【摘要】：研究背景及目的:阿爾茨海默病(Alzeimer’s disease AD)是老年人群中常見(jiàn)的漸進(jìn)性神經(jīng)退行性疾病,是癡呆最常見(jiàn)的類型。臨床表現(xiàn)為進(jìn)行性記憶障礙、視空間技能損害、執(zhí)行功能障礙、人格和行為改變等。隨著全球人口老齡化程度日益加深,AD的發(fā)病率顯著上升,對(duì)患者、照顧者家庭及社會(huì)產(chǎn)生很大的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。關(guān)于AD的研究已有數(shù)十年,但其發(fā)病機(jī)制迄今仍不清楚,尚未找到對(duì)AD早期診斷有特異性的標(biāo)志物。目前輔助診斷AD的方法有酶聯(lián)免疫吸附夾心法(ELISA)、PCR-RFLP技術(shù);輔助檢查包括腦電圖、腦核磁、單光子發(fā)射計(jì)算機(jī)斷層攝影術(shù)(SPECT)、正電子發(fā)射斷層攝影術(shù)(PET)、神經(jīng)心理學(xué)及量表檢查。但是,SPECT、PET檢測(cè)價(jià)錢昂貴,腰穿提檢腦脊液是一種有創(chuàng)檢查,還不能被大部分患者理解接受,相對(duì)于腦脊液,血液標(biāo)本的采集更加簡(jiǎn)易、方便。所以積極尋找一種能夠在外周血中早期診斷AD的檢測(cè)方法至關(guān)重要。線粒體對(duì)神經(jīng)元的生存有著重要作用,阿爾茨海默病發(fā)病早期的發(fā)病機(jī)制可能與線粒體功能障礙相關(guān)。泛醌細(xì)胞色素c還原酶1基因(Ubiquinol-cytochrome c reductase core protein 1,UQCRC1),是編碼線粒體呼吸作用復(fù)合體Ⅲ(呼吸鏈的重要組成部分)的一個(gè)亞基。UQCRC1基因甲基化可能影響線粒體呼吸鏈的功能,進(jìn)一步增加AD發(fā)病的風(fēng)險(xiǎn)。目前外周血基因甲基化檢測(cè)技術(shù)已經(jīng)成熟,本文旨在探討外周血中UQCRC1基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化與AD發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的相關(guān)性,以期尋找到可以早期診斷AD的檢測(cè)方法,為AD提供一個(gè)新的治療靶點(diǎn)。方法:AD組選取自2015年9月至2016年12月吉林大學(xué)白求恩醫(yī)學(xué)院中日聯(lián)誼醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科記憶障礙門診及住院部收治的阿爾茨海默病患者,同時(shí)選取中日聯(lián)誼醫(yī)院體檢中心與AD組年齡、教育程度、血壓、身體基本情況等基線資料相匹配的非AD患者為對(duì)照組。研究對(duì)象共105例,其中AD患者50例,包括男性26例,女性24例;對(duì)照組55例,包括男性26例,女性29例。利用甲基化特異性PCR(MSP)檢測(cè)AD患者及正常對(duì)照組外周血中UQCRC1基因甲基化狀態(tài),并將UQCRC1基因甲基化狀態(tài)與患者性別、年齡進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果:50例AD組中有32例發(fā)生甲基化,甲基化率為64%,55例對(duì)照組中有14例發(fā)生甲基化,甲基化率為25.45%。對(duì)AD組與對(duì)照組甲基化率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,c~2=15.807,P0.05,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。按性別分層中,無(wú)論是AD組中還是對(duì)照組中,UQCRC1基因甲基化與性別無(wú)關(guān),P0.05;按年齡分層中,AD組UQCRC1基因甲基化與年齡有關(guān),P0.05,差異顯著,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:1.UQCRC1基因甲基化與阿爾茨海默病發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)。2.檢測(cè)UQCRC1基因甲基化對(duì)阿爾茨海默病的早期診斷可能有一定的臨床意義。
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R749.16
【圖文】：

圖 3.1 MSP 法檢測(cè) UQCRC1 基因甲基化原理圖imerI:UQCRC1 基因甲基化引物對(duì)；PrimerII：UQCRC1 基因非甲基化引物如圖所示，首先用重亞硫酸氫鈉處理已提取的 DNA 樣本，所有發(fā)生甲基化（Cytosine,C）不變，未發(fā)生甲基化的胞嘧啶(Cytosine,C)則都被轉(zhuǎn)化為racil,U)；然后根據(jù)甲基化和非甲基化序列設(shè)計(jì)相應(yīng)的上下游引物，并且增；最后進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)，應(yīng)用全自動(dòng)凝膠成像系統(tǒng)觀察,分析物及非甲基化引物相對(duì)應(yīng)的 PCR 產(chǎn)物的電泳條帶，確定樣本 DNA 序列的甲。 實(shí)驗(yàn)步驟：1 人白細(xì)胞中提取 DNA凍-80℃白細(xì)胞樣品（白細(xì)胞/紅細(xì)胞混合物），混勻，用移液器吸取其

由表 4.1.1、表 4.1.2 可見(jiàn)：AD 組與對(duì)照組一般資料包括性別、年齡、高血壓、糖尿病病史、飲酒、高密度脂蛋白、吸煙史、同型半胱氨酸、纖維蛋白原、低密度脂蛋白、谷草轉(zhuǎn)氨酶、載脂蛋白 A1、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、肌酐、總膽固醇、空腹血糖、甘油三酯、葉酸、載脂蛋白 B 等比較，未發(fā)現(xiàn)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。（P＞0.05）4.2 MSP 法檢測(cè)基因甲基化凝膠電泳圖：圖 4.2.1 AD 組與對(duì)照組凝膠電泳圖高密度脂蛋白(mmol/l) 1.69±0.73 1.97±0.77 0.063同型半胱氨酸（mmol/l） 16.35±5.57 15.89±6.12 0.692葉酸（nmol/l） 20.46±9.07 23.72±9.64 0.078載脂蛋白 A1(g/l) 1.58±0.41 1.62±0.69 0.748載脂蛋白 B (g/l) 1.21±0.49 1.05±0.47 0.086

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

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本文編號(hào)：2761276