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水稻立枯病抗性資源篩選及抗病基因初步定位

發(fā)布時(shí)間:2020-11-03 07:27
   水稻是重要的糧食作物,立枯病是水稻旱育秧苗期最嚴(yán)重的病害之一。近年來(lái),在北方稻區(qū)發(fā)病逐年加重,對(duì)水稻苗期生長(zhǎng)和旱育壯秧構(gòu)成了巨大威脅。培育抗病新品種是防治立枯病最經(jīng)濟(jì)、有效的方法。目前,水稻立枯病遺傳和育種的相關(guān)研究較少,其抗病種質(zhì)資源、遺傳機(jī)制少有報(bào)道。因此,篩選水稻抗立枯病品種資源,研究抗病遺傳機(jī)制,挖掘抗病基因及抗病載體材料,將有利于推動(dòng)水稻抗立枯病分子輔助育種,加快水稻抗病育種進(jìn)程。混合群體分離分析法(Bulked Segregant Analysis,BSA)是剖析復(fù)雜性狀遺傳基礎(chǔ)的一種重要方法,已在植物抗病基因定位中得到了廣泛的應(yīng)用。本研究以226份水稻品種為試驗(yàn)材料,在兩年的試驗(yàn)條件下進(jìn)行立枯病接種鑒定,篩選抗源材料。利用篩選出的高抗和高感品種為親本構(gòu)建F_(2:3)群體,進(jìn)行遺傳分析和BSA分析。主要研究結(jié)果如下:(1)利用輪枝鐮刀菌強(qiáng)致病力小種為供試菌株,于2015年和2016年對(duì)黑龍江省226份水稻品種資源進(jìn)行接種鑒定,結(jié)果表明:所有鑒定品種全部發(fā)病,且尚未發(fā)現(xiàn)免疫品種,2015年病情指數(shù)為5.36~83.72,2016年病情指數(shù)為5.11~83.00。(2)2年間抗病性鑒定結(jié)果均為高抗(HR)的品種有6份,分別為龍粳20號(hào)、黑粳2號(hào)、龍粳21號(hào)、墾稻9號(hào)、龍稻5號(hào)、龍粳27號(hào),占所有鑒定品種的2.65%;均為中抗(MR)的品種有龍粳22號(hào)、牡丹江8號(hào)、龍粳29號(hào)等11份,占所有鑒定資源總數(shù)的4.87%;均為中感(MS)的品種有上育397、松粳4號(hào)、延粘1號(hào)等30份,占所有鑒定品種的13.27%;均為感病(S)的品種有牡丹江5號(hào)、墾粳3、龍粳13號(hào)等65份,占所有鑒定品種的28.76%;均為高感(HS)的品種有合江11號(hào)、東農(nóng)416、墾糯1號(hào)等11份,占所有鑒定品種的4.87%。(3)對(duì)高感品種合江11號(hào)和高抗品種龍粳20號(hào)雜交衍生F_1及F_(2:3)群體接種輪枝鐮刀菌強(qiáng)致病力小種。結(jié)果表明:F_1均表現(xiàn)出抗性,F_2群體的抗感期望比為3:1,說(shuō)明龍粳20號(hào)對(duì)該菌株的抗性是由一對(duì)顯性基因控制的。(4)選取F_2群體中20株極端抗病單株和20株極端感病單株,等量混合DNA,分別構(gòu)建抗池和感池。利用篩選出的105對(duì)多態(tài)性SSR引物對(duì)親本和抗感池進(jìn)行PCR擴(kuò)增,結(jié)果位于11號(hào)染色體上的RM3151和RM27318表現(xiàn)出與親本間和抗、感池間一致的多態(tài)性。進(jìn)一步利用F_2群體對(duì)RM3151和RM27318之間的多態(tài)性引物進(jìn)行掃描,最終將立枯病抗性基因定位在標(biāo)記RM27181和RM1233之間,遺傳距離分別為3.3cM-8.4cM,貢獻(xiàn)率為12.6%,加性效應(yīng)為-1.3,命名為L(zhǎng)K11-1。經(jīng)比較基因組發(fā)現(xiàn),一個(gè)控制稻瘟病的基因Pb1和一個(gè)白葉枯病基因Xa10出現(xiàn)在LK11-1附近,表明水稻抗病性基因位點(diǎn)可能具有遺傳共性,這對(duì)立枯病遺傳的研究提供了很好的借鑒。
【學(xué)位單位】:東北農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位年份】:2018
【中圖分類】:S435.111.4
【部分圖文】:

原理圖,原理圖


BSA原理圖

鐮刀菌,生長(zhǎng)特性,培養(yǎng)基,農(nóng)業(yè)大學(xué)


a:培養(yǎng)基正面;b:培養(yǎng)基背面 c:分生孢子.e: a: Front of of culture medium; b: Back of culture medium;c: Conidium.圖 3-1 輪枝鐮刀菌生長(zhǎng)特性Fig.3-1 Growth characteristics of Fusarium verticillioides2015 年 9 月和 2016 年 4 月在東北農(nóng)業(yè)大學(xué)溫室對(duì) 226 份水稻品種進(jìn)行輪枝鐮刀菌

水稻立枯病,發(fā)病情況,病斑


:a 和 b 為水稻播種及出苗情況;c 和 d 為 2~3 葉期秧苗發(fā)病情況。ote: a and b: Rice seeding and seedling emergence; c and d: Incidence of seedling in 2~3 leaf stage圖 3-2 水稻立枯病接種鑒定Fig.3-2 The identification results of resistance to rice seedling blight由圖 3-3 可以看出水稻立枯病抗性鑒定情況。圖 3-3 a 為 0 級(jí)的發(fā)病情況,植株生長(zhǎng),莖基部沒(méi)有出現(xiàn)病斑;圖 3-3 b 為 1 級(jí),莖基部有少量病斑,占莖圍 1/4 以下,但能
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