 王壘.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
本文編號:2967810
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