肌肉的生長(zhǎng)發(fā)育與中華絨螯蟹的蛻殼和軀體增長(zhǎng)存在緊密聯(lián)系。本文對(duì)中華絨螯蟹不同蛻殼階段（蛻殼前期D、蛻殼期E、蛻殼后期A和蛻殼間期C）的肌肉進(jìn)行組織學(xué)觀察,以及蛻殼前后（D、A）肌肉進(jìn)行了比較轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析的基礎(chǔ)上,篩選出了肌肉發(fā)育的正、負(fù)調(diào)控候選基因和關(guān)鍵調(diào)控基因（MSTN）。然后采用RNAi技術(shù)對(duì)此關(guān)鍵基因（MSTN）進(jìn)行初步的分子功能研究。同時(shí),通過(guò)大樣本檢測(cè)了MSTN基因的單核苷酸多態(tài)性（SNP）和生長(zhǎng)性狀的相關(guān)性,探討了該基因作為分子育種功能的可行性。論文的具體研究結(jié)果如下:一、中華絨螯蟹步足肌肉生長(zhǎng)發(fā)育的關(guān)鍵基因發(fā)掘?yàn)樘接懼腥A絨螯蟹蛻殼前后肌肉組織的表觀變化和基因表達(dá)差異,挖掘肌肉生長(zhǎng)發(fā)育的關(guān)鍵基因,本章實(shí)施了四個(gè)具體蛻殼時(shí)期(蛻殼前期D_3-4、蛻殼期E、蛻殼后期A_2d和蛻殼間期C_10d)的步足肌肉的組織學(xué)觀察和含水量測(cè)定,以及蛻殼前期（D）和蛻殼后期（A）的肌肉轉(zhuǎn)錄組分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn):蛻殼前期的肌纖維直徑和橫截面積最大,蛻殼后期最小,其大小順序均為D>E>C>A,相互間存在極顯著差異（P<... 

【文章來(lái)源】：上海海洋大學(xué)上海市

【文章頁(yè)數(shù)】：59 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

不同蛻殼時(shí)期第三步足肌肉的組織學(xué)觀察

圖 1.4 蛻殼前期和后期的轉(zhuǎn)錄組 GO 分類O categories analysis of the transcriptome from pre-molt and post-molCR 驗(yàn)證分別從不同蛻殼時(shí)期（D、A）選取 4 個(gè)和肌肉發(fā)育相關(guān)PCR 驗(yàn)證。前期高表達(dá)的基因（POMT、NEB2、ZCIA 和育負(fù)向調(diào)控相關(guān)，而后期高表達(dá)的基因（TITIN，MTOR，XR的正調(diào)控基因。驗(yàn)證結(jié)果發(fā)現(xiàn)：轉(zhuǎn)錄組分析結(jié)果和差異表P＜0.01）如圖（1.5），表明本實(shí)驗(yàn)的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)的可靠度較證發(fā)現(xiàn)：在中華絨螯蟹蛻殼前后，肌肉對(duì)蛻殼活動(dòng)的響應(yīng)生物學(xué)過(guò)程，其體現(xiàn)在蛻殼前肌肉的萎縮和蛻殼后肌肉POMTlevelNEB2

進(jìn)一步分析序列的核苷酸變異后發(fā)現(xiàn)了 3 個(gè) SNP（分別為 C714T、G729A 和 G753T）突變位點(diǎn)（圖3.1），均為同義突變，將其命名為 S1、S2、S3。通過(guò)讀取突變位點(diǎn)的測(cè)序峰值進(jìn)行等位基因的純雜合分型，TC 基因型峰值圖為 T/C 套峰，GA 基因型峰值圖為G/A 套峰，GT 基因型峰值圖為 G/T 套峰；峰值圖為單峰的均為對(duì)應(yīng)基因型的純合子。T/C G/A G/TS1 S2 S3圖 3.1 中華絨螯蟹的肌肉抑制素基因（MSTN）SNP 位點(diǎn)分型Fig 3.1 SNP genotype of the MSTN gene in Chinese mitten crab2.2 MSTN 基因 SNP 位點(diǎn)的多態(tài)性分析本研究 3 個(gè)位點(diǎn)的觀測(cè)雜合度與期望雜合度基本相等，經(jīng) χ2檢驗(yàn), 均處于Hardy-Weinberg 平衡(P>0.05)，具體遺傳變異情況如表 3.1 所示。根據(jù)中度多態(tài)性原則（0.25<PIC<0.50）， 3 個(gè)群體中 3 個(gè) SNP 位點(diǎn)表現(xiàn)為中、高度多態(tài)性(PIC＞0.25)。


本文編號(hào)：2963671