【摘要】：牡丹(Paeonia suffruticosa Andr.)屬芍藥科芍藥屬灌木,是近些年新興的木本油料作物,因其籽油中含有大量不飽和脂肪酸而倍受關(guān)注。目前,關(guān)于牡丹籽油的研究主要集中于籽油的提取、脂肪酸成分的分析及脂肪酸的生物合成等方面,而關(guān)于脂肪酸的儲(chǔ)存報(bào)道較少。油體是植物儲(chǔ)存油脂的細(xì)胞器,它的正常發(fā)育是脂肪酸積累的前提。為了明確牡丹種子油體發(fā)育特點(diǎn)及其油體膜蛋白基因(OLFs)的表達(dá)特性,我們以油用牡丹'鳳丹'(Paeoniaostii)為材料,一方面從油體入手,觀察油體形態(tài)、分析理化特性、分析與脂肪酸積累的相關(guān)性、鑒定油體蛋白種類;另一方面,從油體蛋白入手,克隆OLEs序列、檢測表達(dá)模式、觀察亞細(xì)胞定位、構(gòu)建超表達(dá)載體并對煙草進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化,主要研究結(jié)果如下:(1)牡丹種子出油率在種子成熟過程中呈先升高后降低的趨勢,在花后100天時(shí)出油率最高,達(dá)到27%;牡丹籽油主要包含5種脂肪酸:棕櫚酸、硬脂酸、油酸、亞油酸、α-亞麻酸,其中含量最高的是α-亞麻酸,最低的是硬脂酸。牡丹籽油的脂肪酸成分的積累趨勢與種子出油率類似,各脂肪酸積累的峰值都出現(xiàn)于花后100天。(2)通過石蠟切片,發(fā)現(xiàn)牡丹種子油體的積累呈先增加后減少的趨勢,油體從花后80天開始進(jìn)入迅速積累階段并于花后100天時(shí)達(dá)到最大積累量。通過超薄切片,發(fā)現(xiàn)牡丹種子油體數(shù)量在種子發(fā)育過程中不斷增加,油體在細(xì)胞中變得越來越充實(shí),但相對于其他時(shí)期,花后100天時(shí)出現(xiàn)了許多更小的油體。(3)牡丹種子油體粒度隨著種子發(fā)育時(shí)期的變化呈現(xiàn)先減小后增大的趨勢,在花后100天時(shí)其粒度達(dá)到最小值,而后略有增大。牡丹種子的出油率、脂肪酸含量與油體粒度均呈顯著負(fù)相關(guān),其中種子出油率與油體粒度的相關(guān)性達(dá)到-0.98。在種子成熟過程中,牡丹種子油體表面蛋白質(zhì)所帶的電荷與粒度趨勢一致,同樣在花后100天時(shí)Zeta電位達(dá)到最低,之后略有增加。通過對牡丹種子油體的穩(wěn)定性研究,我們發(fā)現(xiàn)油體在NaCl溶液中的穩(wěn)定性隨著溶液濃度的升高而變差;通過對不同pH值下油體的形態(tài)進(jìn)行觀察,我們發(fā)現(xiàn)當(dāng)pH值為5.0時(shí),油體的結(jié)構(gòu)被嚴(yán)重破壞,pH為9.0時(shí)的油體相對于中性條件下的油體顯得更加穩(wěn)定,而當(dāng)pH值達(dá)到11.0時(shí),油體在乳液中的運(yùn)動(dòng)變得非常劇烈,并出現(xiàn)許多超大油體。通過對不同溫度下油體的形態(tài)觀察發(fā)現(xiàn),隨著溫度的升高,油體的結(jié)構(gòu)并沒有發(fā)生明顯的變化。(4)牡丹種子發(fā)育前100天的油體蛋白相對集中,在17、22、37和55 kD處分別有4條明顯的條帶,雜帶較少,但花后120天時(shí)油體蛋白組成發(fā)生了一定的變化,在37和55kD處均出現(xiàn)了其他條帶。進(jìn)一步通過MALDI-TOF-MS分析發(fā)現(xiàn),牡丹種子前三個(gè)時(shí)期的油體蛋白主要以油體膜蛋白類為主,未鑒定出其他家族蛋白,但在花后120天時(shí),發(fā)
【學(xué)位授予單位】：揚(yáng)州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：S565.9
【圖文】：

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本文編號(hào)：2723317