【摘要】：目的:建立ApoM基因敲除的小鼠和細(xì)胞模型,觀察ApoM基因敲除后肝臟組織和肝細(xì)胞的病理形態(tài)學(xué)變化,進(jìn)而探究引起這些變化的可能分子機(jī)制方法:用CRISPR/Cas9方法敲除ApoM基因,構(gòu)建ApoM基因全身性敲除小鼠模型和單克隆肝細(xì)胞株模型。采用透射電鏡、HE染色、油紅O染色、DAPI染色、FILIPIN總游離膽固醇熒光染色、血生化指標(biāo)檢測和抗體芯片等技術(shù)和方法來觀察ApoM基因缺失后肝臟組織的病理學(xué)改變和肝細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化,以及相關(guān)血脂生化指標(biāo)的變化情況;同時采用RT-PCR和Western blot方法在RNA和蛋白水平分別檢測與脂代謝、炎癥和凋亡密切相關(guān)的以及調(diào)控通路上的關(guān)鍵蛋白的表達(dá)變化,進(jìn)而從分子水平探討ApoM基因缺失引起肝組織和肝細(xì)胞病理形態(tài)學(xué)變化的可能分子機(jī)制。結(jié)果:1.成功構(gòu)建了ApoM基因全身性敲除小鼠模型和ApoM基因敲除的單克隆肝細(xì)胞模型。2.ApoM~(-/-)小鼠肝組織存在輕度非酒精性脂肪性病變,電鏡顯示肝臟貯脂細(xì)胞增大X椩睬野橛寫罅看笮〔壞鵲鬧

本文編號：2724380