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γ輻射對(duì)雌果蠅生理生化特性及輻射損傷修復(fù)基因Gadd45的影響

發(fā)布時(shí)間:2020-05-28 11:42
【摘要】:目的:本研究旨在探索不同劑量γ輻照對(duì)W1118、UAS-EGFP和Actin-Gal4三品系雌果蠅造成的生存、運(yùn)動(dòng)、生殖等影響,以及不同劑量γ輻射對(duì)雌果蠅產(chǎn)生的輻射損傷與氧化效應(yīng);從而為將雌果蠅開發(fā)成監(jiān)測(cè)核事故泄漏劑量理想的輻射生物劑量計(jì)以及將耐輻射奇球菌抗輻射基因?qū)牍夡w內(nèi)開展輻射防護(hù)研究提供一定的理論依據(jù)。方法:1、采用不同劑量137Cs-γ射線處理W1118、UAS-EGFP和Actin-Gal4三品系雌果蠅,測(cè)定其生存、運(yùn)動(dòng)和生殖蛹化能力指標(biāo),確定生存生殖劑量閾值。2、ELISA微板法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)活性氧含量、總超氧化物歧化酶活力和過氧化氫酶活力以及丙二醛含量和還原型谷胱甘肽含量,對(duì)果蠅成蟲的輻射氧化損傷進(jìn)行評(píng)價(jià)。3、輻照后提取果蠅基因組,經(jīng)PCR擴(kuò)增及電泳純化后進(jìn)行測(cè)序,Blast比對(duì)分析W1118、UAS-EGFP、Actin-Gal4三品系雌果蠅輻照前后Gadd45基因結(jié)構(gòu)和表達(dá)的改變。結(jié)果:1、W1118、UAS-EGFP、Actin-Gal4三品系雌果蠅的半數(shù)致死劑量分別為1513Gy、1643Gy、1809Gy,95%致死劑量分別為1767Gy、2152Gy、2320Gy,完全死亡劑量分別為2200Gy、2200Gy、2600Gy,生殖閾值分別為240Gy、160Gy、200Gy。三品系3日齡雌果蠅成蟲的生存率、攀爬高度分?jǐn)?shù)、產(chǎn)卵量、蛹化高度與γ輻照劑量呈負(fù)相關(guān)。2、160Gy輻照組和1550Gy輻照組三品系雌果蠅體內(nèi)SOD和CAT活力以及GSH含量均降低,ROS和MDA含量升高。3、1550Gy輻射處理組Gadd45基因核苷酸序列與未輻照的果蠅Gadd45基因核苷酸序列的相似性為99%,序列中的缺失率為1%。輻射組于第262、337位堿基由T變?yōu)锳/N。輻射組核苷酸序列于第276、433位出現(xiàn)A、T核苷酸的非特異性缺失。結(jié)論:1、137Cs-γ輻射可能通過其誘發(fā)的高水平自由基氧化損傷從而降低或終止W1118、UAS-EGFP、Actin-Gal4三品系雌果蠅成蟲的生存、運(yùn)動(dòng)和生殖蛹化能力。2、137Cs-γ輻照可致W1118、UAS-EGFP、Actin-Gal4三品系雌果蠅DNA損傷修復(fù)基因Gadd45堿基非特異性缺失,進(jìn)而造成Gadd45基因結(jié)構(gòu)損傷。
【圖文】:

果蠅,運(yùn)動(dòng)裝置,γ輻射


圖 2.2.1 果蠅攀爬運(yùn)動(dòng)裝置圖.3 γ輻射后生殖能力測(cè)定不同品系(W1118,UAS-EGFP,Actin-Gal4)三日齡雌果蠅每個(gè)輻照劑量設(shè)置,每個(gè)重復(fù) 10 只果蠅,經(jīng)不同劑量(0Gy,40Gy,80Gy,,120Gy,160Gy,20Gy)137Cs-γ輻照處理后,與正常雄果蠅交配,產(chǎn)卵后倒出親本果蠅,從第一開始連續(xù)記錄 30 天內(nèi)羽化的子代果蠅數(shù)。.4 γ輻射后蛹化高度測(cè)定

示意圖,果蠅,高度測(cè)量,運(yùn)動(dòng)裝


2果蠅高度測(cè)量示意圖
【學(xué)位授予單位】:南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號(hào)】:Q691

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2685190


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