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轉(zhuǎn)基因水稻G6H1和轉(zhuǎn)基因玉米C00303.5基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研制

發(fā)布時間:2020-05-22 02:57
【摘要】:轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品成分檢測是轉(zhuǎn)基因生物安全管理和標(biāo)識的重要內(nèi)容,而轉(zhuǎn)基因生物標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是獲得準(zhǔn)確,可靠,具有可比性檢測結(jié)果的保證。本文重點針對基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制備開展研究,分別制備了轉(zhuǎn)基因水稻G6H1和轉(zhuǎn)基因玉米C00303.5系列基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),并對制備的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的均勻性,穩(wěn)定性進行分析,并采用微滴數(shù)字PCR技術(shù)和實驗室聯(lián)合定值方法測定了標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)特征量值。本研究第一部分通過將轉(zhuǎn)基因水稻G6H1和其受體材料秀水110候選物的純度和純合度篩選,然后分別冷凍研磨成粉末,按質(zhì)量分數(shù)稱量配制得到均勻的轉(zhuǎn)基因水稻G6H1基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)G6H1_a,G6H1_b,G6H1_c。采用實時熒光定量PCR技術(shù)分別測試了基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的瓶內(nèi)和瓶間均勻性,分析結(jié)果表明三種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的瓶內(nèi)和瓶間均具有良好的均勻性。穩(wěn)定性考察表明轉(zhuǎn)基因水稻G6H1基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)可在常溫(26℃)條件下運輸1個月,4℃或-20℃條件下穩(wěn)定儲存24個月。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)采用重量法配比的質(zhì)量分數(shù)作為標(biāo)準(zhǔn)值,并評定其不確定度,分別賦值(49.825±0.343)g/kg,(9.967±0.985)g/kg,(4.986±1.259)g/kg。使用微滴數(shù)字PCR(ddPCR)對三種基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的特征量值和不確定度進行了分析,拷貝數(shù)比值的賦值為(5.01±0.07)%,(1.06±0.16)%,(0.53±0.10)%。G6H1基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)分裝每瓶1 g,使用時最小取樣量為100 mg。以上數(shù)據(jù)顯示轉(zhuǎn)基因水稻G6H1基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)可用于轉(zhuǎn)基因水稻G6H1的定性和定量檢測,以及轉(zhuǎn)基因水稻G6H1特異性檢測方法的評價和實驗室質(zhì)量控制等領(lǐng)域。本研究第二部分主要制備了轉(zhuǎn)基因玉米C00303.5的基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),按照預(yù)期量值5.00%,1.00%和0.50%的比例配比混合制備了三種基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)C00303.5_a(C35_(a)),C00303.5_b(C35_(b)),C00303.5_c(C35_(c))。制備的C00303.5基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)具備良好的瓶內(nèi)和瓶間均勻性,可在-20℃、4℃、24℃的運輸條件下保持8周穩(wěn)定,最小取樣量為100 mg。以上結(jié)果表明轉(zhuǎn)基因玉米C00303.5基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)可進行下一步長期穩(wěn)定性分析和特征量值測定。轉(zhuǎn)基因生物標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制與應(yīng)用是國內(nèi)外農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全管理體系建設(shè)的迫切需求,同時也是轉(zhuǎn)基因生物檢測的重要技術(shù)支持。本研究中制備的基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)將為我國轉(zhuǎn)基因生物安全管理提供支撐。
【圖文】:

種植情況,公頃,全球,巴拉圭


圖 1-1 1996-2016 年全球范圍內(nèi)轉(zhuǎn)基因作物種植情況[3]igure 1-1 Global area of transgenic crops during 1996-2016因作物種植面積超過 100 萬公頃的國家有 11 個,,占據(jù)全球 39%的份額;巴西以 4910 萬公頃緊 年增長 11%,成為全球轉(zhuǎn)基因作物種植面積增長種植面積同比 2015 年的 370 萬公頃減少到 280 萬 10 的國家還包括阿根廷,加拿大,印度,巴拉圭

主要國家,全球,公頃


圖 1-1 1996-2016 年全球范圍內(nèi)轉(zhuǎn)基因作物種植情況[3]Figure 1-1 Global area of transgenic crops during 1996-2016[3]2016 年轉(zhuǎn)基因作物種植面積超過 100 萬公頃的國家有 11 個,,美國以 7297萬公頃高居榜首,占據(jù)全球 39%的份額;巴西以 4910 萬公頃緊隨其后,占比27%,相比 2015 年增長 11%,成為全球轉(zhuǎn)基因作物種植面積增長最多的國家。我國轉(zhuǎn)基因作物種植面積同比 2015 年的 370 萬公頃減少到 280 萬,位居第 8,種植面積排名前 10 的國家還包括阿根廷,加拿大,印度,巴拉圭,巴基斯坦,南非,烏拉圭。
【學(xué)位授予單位】:上海交通大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號】:S513;S511

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10 曹步f

本文編號:2675334


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