發(fā)布時間：2020-09-18 19:57

　　 干旱、高鹽、重金屬等非生物逆境對植物的生長代謝造成脅迫,在長期的進化過程中,植物產(chǎn)生了滲透調(diào)節(jié)、抗氧化調(diào)節(jié)等機制來應對這些非生物脅迫。近期發(fā)現(xiàn),在植物的抗逆過程中,肌醇發(fā)揮著重要的作用。肌醇能夠通過參與到細胞滲透勢的調(diào)節(jié)、細胞膜的合成、細胞信號的傳導、生長素的積累和利用等過程以應對脅迫。在肌醇代謝過程中,肌醇-1-磷酸合酶(MIPS)是肌醇生物合成的限速酶,肌醇加氧酶(MIOX)則是催化肌醇分解的關鍵酶。目前,關于肌醇代謝關鍵酶的研究多是以擬南芥、水稻等草本植物為材料開展的,但是關于木本植物肌醇代謝關鍵酶基因的研究報道甚少。1.本研究以山新楊為材料,通過RT-PCR技術獲得了肌醇代謝關鍵酶基因PdMIPS和PdMIOX,并對其編碼的氨基酸序列進行比對與進化樹分析。2.運用實時定量PCR技術分析PdMIPS和PdMIOX對高鹽、干旱和重金屬Cu2+及ABA處理的響應模式。結果顯示,NaCl、PEG、ABA和Cu2+均能誘導PdMIPS基因高水平表達;NaCl、PEG能誘導PdMIOX基因表達,而Cu2+則抑制PdMIOX基因表達,ABA對Pd MIOX基因表達水平的影響不明顯。以上結果暗示,楊樹MIPS和MIOX基因在楊樹逆境脅迫調(diào)控中發(fā)揮重要作用。3.利用本生煙表皮細胞瞬時表達系統(tǒng)對PdMIPS蛋白做亞細胞定位,結果顯示該蛋白定位于細胞質(zhì)。4.分別構建PdMIPS和PdMIOX過表達載體,通過葉盤法進行山新楊遺傳轉(zhuǎn)化,獲得轉(zhuǎn)PdMIPS和PdMIOX基因的山新楊。與野生型相比,過表達PdMIPS轉(zhuǎn)基因植株表現(xiàn)出對高鹽的耐受力提高。PdMIOX基因的轉(zhuǎn)基因楊樹表型正在進一步鑒定。5.對移栽至土壤中的PdMIPS轉(zhuǎn)基因植株和野生型植株澆灌鹽水,轉(zhuǎn)基因植株的SOD活性高于野生型,且能抑制MDA含量的增加,相對電導率低于野生型。暗示PdMIPS在植物逆境脅迫中發(fā)揮了重要作用。
【學位單位】：魯東大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2017
【中圖分類】：Q943.2
【部分圖文】：

己六醇（圖 1.1），是重要的生長因子肉肌醇，簡寫做 MI。1850 年 Scher）,并在其沉淀后的溶液中發(fā)現(xiàn)了肌、性質(zhì)及其衍生物開展研究。隨著的發(fā)現(xiàn)，科學界又開展了肌醇與植

圖 1.2 肌醇的合成和分解代謝途徑Fig1.2 Synthetic and catabolic pathways of inositol物體內(nèi)的生理作用

圖 1.3 肌醇在植物體內(nèi)的多重作用[65]Fig1.3 Multiple roles of inositol in plants肌醇是植酸（Phytic acid）的合成前體，植酸，即肌醇-6-磷酸(IP6）是種子儲

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本文編號：2822104