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甜菜木葡聚糖內(nèi)轉(zhuǎn)糖苷酶基因BvXTH1的克隆及功能分析

發(fā)布時間:2020-12-29 12:54
  木葡聚糖內(nèi)轉(zhuǎn)糖苷酶是植物細(xì)胞壁重構(gòu)過程中的關(guān)鍵酶,通過增加細(xì)胞壁的延展性而促進(jìn)細(xì)胞的伸長,進(jìn)而影響植物的生長和發(fā)育。本研究在本課題組對甜菜塊根發(fā)育轉(zhuǎn)錄組分析基礎(chǔ)上,篩選出甜菜的一個XTH基因,對其進(jìn)行結(jié)構(gòu)特征分析、基因克隆,轉(zhuǎn)化擬南芥,功能鑒定,為揭示甜菜塊根發(fā)育分子機(jī)理提供理論依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:1、BvXTH1基因編碼區(qū)全長876bp,BvXTH1蛋白質(zhì)分子質(zhì)量為31782.26Da,化學(xué)式為C1417H2113N381O436S10,等電點(diǎn)pI為5.04,弱酸性,疏水性平均系數(shù)為-0.357,預(yù)測可能為親水性蛋白質(zhì)。BvXTH1蛋白存在XTH家族保守基序DEIDFEFLG,BvXTH1含有信號肽,在N端存在跨膜螺旋。系統(tǒng)進(jìn)化樹分析推斷BvXTH1與藜麥(Chenopodium quinoa)及菠菜(Spinacia oleracea)親緣關(guān)系最近。2、BvXTH1基因在甜菜不同器官中表達(dá)量高低依次為葉﹥柄﹥根,豐產(chǎn)型品種表達(dá)量高于高糖型品種。3、克隆了BvXTH1基因... 

【文章來源】:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū)

【文章頁數(shù)】:52 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

甜菜木葡聚糖內(nèi)轉(zhuǎn)糖苷酶基因BvXTH1的克隆及功能分析


信號肽預(yù)測Fig.1Thepredictionofsignalpeptide

菠菜,同源序列,親緣關(guān)系,木葡聚糖


圖 2 跨膜結(jié)構(gòu)分析Fig.2 The analysis of transmembrane3.1.3 BvXTH1 氨基酸比對及系統(tǒng)發(fā)育分析選擇菠菜(Spinacia oleracea)、擬南芥(Arabidopisthaliana )、黃瓜(Cucumis sativus甜瓜(Cucumis melo)、黃麻(Corchorus olitorius)、油棕(Elaeis guineensis)、陸地(Gossypium hirsutum)、蘆筍(Asparagus officinalis)和藜麥(Chenopodium quinoa)9 種物中的蛋白同源序列(蛋白序列號見表 4)與 BvXTH1 進(jìn)行多重氨基酸序列比對,果發(fā)現(xiàn)這些同源序列和 BvXTH1 的同源性為 55%-87%。結(jié)果顯示 BvXTH1 蛋白含一個高度保守的結(jié)構(gòu)域,為木葡聚糖內(nèi)轉(zhuǎn)糖苷酶(XET)的催化結(jié)構(gòu)域 DEIDFEFLG此外,BvXTH1 的 C 端有 4 個保守的半胱氨酸(Cys )(圖 2)。系統(tǒng)進(jìn)化樹分析了單子葉、雙子葉、低等蕨類不同植物種類的 15 個同源蛋白親緣關(guān)系(蛋白序列號見表 4)。如圖 4 所示,BvXTH1 與菠菜(Spinacia oleracea)和麥(Chenopodium quinoa)親緣關(guān)系最近。表 4 多種植物 XTH 蛋白序列號

植物物種,多序列比對,基序,括號


菠菜SpinaciaoleraceaSoXTH KNA20838黃瓜CucumissativusCsXTH NP_001267702甜瓜CucumismeloCmXTH NP_001284443木薯ManihotesculentaMeXTH OAY21801藜麥ChenopodiumquinoaCqXTH XP_021758129黃麻CorchorusolitoriusCoXTH OMO72769擬南芥ArabidopsisthalianaATXTH23 Q38910陸地棉GossypiumhirsutumGhXTH XP_016730459蘿卜RaphanussativusRsXTH XP_018457229油棕ElaeisguineensisEgXTH XP_010911439

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]過表達(dá)胡楊XTH基因能夠提高煙草抗旱性[J]. 韓彥莎,儀慧蘭.  中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報. 2016(08)
[2]細(xì)胞壁重構(gòu)關(guān)鍵酶木葡聚糖內(nèi)轉(zhuǎn)糖苷酶/水解酶(XTH)的研究進(jìn)展[J]. 杜麗萍,沈昕,陳少良,胡贊民.  農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報. 2010(03)
[3]ERF類轉(zhuǎn)錄因子OPBP1基因的超表達(dá)提高煙草的耐鹽能力[J]. 劉文奇,陳旭君,徐曉暉,凌建群,郭澤建.  植物生理與分子生物學(xué)學(xué)報. 2002(06)

碩士論文
[1]甘藍(lán)型油菜BnXTH1和BnEXPA4基因克隆及表達(dá)分析[D]. 劉慧娟.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014



本文編號:2945674

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