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黃瓜單性結(jié)實(shí)QTL精細(xì)定位及候選基因表達(dá)驗(yàn)證

發(fā)布時(shí)間:2021-01-10 01:41
  黃瓜是世界范圍內(nèi)廣泛栽培的重要蔬菜作物之一。具有強(qiáng)單性結(jié)實(shí)性的黃瓜品種在不利于授粉受精的生長(zhǎng)環(huán)境中也可以獲得穩(wěn)定的結(jié)實(shí)率,保證產(chǎn)量,而且單性結(jié)實(shí)的黃瓜果實(shí)無籽,口感較好。因此,探明黃瓜單性結(jié)實(shí)的分子遺傳機(jī)制是創(chuàng)新黃瓜單性結(jié)實(shí)種質(zhì)、培育強(qiáng)單性結(jié)實(shí)性黃瓜新品種的必要基礎(chǔ)。本研究以單性結(jié)實(shí)性具有明顯差異的兩個(gè)黃瓜品系(‘ZK’:弱單性結(jié)實(shí)品系;‘BY’:強(qiáng)單性結(jié)實(shí)品系)的F2群體為作圖群體,利用90個(gè)在親本間有多態(tài)性的SSR標(biāo)記構(gòu)建了一張黃瓜遺傳連鎖圖譜,利用此圖譜對(duì)黃瓜單性結(jié)實(shí)主效QTL進(jìn)行了初步定位;對(duì)以弱單性結(jié)實(shí)的親本為輪回親本的回交后代BC1、BC2和BC3群體進(jìn)行了重組株的篩選;對(duì)雙親進(jìn)行了重測(cè)序并基于重測(cè)序結(jié)果在初步定位得到的主效QTL區(qū)間內(nèi)發(fā)掘SNP和InDel位點(diǎn),開發(fā)出相應(yīng)標(biāo)記后以BC3重組株為作圖群體構(gòu)建物理遺傳圖譜,完成黃瓜單性結(jié)實(shí)QTL的精細(xì)定位。對(duì)精細(xì)定位主效QTL區(qū)間內(nèi)的候選基因在3種激素處理和不同黃瓜品系的果實(shí)中進(jìn)行qRT-PCR表達(dá)驗(yàn)證。主要研究結(jié)果如下:1.利用SSR標(biāo)記構(gòu)建的遺傳連鎖圖包含7個(gè)連鎖群,圖譜總長(zhǎng)為652 cM。經(jīng)過初步定位獲得3個(gè)與黃瓜單性結(jié)... 

【文章來源】:揚(yáng)州大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】:53 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

黃瓜單性結(jié)實(shí)QTL精細(xì)定位及候選基因表達(dá)驗(yàn)證


圖2-1父本的正常授粉結(jié)實(shí)的果實(shí)(左)和不授粉條件下座果失敗的果實(shí)(右)??Fig.?2-1?Pollinated?fruit?(left)?and?failing?fruit-set?which?without?pollination?(right)?of?the?male?parent??

單性結(jié)實(shí),果實(shí),母本


2.1材料與方法??2.1.1實(shí)驗(yàn)材料??父本:‘ZK’,弱單性結(jié)實(shí)性自交系,華北型黃瓜品系(圖2-1?),其單性結(jié)實(shí)率為9.8%;??母本:‘BY’,強(qiáng)單性結(jié)實(shí)性自交系,歐洲水果型黃瓜品系(圖2-2),其單性結(jié)實(shí)率為90.2%。??這兩個(gè)親本不僅在單性結(jié)實(shí)能力上差異非常大,在果實(shí)外形上也明顯不同:‘ZK’果實(shí)果??長(zhǎng)較長(zhǎng),有刺瘤;‘BY’果實(shí)較短小,表皮光滑。2016年3月15在穴盤中播下‘ZK’和??‘BY’各20粒,4月20日定植于揚(yáng)州大學(xué)園藝與植物保護(hù)學(xué)院蔬菜試驗(yàn)田中,雜交得到??F,群體。2016年8月10日在穴盤中播下20粒?,單株,9月15日定植于揚(yáng)州大學(xué)園藝與??植物保護(hù)學(xué)院蔬菜試驗(yàn)田中,做自交構(gòu)建F2分離群體。??iira??圖2-1父本的正常授粉結(jié)實(shí)的果實(shí)(左)和不授粉條件下座果失敗的果實(shí)(右)??Fig.?2-1?Pollinated?fruit?(left)?and?failing?fruit-set?which?without?pollination?(right)?of?the?male?parent??‘ZK,??

電泳圖,親本,引物,多態(tài)性


2.2.2親本間SSR引物的篩選及多態(tài)性引物在F2群體中的驗(yàn)證??本研宄選用了?510對(duì)SSR引物在親本間篩選多態(tài)性引物,總共有452對(duì)引物可以拔增??出穩(wěn)定的條帶,其中有90對(duì)SSR引物在雙親中表現(xiàn)出特異性,多態(tài)率為19.9%?(圖24)。??然后再利用親本間具有多態(tài)性的SSR引物在88株「2群體中進(jìn)行多態(tài)性驗(yàn)證(圖2-5),它??們都可在F2群體中擴(kuò)增出穩(wěn)定的條帶。??;篇籣”:暴-i?j?I?^?。??■??Marker??圖24親本間多態(tài)性SSR引物篩選的電泳圖(最左邊為Marker,其余為親本)??Fig.?2-4?Screening?of?polymorphic?SSR?primers?among?parents?(The?left?one?is?Marker,?parents?is?on?the?right)??

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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碩士論文
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[3]黃瓜早花基因的QTL定位[D]. 路洪鳳.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2014
[4]茄子[Solanum melongena Linn.]單性結(jié)實(shí)生殖發(fā)育特性及內(nèi)源激素調(diào)控研究[D]. 陳靜.西南大學(xué) 2013
[5]黃瓜單性結(jié)實(shí)相關(guān)基因的分離、表達(dá)及SSR標(biāo)記分析[D]. 王壘.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011



本文編號(hào):2967810

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