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番茄SlTCP26基因的克隆與功能分析

發(fā)布時(shí)間:2024-07-07 03:38
  莖分枝是植物為了適應(yīng)環(huán)境和規(guī)避外界傷害而表現(xiàn)出來的一種生物性狀,植物分枝結(jié)構(gòu)的不同導(dǎo)致植物具有不同的形態(tài)結(jié)構(gòu),并且植物分枝還與作物產(chǎn)量密切相關(guān)。番茄(Solanum lycopersicum)作為一種世界范圍內(nèi)廣受消費(fèi)者喜愛的蔬菜作物,同時(shí)也是用來研究果實(shí)發(fā)育與成熟調(diào)控的最佳模式植物。明確影響番茄分枝形態(tài)建成的因素,對(duì)今后改良番茄株型和提升番茄產(chǎn)量具有重要意義。TCP轉(zhuǎn)錄因子在植物生長(zhǎng)發(fā)育過程,特別是在莖分枝形態(tài)建成中具有重要的調(diào)控作用,但當(dāng)前有關(guān)TCP的研究主要集中在模式植物擬南芥中,在番茄中的研究較少。本論文以番茄為材料,通過生物信息學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)和生理生化等方法對(duì)SlTCP26在番茄莖分枝形態(tài)建成中的功能進(jìn)行了研究。主要研究結(jié)果如下:(1)氨基酸序列分析表明SlTCP26基因開放閱讀框(ORF)為552 bp,編碼183個(gè)氨基酸,含有保守的TCP結(jié)構(gòu)域,進(jìn)化樹分析表明SlTCP26基因與分枝相關(guān)的基因親緣關(guān)系較近,揭示SlTCP26基因可能參與番茄植株莖形態(tài)的建成。(2)啟動(dòng)子序列分析表明,SlTCP26基因啟動(dòng)子區(qū)域含有非生物脅迫相關(guān)的順式作用元件;非生物脅迫處理表明,...

【文章頁數(shù)】:74 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
主要符號(hào)對(duì)照表
第1章 前言
    1.1 莖分枝的研究進(jìn)展
        1.1.1 側(cè)枝的形成與類型
        1.1.2 激素調(diào)控植物分枝的研究進(jìn)展
        1.1.3 調(diào)控植物分枝的相關(guān)基因研究進(jìn)展
    1.2 植物TCP基因的研究進(jìn)展
    1.3 研究目的與和意義
        1.3.1 研究目的
        1.3.2 研究意義
    1.4 研究?jī)?nèi)容與技術(shù)路線
        1.4.1 主要研究?jī)?nèi)容
        1.4.2 技術(shù)路線
第2章 番茄SlTCP26基因生物信息學(xué)及對(duì)不同脅迫響應(yīng)分析
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
    2.2 實(shí)驗(yàn)試劑和儀器
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 番茄SlTCP26基因的生物信息學(xué)及同源性分析
        2.3.2 SlTCP26基因啟動(dòng)子元件分析
        2.3.3 番茄植株的激素處理和非生物脅迫處理
    2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.4.1 SlTCP26基因的進(jìn)化關(guān)系分析
        2.4.2 SlTCP26基因啟動(dòng)子元件分析
        2.4.3 番茄SlTCP26基因受到多種非生物脅迫及外源激素的調(diào)節(jié)
    2.5 討論
    2.6 本章小結(jié)
第3章 番茄SlTCP26基因組織表達(dá)分析、克隆及載體構(gòu)建
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 植物材料
        3.1.2 菌株及載體
        3.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
        3.1.4 實(shí)驗(yàn)儀器
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 番茄SlTCP26基因的組織表達(dá)特性分析
        3.2.2 番茄SlTCP26基因的擴(kuò)增及回收
        3.2.3 SlTCP26基因的超表達(dá)載體構(gòu)建
        3.2.4 SlTCP26基因的RNAi干擾載體構(gòu)建
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.3.1 番茄SlTCP26基因的組織表達(dá)特征
        3.3.2 番茄SlTCP26基因的克隆
        3.3.3 番茄SlTCP26基因的載體構(gòu)建
    3.4 討論
    3.5 本章小結(jié)
第4章 番茄的遺傳轉(zhuǎn)化及SlTCP26轉(zhuǎn)基因植株表型觀察
    4.1 材料和儀器
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        4.1.3 相關(guān)試劑的配制
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.1 番茄遺傳轉(zhuǎn)化
        4.2.2 SlTCP26轉(zhuǎn)基因植株的鑒定
        4.2.3 SlTCP26轉(zhuǎn)基因植株表型分析及相關(guān)指標(biāo)測(cè)定
    4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.3.1 SlTCP26轉(zhuǎn)基因植株的鑒定
        4.3.2 超量表達(dá)SlTCP26基因的植株分枝數(shù)顯著增加
        4.3.3 SlTCP26基因在去頭植物中的表達(dá)水平的變化
        4.3.4 IAA相關(guān)基因在野生型植株和SlTCP26-OE植株中表達(dá)差異
    4.4 討論
    4.5 本章小結(jié)
第5章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
在學(xué)期間的科研情況



本文編號(hào):4003096

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