本文關(guān)鍵詞：干露脅迫對(duì)菲律賓蛤仔免疫指標(biāo)和基因表達(dá)的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：菲律賓蛤仔是一種重要的養(yǎng)殖灘涂貝類(lèi),在南北方養(yǎng)殖海域均有分布。在菲律賓蛤仔養(yǎng)殖和運(yùn)輸過(guò)程中,經(jīng)常會(huì)處于干露和溫度變化狀態(tài)。本實(shí)驗(yàn)以正常飼養(yǎng)條件下的菲律賓蛤仔為對(duì)照,研究了不同溫度下(5℃、15℃、25℃)的干露對(duì)菲律賓蛤仔免疫指標(biāo)的影響,同時(shí)還對(duì)干露脅迫下蛤仔差異表達(dá)基因進(jìn)行了篩選。研究結(jié)果有助于揭示菲律賓蛤仔響應(yīng)溫度和干露脅迫的免疫學(xué)機(jī)理,得到的大量轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)平臺(tái)有助于探究軟體動(dòng)物耐干露脅迫的分子機(jī)理,同時(shí)為菲律賓蛤仔長(zhǎng)途運(yùn)輸?shù)姆绞椒椒ㄟx擇提供一定的理論依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:1.不同溫度(5℃、15℃、25℃)下的干露對(duì)菲律賓蛤仔存活率的影響不同溫度下的干露對(duì)菲律賓蛤仔的存活率存在不同程度的影響。隨著干露過(guò)程中溫度的升高,蛤仔成貝的死亡率增加;隨著干露時(shí)間的延長(zhǎng),死亡率也增加。蛤仔在干露脅迫下,雙殼緊閉,以保存水分提高耐干露能力,表明蛤仔具有很強(qiáng)的耐干露能力。各溫度組蛤仔干露48h內(nèi)的死亡率10%,表明在菲律賓蛤仔的運(yùn)輸過(guò)程中,48h內(nèi)的運(yùn)輸基本可以常溫進(jìn)行,如能控制住15℃以下則更好。更長(zhǎng)時(shí)間的干露運(yùn)輸則應(yīng)選擇低溫條件下進(jìn)行。2.不同溫度(5℃、15℃、25℃)下的干露對(duì)菲律賓蛤仔免疫指標(biāo)的影響干露脅迫下,蛤仔MDA和NO顯著升高,說(shuō)明干露脅迫在蛤仔體內(nèi)引發(fā)脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)產(chǎn)生過(guò)多的丙二醛,從而促使蛤仔機(jī)體產(chǎn)生了大量的NO對(duì)自身進(jìn)行保護(hù)。干露過(guò)程中蛤仔酸性和堿性磷酸酶以及SOD、CAT兩種抗氧化酶活力未出現(xiàn)顯著規(guī)律性變化,但恢復(fù)海水培養(yǎng)期有不同程度的升高,說(shuō)明干露及溫度脅迫可能會(huì)使蛤仔機(jī)體代謝產(chǎn)生代償性升高,推測(cè)可能存在一定程度的補(bǔ)償生長(zhǎng)和提高免疫力的現(xiàn)象,這也將是蛤仔健康養(yǎng)殖研究領(lǐng)域的一個(gè)重要方向。這一過(guò)程中內(nèi)臟團(tuán)發(fā)揮的作用大于鰓組織,且低溫狀況下的干露對(duì)蛤仔的傷害較小,蛤仔對(duì)自身的保護(hù)作用更加明顯。3.干露脅迫下菲律賓蛤仔差異基因的篩選和表達(dá)分析利用第二代高通量測(cè)序技術(shù)構(gòu)建了菲律賓蛤仔c DNA文庫(kù),完成了轉(zhuǎn)錄本的拼接和對(duì)轉(zhuǎn)錄本進(jìn)一步的功能注釋。在此基礎(chǔ)上,運(yùn)用RNA-Seq技術(shù)進(jìn)行了干露脅迫下菲律賓蛤仔內(nèi)臟團(tuán)和鰓差異基因的篩選和表達(dá)分析�；旌掀唇庸搏@得轉(zhuǎn)錄本241381條(長(zhǎng)度大于200bp),平均長(zhǎng)度為769bp,其中N50為1277bp。Unigene共有156644條(長(zhǎng)度大于200bp),平均序列長(zhǎng)度為649bp,N50為1046bp。30.76%的unigene在數(shù)據(jù)庫(kù)中得到注釋,108457條未能得到成功注釋,功能未知。干露脅迫導(dǎo)致蛤仔內(nèi)臟團(tuán)1742條基因差異表達(dá),其中上調(diào)基因有1171條,下調(diào)基因571條;導(dǎo)致鰓中1765條基因差異表達(dá),包含上調(diào)基因832條和下調(diào)基因933條。內(nèi)臟團(tuán)中上調(diào)基因較多,而鰓中下調(diào)基因較多,說(shuō)明干露部分激活了內(nèi)臟團(tuán)中的代謝活動(dòng),同時(shí)抑制了鰓的呼吸活動(dòng)。
【關(guān)鍵詞】：菲律賓蛤仔 干露 溫度 免疫指標(biāo) 差異基因
【學(xué)位授予單位】：大連海洋大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：S917.4
【目錄】：

• 摘要3-4
• abstract4-8
• 第一章 文獻(xiàn)綜述8-15
• 1.無(wú)脊椎動(dòng)物免疫因子及其對(duì)環(huán)境脅迫的響應(yīng)8-11
• 1.1 無(wú)脊椎動(dòng)物免疫因子介紹8-10
• 1.2 溫度對(duì)水產(chǎn)無(wú)脊椎動(dòng)物免疫因子的影響10-11
• 1.3 干露對(duì)海洋無(wú)脊椎動(dòng)物生理生態(tài)學(xué)的影響11
• 2.環(huán)境脅迫下的海洋生物的分子響應(yīng)機(jī)制研究進(jìn)展11-12
• 2.1 環(huán)境脅迫下差異基因的篩選11-12
• 2.2 環(huán)境脅迫下基因表達(dá)的研究12
• 3.高通量測(cè)序技術(shù)12-14
• 4.本研究的目的及意義14-15
• 第二章 不同溫度下的干露對(duì)菲律賓蛤仔免疫指標(biāo)的影響15-27
• 1. 材料與方法15-16
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料15
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法15
• 1.3 取樣和免疫指標(biāo)測(cè)定15-16
• 2.實(shí)驗(yàn)結(jié)果16-24
• 2.1 干露時(shí)間的選擇和確定16-17
• 2.2 不同溫度下的干露對(duì)菲律賓蛤仔酸性磷酸酶(ACP)活力的影響17-18
• 2.3 不同溫度下的干露對(duì)菲律賓蛤仔堿性磷酸酶（AKP）活力的影響18-19
• 2.4 不同溫度下的干露對(duì)菲律賓蛤仔過(guò)氧化氫酶(CAT)活力的影響19-21
• 2.5 不同溫度下的干露對(duì)菲律賓蛤仔超氧化物岐化酶(SOD)活力的影響21-22
• 2.6 不同溫度下的干露對(duì)菲律賓蛤仔丙二醛(MDA)含量的影響22-23
• 2.7 不同溫度下的干露對(duì)菲律賓蛤仔一氧化氮(NO)含量的影響23-24
• 3.討論24-27
• 3.1 蛤仔干露時(shí)間與溫度24-25
• 3.2 干露對(duì)蛤仔免疫指標(biāo)的影響25-26
• 3.3 蛤仔適應(yīng)干露脅迫的生理學(xué)機(jī)制探討26-27
• 第三章 干露脅迫下蛤仔差異表達(dá)基因的分析27-47
• 1.實(shí)驗(yàn)材料與方法27-31
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料27
• 1.2 試驗(yàn)方法27-31
• 2.實(shí)驗(yàn)結(jié)果31-45
• 2.1 RNA提取和質(zhì)量檢測(cè)31
• 2.2 測(cè)序結(jié)果質(zhì)量檢測(cè)31-33
• 2.3 轉(zhuǎn)錄本的拼接33-34
• 2.4 基因功能注釋34-39
• 2.5 差異基因篩選和分析39-45
• 3.討論45-47
• 第四章 結(jié)論47-48
• 參考文獻(xiàn)48-56
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文56-59
• 致謝59

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  本文關(guān)鍵詞：干露脅迫對(duì)菲律賓蛤仔免疫指標(biāo)和基因表達(dá)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：287426