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蘋果MdCBL3基因的克隆與功能鑒定

發(fā)布時(shí)間:2020-08-17 12:38
【摘要】:從‘嘎拉’蘋果(Malus×domestica Borkh.)中克隆MdCBL3(序列號(hào):MDP0000155124),長(zhǎng)852 bp。系統(tǒng)進(jìn)化樹分析表明,蘋果MdCBL3與白梨親緣關(guān)系最近。利用PlantCare數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行啟動(dòng)子順式作用元件預(yù)測(cè)分析,MdCBL3啟動(dòng)子序列中存在干旱、低溫、光、生長(zhǎng)素、防御等響應(yīng)元件。構(gòu)建MdCBL3表達(dá)載體并利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法侵染蘋果愈傷組織和擬南芥。半定量RT-PCR證明MdCBL3在轉(zhuǎn)基因愈傷組織中過量表達(dá),在擬南芥中得到異源表達(dá)。表型分析發(fā)現(xiàn),在鹽脅迫中,與野生型相比,轉(zhuǎn)基因愈傷組織和擬南芥成齡苗生長(zhǎng)更好,鹽脅迫的抗性更強(qiáng)。在擬南芥中異源表達(dá)MdCBL3,能提高擬南芥對(duì)干旱和低溫的抗性。

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