【摘要】：目的本課題通過(guò)分析時(shí)間節(jié)律基因CLOCK、Bmal1、Per1、Per2、Per3、Cry1和細(xì)胞周期基因C-myc、CyclinD1、Wee1在白血病中的表達(dá)情況,研究該基因家族在白血病中的可能機(jī)制。通過(guò)分析節(jié)律基因Per2對(duì)耐藥的慢粒細(xì)胞株KCL22細(xì)胞的增殖、凋亡及分化的影響,進(jìn)一步探討Per2基因在白血病耐藥過(guò)程中可能發(fā)揮的作用,從而為白血病的治療尋找新靶點(diǎn)。方法用qRT-PCR定量檢測(cè)30例CML、50例AML患者骨髓標(biāo)本和30例正常人外周血中節(jié)律基因CLOCK、Bmal1、Per1、Per2、Per3、Cry1和細(xì)胞周期基因Cmyc、CyclinD1、Wee1的mRNA的表達(dá)水平。構(gòu)建節(jié)律基因Per2過(guò)表達(dá)慢病毒,轉(zhuǎn)染慢粒細(xì)胞株KCL22細(xì)胞,并篩選穩(wěn)定株,通過(guò)CCK-8檢測(cè)KCL22細(xì)胞的增殖,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)KCL22細(xì)胞凋亡、分化情況。結(jié)果與正常人相比,AML、CML患者中節(jié)律基因CLOCK與細(xì)胞周期基因Cmyc、CyclinD1表達(dá)升高,而節(jié)律基因Bmal1、Per1、Per2、Per3、Cry1與細(xì)胞周期基因Wee1表達(dá)降低(P0.05);AML、CML中CLOCK、Bmal1、Per1、Per2、Per3、Cry1、Wee1、C-myc、CyclinD1兩兩之間呈線性相關(guān)(P0.05)。其中AML中,Per1與Per2表達(dá)水平呈正相關(guān)(r=0.538,P0.01),Per1與Per3表達(dá)水平呈正相關(guān)(r=0.497,P0.01),Per2與Per3表達(dá)水平呈正相關(guān)(r=0.376,P0.05)。在CML中,Per1與Per2表達(dá)水平呈正相關(guān)(r=0.658,P0.01),Per1與Per3表達(dá)水平呈正相關(guān)(r=0.592,P0.01),Per2與Per3表達(dá)水平呈正相關(guān)(r=0.385,P0.05)。成功構(gòu)建了Per2過(guò)表達(dá)慢病毒,轉(zhuǎn)染慢粒細(xì)胞株KCL22細(xì)胞,并篩選到過(guò)表達(dá)Per2的KCL22/Per2穩(wěn)定株,將其作為實(shí)驗(yàn)組。與對(duì)照組(KCL22/untreated)和空載組(KCL22/empty)比較,Per2過(guò)表達(dá)使KCL22細(xì)胞增殖受抑,細(xì)胞周期G1期細(xì)胞增多[實(shí)驗(yàn)組(41.46±0.01)%,空載組(30.51±0.32)%,對(duì)照組(27.07±0.6)%,P0.05],對(duì)細(xì)胞凋亡無(wú)明顯影響[實(shí)驗(yàn)組(7.63±0.12)%,空載組(7.98±0.21)%,對(duì)照組(8.33±0.01)%,P0.05]。結(jié)論CLOCK、C-myc、CyclinD1可能作為促癌因子發(fā)揮作用,Bmal1、Per1、Per2、Per3、Cry1、Wee1可能作為抑癌因子發(fā)揮作用,并且這些節(jié)律基因之間相互作用,相互影響,共同調(diào)節(jié)人體內(nèi)的晝夜節(jié)律,進(jìn)而影響腫瘤細(xì)胞增殖。其中,Per1、Per2、Per3在白血病的發(fā)生、發(fā)展中占重要地位。過(guò)表達(dá)的Per2能夠抑制慢性粒細(xì)胞KCL22細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖,促使細(xì)胞周期阻滯于G1期,對(duì)細(xì)胞凋亡無(wú)明顯影響。
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R733.7
【圖文】：

熒光顯微鏡下觀察的KCL22細(xì)胞株

Western-blot檢測(cè)Per2蛋白表達(dá)水平

實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞 G1 期所占比例升高（如表 14 和圖9，10 所示），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），提示 Per2 表達(dá)上調(diào)后，能促使慢粒細(xì)胞 KCL22 細(xì)胞周期阻滯于 G1 期。

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 ;白血病基因研究[J];世界科學(xué)技術(shù);2002年04期

2 張鈺,張貴寅;白血病基因:大規(guī)模克隆及評(píng)估[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).遺傳學(xué)分冊(cè);2000年04期

3 杜楠;白血病基因治療的研究概況[J];癌癥;1997年03期

4 韓永勝;干細(xì)胞白血病基因研究進(jìn)展[J];中華血液學(xué)雜志;1997年07期

5 趙實(shí)誠(chéng);;白血病七問(wèn)[J];中國(guó)農(nóng)村醫(yī)學(xué);1987年09期

6 張利偉;王鴻利;陳國(guó)偉;;白血病的染色體異常[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(內(nèi)科學(xué)分冊(cè));1988年03期

7 袁芳;朱倩;;白血病基因轉(zhuǎn)錄因子綁定位點(diǎn)的分布特性研究[J];計(jì)算機(jī)與數(shù)字工程;2009年01期

8 肖娟,鄒萍,陸華中;核酶技術(shù)在白血病基因治療中作用的研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).輸血及血液學(xué)分冊(cè);2003年01期

9 孟月生;張茂宏;;白血病基因療法的進(jìn)展與展望[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(腫瘤學(xué)分冊(cè));1993年06期

10 王少元,鄭正津,林東紅,張臣青;急性髓細(xì)胞白血病CD_(34)抗原與干細(xì)胞白血病基因表達(dá)及其意義[J];中華內(nèi)科雜志;2001年10期

相關(guān)會(huì)議論文 前7條

1 伍艷鵬;賀湘玲;鄒惠;游亞蘭;;Zebularine對(duì)Jurkat、K562細(xì)胞p53表達(dá)的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十七次全國(guó)兒科學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編（下冊(cè)）[C];2012年

2 盧學(xué)春;朱宏麗;楊波;范輝;李素霞;劉洋;翟冰;;一種基于生物信息學(xué)技術(shù)快速篩選治療造血系惡性腫瘤靶向藥物新方法的建立和初步應(yīng)用[A];第12屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2009年

3 孫玲;孫慧;王一浩;馬鴻雁;王峰;樂(lè)曉萍;張欽憲;;c-myc反義寡核苷酸對(duì)HL-60細(xì)胞增殖及c-myc基因表達(dá)的抑制作用[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第八次全國(guó)血液學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

4 楊波;盧學(xué)春;于力;朱宏麗;范輝;姚善謙;樓方定;;靶向上調(diào)ID4基因表達(dá)藥物的生物信息學(xué)預(yù)測(cè)、分析和初步驗(yàn)證[A];第12屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2009年

5 胡紹燕;陳子興;岑建農(nóng);谷敏;趙曄;顧偉英;傅錚錚;;WT1增強(qiáng)子對(duì)啟動(dòng)子的促進(jìn)作用表現(xiàn)為細(xì)胞特異性而非組織特異性[A];2005年華東六省一市血液病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨浙江省血液病學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2005年

6 胡紹燕;陳子興;岑建農(nóng);谷敏;趙曄;顧偉英;傅錚錚;;WT1增強(qiáng)子對(duì)啟動(dòng)子的促進(jìn)作用表現(xiàn)為細(xì)胞特異性而非組織特異性[A];第10屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要匯編[C];2005年

7 張蕊;Liang Zhao;Tom Gonda;;慢病毒介導(dǎo)的多西環(huán)素可誘導(dǎo)式短發(fā)夾RNA抑制K562細(xì)胞系e-myb基因的表達(dá)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十四次全國(guó)兒科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前5條

1 記者 劉霞;首個(gè)雄性獨(dú)有抗白血病基因現(xiàn)身[N];科技日?qǐng)?bào);2018年

2 本報(bào)記者 陳倩兒;白血病基因，逮住了一個(gè)![N];中國(guó)青年報(bào);2012年

3 仇逸 張學(xué)全;白血病基因研究[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2002年

4 盧晶 余寧寧;浙江發(fā)現(xiàn)致白血病基因[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2005年

5 本報(bào)記者 衣春翔;“基因P圖軟件” 治療癌癥的新希望[N];黑龍江日?qǐng)?bào);2016年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前3條

1 白海;白血病抗腫瘤免疫的實(shí)驗(yàn)研究及免疫治療的臨床應(yīng)用[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2004年

2 宋艷秋;抗VEGF靶向治療白血病的研究[D];吉林大學(xué);2006年

3 肖劍文;31種融合基因在兒童急性白血病中的表達(dá)及臨床意義[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2017年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前3條

1 王娜;時(shí)間節(jié)律基因?qū)Π籽〉挠绊懠白饔脵C(jī)制研究[D];青島大學(xué);2018年

2 蘇磊;Bcl-2、Ki-67和VEGF在腎細(xì)胞癌中的表達(dá)及意義[D];延邊大學(xué);2004年

3 郝亞楠;基于L_2-Fused Lasso變量選擇方法的性質(zhì)及應(yīng)用研究[D];北京交通大學(xué);2014年

本文編號(hào)：2776464