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基于比較轉(zhuǎn)錄組的水稻苗期耐冷相關(guān)基因BGIOSGA032296 TALEN基因組編輯技術(shù)構(gòu)建

發(fā)布時(shí)間:2020-07-10 17:50
【摘要】:為了挖掘水稻苗期耐冷基因,基于比較轉(zhuǎn)錄組分析,參考公共數(shù)據(jù)庫(kù)中的基因序列信息設(shè)計(jì)靶位點(diǎn),對(duì)冷脅迫條件下東鄉(xiāng)野生稻苗期下調(diào)表達(dá)耐冷相關(guān)基因BGIOSGA032296進(jìn)行TALEN基因組編輯技術(shù)構(gòu)建,克隆酶切鑒定和序列比對(duì)結(jié)果表明,BGIOSGA032296 TALEN敲除植物表達(dá)載體1301TALEN-032296構(gòu)建成功,利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將TALEN敲除植物表達(dá)載體1301TALEN-032296轉(zhuǎn)入水稻受體品種TP309,獲得了17株轉(zhuǎn)基因水稻植株,經(jīng)潮霉素抗性標(biāo)記基因和Fok I基因特異引物PCR檢測(cè),表明獲得的轉(zhuǎn)基因植株皆為攜帶1301TALEN-032296的陽性植株。該研究為水稻BGIOSGA032296基因后續(xù)耐冷表型鑒定奠定了前期基礎(chǔ)。

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