基因組DNA轉(zhuǎn)錄形成RNA,再由RNA翻譯形成蛋白質(zhì)是生命活動(dòng)的基本過程,對(duì)細(xì)胞的生長、代謝和凋亡起著重要作用。核酸作為調(diào)控生理活動(dòng)的基本遺傳物質(zhì),攜帶著生命活動(dòng)的遺傳信息,對(duì)所有生物體的生長、發(fā)育、遺傳和變異等重大生命現(xiàn)象起著決定性作用。其中,microRNA是一類內(nèi)源性的、非編碼的長度相對(duì)較短的小RNA,microRNA通過與目標(biāo)信使RNA（mRNA）特異結(jié)合從而抑制蛋白翻譯或誘導(dǎo)mRNA降解,在調(diào)控基因表達(dá)、細(xì)胞增殖分化凋亡過程等方面發(fā)揮著重要作用,其表達(dá)含量異常與多種疾病尤其是癌癥的發(fā)生密切相關(guān)。另外,由單核苷酸多態(tài)性（SNPs）所引起的基因突變,通�？梢鹨欢ǖ谋硇妥兓�,SNPs的分析檢測在致病機(jī)理研究、基因功能研究以及個(gè)性化用藥等方面具有重要意義。此外,特定位點(diǎn)的mRNA突變直接決定了翻譯蛋白的功能,與包括癌癥在內(nèi)的多種疾病的發(fā)展密切相關(guān),近年來腫瘤相關(guān)mRNA突變作為評(píng)估腫瘤細(xì)胞在生物體內(nèi)或血液中遷移的特異性生物標(biāo)志物得到高度重視。因此microRNA及基因突變的檢測對(duì)基因功能研究和以其作為生物標(biāo)志物的遺傳病學(xué)研究、疾病診斷尤其是癌癥的早期診斷與治療等都具有十分重要的意義... 

【文章來源】：陜西師范大學(xué)陜西省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：138 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

通過偶聯(lián)RCA反應(yīng)和多重轉(zhuǎn)錄檢測microRNA[57]

?１７３??３５０?４００?４５０?５００?５５０?６００??圖１－１０全自動(dòng)樣品制備微系統(tǒng)用于基因檢測［９８］??Ｆｉｇｕｒｅ?１－１０?Ｆｕｌｌｙ?ａｕｔｏｍａｔｅｄ?ｓａｍｐｌｅ?ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ?ｍｉｃｒｏｓｙｓｔｅｍ?ｆｏｒ?ｇｅｎｅｔｉｃ?ｔｅｓｔｉｎｇ??１．２．１．３基于測序技術(shù)檢測ＳＮＰｓ??ＤＮＡ測序（ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ）?［９９＿１Ｇ４］是指分析研宄特定的基因組序列中４種堿基??Ａ?（腺嘌呤）、Ｇ?（鳥嘌呤）、Ｃ?（胞嘧啶）和Ｔ?（胸腺嘧啶）的排列組合方式，通??過對(duì)待檢測的樣本中同一基因片段進(jìn)行測序并比對(duì)，可以直接確定所檢測的位點(diǎn)??是否發(fā)生突變。ＤＮＡ測序是相對(duì)最容易的ＳＮＰｓ檢測方法，在現(xiàn)有的各類分析檢??１０??

？?Ｑ?Ａ?Ａ?；?Ｇ?ｃ?Ａ?Ａ?ＩＴ＊＊?ＯＣ?ＡＵ??＾?ｉ?ｉ?Ｊ??ｗａｒ？．?ｉ?ＡＩＴＰＲ?ｊ?９??ｗ?Ｏｆ?Ｕ，Ｕｔｐ－ｃ＾?＾?）?ｔ?ＣＴ?Ｉ??１?？?３??ＦＲＥＴ－５?３：?ｈ？ｎ？ｒ＾ｘ？?Ａ??？?ｒ＾ｆＴ?２．?ｈｆｉ＾ｒｅｉｒ／＾ｘｊｓ?＜ｉ；Ａ??１！?ｎ?－?１°？??：卜⑴會(huì)??＇?ｊ?ｏｒ?｜?ｏｆ?＾?ｈｒ?＾?＞００?ｎｍ??圖１－９基于單堿基延伸的ＳＮＰｓ基因分型Ｉ９７】??Ｆｉｇｕｒｅ?１－９?ＳＮＰｓ?ｇｅｎｏｔｙｐｉｎｇ?ａｓｓａｙ?ｂａｓｅｄ?ｏｎ?ｓｉｎｇｌｅ?ｂａｓｅ?ｅｘｔｅｎｓｉｏｎ??Ｚｈｕａｎｇ等＿將ＤＮＡ提取、ＰＣＲ微芯片和控制儀表組裝成一個(gè)全自動(dòng)的微??系統(tǒng)用于人全血的基因檢測，其原理如圖卜１０所示：將ＤＮＡ提取和ＰＣＲ整合??到１５?ＭＬ的微反應(yīng)室中，并嵌入一塊濾紙用于捕獲基因ＤＮＡ，無需洗脫直接對(duì)??目標(biāo)ＤＮＡ進(jìn)行原位ＰＣＲ擴(kuò)增，最后使用便攜式微芯片毛細(xì)管電泳系統(tǒng)進(jìn)行電??泳分析完成檢測。該微系統(tǒng)成功實(shí)現(xiàn)全自動(dòng)化，且價(jià)格低，同時(shí)通過使用雙色多??重等位基因特異性ＰＣＲ，將該微系統(tǒng)模型直接從血液中檢測導(dǎo)致遺傳性聽力損??失的３個(gè)ＧＪＢ２基因突變，這對(duì)于發(fā)展“樣品問答”（ｓａｍｐｌｅ－ｉｎ－ａｎｓｗｅｒ－ｏｕｔ）微??系統(tǒng)進(jìn)行快速核酸分析邁出了重要的一步。??


本文編號(hào)：2920602