【摘要】：研究背景:幽門螺桿菌(helicobacter pylori,Hp)感染是一個(gè)全球性的問(wèn)題,全世界人群感染率已超過(guò)50%,根除Hp可以提高消化性潰瘍愈合率,減少胃癌的發(fā)病率,但Hp的根除率逐漸下降,甚至低于80%。Hp培養(yǎng)仍是診斷Hp感染的金標(biāo)準(zhǔn)方法,并可進(jìn)行藥敏試驗(yàn)、細(xì)菌分型和致病基因的研究等,但Hp培養(yǎng)耗時(shí),技術(shù)要求高,陽(yáng)性率低。如何快速準(zhǔn)確的診斷Hp感染并根據(jù)耐藥性選擇治療方案是及早有效治療Hp的關(guān)鍵。目的:通過(guò)胃黏膜基因芯片技術(shù)快速高通量檢測(cè)兒童幽門螺桿菌(Hp)感染及其耐藥性,并與Hp培養(yǎng)及藥敏結(jié)果相比較,評(píng)估胃黏膜基因芯片技術(shù)在兒童Hp感染的診斷及其耐藥性檢測(cè)中的臨床應(yīng)用價(jià)值。方法:對(duì)2016年1月至2016年5月因惡心、嘔吐、腹痛、黑便等消化系統(tǒng)癥狀在本院門診或住院的患兒,行電子胃鏡檢查,胃鏡下取3塊胃竇部黏膜,常規(guī)進(jìn)行病理組織學(xué)檢查、快速尿素酶試驗(yàn)(RUT)、Hp分離培養(yǎng)并藥敏試驗(yàn)。通過(guò)基因芯片技術(shù)快速檢測(cè)Hp感染及Hp耐藥基因情況。并對(duì)Hp培養(yǎng)和藥敏檢查結(jié)果與基因芯片耐藥基因檢查結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果:1.根據(jù)Hp現(xiàn)癥感染診斷依據(jù),分為Hp感染組(207例)和Hp非感染組(60例)。Hp培養(yǎng)陽(yáng)性169例(均為Hp感染組患兒),陰性98例(Hp感染組38例,非感染組60例),其診斷Hp感染的敏感度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值(PPV)、陰性預(yù)測(cè)值(NPV)和準(zhǔn)確性分別為 81.6%、100.0%、100.0%、61.2%和 85.8%。而 Hp基因芯片檢測(cè)陽(yáng)性208例(Hp感染組199例、非感染組9例),陰性59例(Hp感染組8例,非感染組51例),其診斷Hp感染的敏感度、特異度、PPV、NPV和準(zhǔn)確性分別為 96.1%、85.0%、95.7%、86.4%和 93.6%。2.169例Hp培養(yǎng)陽(yáng)性的藥敏結(jié)果顯示,甲硝唑、克拉霉素和左氧氟沙星的耐藥率依次為77.51%、33.72%、19.52%,全敏感株占11.83%;未檢測(cè)到四環(huán)素及阿莫西林耐藥菌株。而199例Hp感染組基因芯片檢測(cè)顯示,甲硝唑、克拉霉素、左氧氟沙星、阿莫西林的耐藥率分別為44.72%、63.31%、18.09%、12.56%,全敏感株占14.07%;未檢測(cè)到四環(huán)素耐藥菌株。3.基因芯片檢測(cè)Hp耐藥基因位點(diǎn)結(jié)果,克拉霉素突變以2143A/G為主,占92.9%,其中有1個(gè)發(fā)生雙突變;左氧氟沙星突變?yōu)?1位點(diǎn)(占58.3%)、87位點(diǎn)(占41.7%);阿莫西林突變以556ser位點(diǎn)為主,占84%。4.對(duì)Hp培養(yǎng)藥敏試驗(yàn)及耐藥基因檢測(cè)均陽(yáng)性的130例患兒進(jìn)行比較,結(jié)果顯示,對(duì)甲硝唑耐藥符合率為76.2%,甲硝唑敏感符合率為19.7%;對(duì)克拉霉素耐藥符合率為52.2%,克拉霉素敏感符合率為92.8%;對(duì)左氧氟沙星耐藥符合率為58.3%,左氧氟沙星敏感符合率為89.6%。5.對(duì)行基因芯片及測(cè)序檢測(cè)的22例患兒樣本進(jìn)行比較,對(duì)VacA-S1/S2/M1/M2,16S-RNA,23S-RNA及gyrA的檢測(cè)的一致率高于95%,對(duì)PBP1及rdxA的檢測(cè)的一致率高于80%。結(jié)論:1.胃黏膜Hp基因芯片技術(shù)能快速診斷Hp感染,其敏感性和準(zhǔn)確性高于Hp培養(yǎng);2.基因芯片技術(shù)通過(guò)檢測(cè)常見(jiàn)Hp耐藥基因位點(diǎn)而快速判斷耐藥性,與Hp培養(yǎng)藥敏結(jié)果相比,對(duì)四環(huán)素、克拉霉素、左氧氟沙星及阿莫西林敏感的符合率均高達(dá)90%左右,對(duì)甲硝唑敏感符合率較低;3.基因芯片技術(shù)及測(cè)序的一致性較好,基因芯片檢查能很好的反應(yīng)Hp耐藥的基因型。4.胃黏膜基因芯片技術(shù)可用于兒童Hp感染的快速診斷和耐藥性分析。
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R725.7

【參考文獻(xiàn)】

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