發(fā)布時(shí)間：2020-08-28 00:20

【摘要】：胞膜窖(Caveolae)是細(xì)胞質(zhì)膜表面特異性內(nèi)陷微區(qū),主要由脂類和蛋白質(zhì)組成。窖蛋白(Caveolins)是Caveolae的表面標(biāo)記蛋白,是構(gòu)成Caveolae的完整膜蛋白。窖蛋白至少有3種亞型,其中Caveolin-1(Cav-1)是Caveolae最重要的表面功能蛋白。胞膜窖和窖蛋白在多種細(xì)胞生物學(xué)功能中起關(guān)鍵作用。已有的研究表明Cav-1參與牙胚發(fā)育過程。Shh是高度保守的信號(hào)通路,參與多個(gè)器官的發(fā)育過程。在牙胚發(fā)育中Shh信號(hào)持續(xù)存在,調(diào)控牙源性上皮區(qū)域的確定,牙尖的發(fā)育和牙根的形成,并在確定牙齒數(shù)目中有重要作用。研究表明Cav-1可協(xié)助Shh從胞內(nèi)運(yùn)輸至細(xì)胞表面。雖然Cav-1和Shh都參與牙胚發(fā)育,兩者又有功能上的聯(lián)系,但牙胚發(fā)育過程中Cav-1與Shh信號(hào)通路間是否存在調(diào)控關(guān)系尚不明確。目的通過對(duì)比觀察Cav-1基因敲除小鼠與野生型小鼠下頜第一磨牙牙胚早期發(fā)育過程中Shh信號(hào)通路的表達(dá),探討Cav-1與Shh信號(hào)通路時(shí)空表達(dá)模式的關(guān)系,為深入研究Cav-1在牙齒發(fā)育中的作用提供參考。方法收集胚胎發(fā)育13.5,14.5,15.5,16.5,17.5及18.5天的Cav-1基因敲除小鼠(KO)和同源野生型小鼠(WT)的下頜第一磨牙牙胚,經(jīng)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)及免疫組織化學(xué)技術(shù)鑒定基因型。免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)Shh、Ptc-1、Ptc-2、Gli-1、Gli-2在不同發(fā)育時(shí)期牙胚組織中的表達(dá),并行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果Shh、Ptc-1、Ptc-2、Gli-1、Gli-2在E13.5-E18.5,WT和KO胎鼠的下頜第一磨牙牙胚中均有表達(dá),并呈現(xiàn)出不同的表達(dá)模式。Shh蛋白在上皮芽的頂端可見陽性表達(dá),帽狀期特異性地表達(dá)于釉結(jié)部位,鐘狀期表達(dá)于成釉細(xì)胞層。Ptc-1在E13.5表達(dá)于上皮芽及周圍間充質(zhì)中,E14.5-E17.5天表達(dá)于外釉上皮、內(nèi)釉上皮、星網(wǎng)狀層、中間層及鄰近內(nèi)釉上皮的牙乳頭細(xì)胞中,E18.5天,外釉上皮、成釉細(xì)胞、中間層仍可見Ptc-1表達(dá),但牙乳頭中未檢測(cè)到Ptc-1表達(dá)。Ptc-2在成釉器中的表達(dá)模式類似于Ptc-1,但在牙乳頭中未能檢測(cè)到Ptc-2的表達(dá)。Gli-1,Gli-2表達(dá)模式相似,E13.5表達(dá)于上皮芽及周圍間充質(zhì)中,E14.5-E18.5天,表達(dá)于成釉器的各層細(xì)胞和牙乳頭細(xì)胞。而同時(shí)期的WT和KO兩者之間Shh信號(hào)通路的蛋白表達(dá)水平無顯著性差異。結(jié)論Cav-1基因敲除對(duì)小鼠下頜第一磨牙牙胚早期發(fā)育中Shh信號(hào)通路的時(shí)空表達(dá)模式無顯著性影響。
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R781

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

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本文編號(hào)：2806814