目的:研究人CCR4-NOT轉(zhuǎn)錄復(fù)合體亞基7（CNOT7）基因敲減通過減少HepG2細(xì)胞TGF-β分泌對免疫微環(huán)境的影響。方法:（1）設(shè)計細(xì)胞轉(zhuǎn)染方案,將實驗分為3組:靶向敲減CNOT7組、陰性對照組和過表達(dá)CNOT7組,獲得各組細(xì)胞后,用倒置熒光顯微鏡觀察細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率;（2）Western blotting方法檢測CNOT7、轉(zhuǎn)化生長因子β（TGF-β）及核轉(zhuǎn)錄因子κB（NF-κB）p65蛋白的表達(dá)水平;（3）ELISA法測定細(xì)胞培養(yǎng)上清液中TGF-β水平;（4）流式細(xì)胞術(shù)檢測轉(zhuǎn)染后腫瘤細(xì)胞對自然殺傷（NK）細(xì)胞殺傷功能的敏感性;（5）流式細(xì)胞術(shù)檢測三組細(xì)胞培養(yǎng)上清液對人外周血T細(xì)胞分泌功能的影響。結(jié)果:與陰性對照組相比,靶向敲減CNOT7組TGF-β和NF-κB p65蛋白表達(dá)水平顯著降低（P<0.05）;過表達(dá)CNOT7組TGF-β和NF-κB p65蛋白表達(dá)水平顯著升高（P<0.05）;靶向敲減CNOT7組細(xì)胞培養(yǎng)上清液中TGF-β水平顯著降低（P<0.05）,過表達(dá)CNOT7組TGF-β水平顯著升高（P<0.05）;NK細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞共培養(yǎng),靶向敲減C... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
abstract
常用縮寫詞中英文對照表
前言
1 材料與方法
    1.1 實驗材料
    1.2 實驗方法
    1.3 統(tǒng)計學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 HepG2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率分析
    2.2 CNOT7 基因敲減對HepG2 細(xì)胞TGF-β1 蛋白、NF-κb p65 表達(dá)水平的影響
    2.3 CNOT7 基因敲減對HepG2 細(xì)胞分泌TGF-β1 水平的影響
    2.4 CNOT7 基因敲減后HepG2 細(xì)胞對NK細(xì)胞殺傷功能的敏感性
    2.5 CNOT7 基因敲減對T細(xì)胞分泌INF-γ水平的影響
    2.6 CNOT7 基因敲減對T細(xì)胞分泌TNF-α水平的影響
3 討論
4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
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