【摘要】：從油桃‘中油四號’中克隆了3個CYP707A家族成員(PpCYP707A1、PpCYP707A2和PpCYP707A3)的全長,測序發(fā)現(xiàn)其CDS序列與桃基因組公布的序列一致。同源比對發(fā)現(xiàn)CYP707A家族在不同物種間具有高度的序列保守性,并且都含有CYP707A家族基因比較保守的血紅素鐵配位體半胱氨酸殘基;系統(tǒng)進(jìn)化樹分析表明,PpCYP707A1與馬鈴薯CYP707A1、花生CYP707A1、菜豆CYP707A1、菜豆CYP707A2的親緣關(guān)系較近,桃CYP707A2與擬南芥CYP707A2的親緣關(guān)系較近,桃CYP707A3與擬南芥CYP707A4、花生CYP707A2的親緣關(guān)系較近。熒光定量PCR分析表明,PpCYP707A1在莖中的表達(dá)量較高,PpCYP707A2在葉中的表達(dá)量較高,PpCYP707A3在花中的表達(dá)量較高,并且桃CYP707A家族一般在成熟組織中的表達(dá)水平要高于幼嫩組織。推測桃CYP707A家族成員交叉調(diào)控花芽休眠進(jìn)程,并且發(fā)現(xiàn)花芽中的PpCYP707A2可以被ABA和GA誘導(dǎo)。原核誘導(dǎo)并純化PpCYP707A1和PpCYP707A2蛋白可以為后續(xù)蛋白的功能鑒定奠定基礎(chǔ)。
【圖文】：

自然條件下花芽受制于環(huán)境條件還不能萌發(fā),但是外界環(huán)境溫度逐漸升高,因此這段時間為生態(tài)休眠期。由于低溫下可以誘導(dǎo)ABA合成,ABA可以誘導(dǎo)CYP707A基因表達(dá),因此為了更好的說明CY-P707A家族特異性參與花芽休眠的進(jìn)程,我們以這段時間一年生樹皮作為參照來研究CYP707A家族參與花芽休眠進(jìn)程的調(diào)控。熒光定量顯示(圖6),PpCYP707A1于9月21日在花芽中的表達(dá)水平達(dá)到最高值,然后呈現(xiàn)逐漸降低的趨勢;在一年生枝韌皮部中,其表達(dá)水平先降低、再升高、再降低,與在花芽中不一致,說明PpCYP707A1主要參與自然休眠前期的調(diào)控,但是圖1桃CYP707A家族基因編碼區(qū)全長的PCR擴(kuò)增Fig.1AgarosegelelectrophoresisofpeachCYP707AgenefamilymembersA:PpCYP707A1全長擴(kuò)增產(chǎn)物;B:PpCYP707A2全長擴(kuò)增產(chǎn)物;C:PpCYP707A3全長擴(kuò)增產(chǎn)物。

664植物生理學(xué)報圖3桃CYP707A基因家族蛋白與其他物種CYP707A基因家族蛋白的系統(tǒng)進(jìn)化樹分析Fig.3PhylogenetictreeofpeachCYP707AgenefamilyandCYP707Agenefamilyproteinsofother圖5油桃‘中油四號’花芽的休眠進(jìn)程以及溫度變化Fig.5Dormancystatusof‘Zhongyousihao’floralbudsandthechangesoftemperature圖4桃CYP707A基因家族成員在不同組織的表達(dá)分析Fig.4ExpressionanalysisofCYP707Agenefamilymembersindifferenttissues

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