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花生過氧化值、酸值和芥酸含量近紅外分析模型構(gòu)建及FAE1基因克隆

發(fā)布時(shí)間:2020-04-13 15:28
【摘要】:花生作為全世界廣泛栽植的油料及經(jīng)濟(jì)作物,不僅具有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值,還對(duì)人體有很多有益作用。提高花生及其成品的品質(zhì)、延長(zhǎng)貨架期是花生產(chǎn)業(yè)技術(shù)研究的重要課題。降低不利健康的芥酸、過氧化物等物質(zhì)的含量具有重要意義。鑒于花生油是我國(guó)居民的主要食用油,檢測(cè)花生油過氧化值和酸值攸關(guān)人體健康,故本研究通過近紅外掃描,構(gòu)建了花生油過氧化值和酸值近紅外模型;同時(shí)本研究利用近紅外光譜分析儀對(duì)自然風(fēng)干花生種子進(jìn)行光譜掃描,而后對(duì)花生種子芥酸含量進(jìn)行化學(xué)法測(cè)定,構(gòu)建了能夠預(yù)測(cè)花生自然風(fēng)干種子芥酸含量近紅外模型;并成功克隆到栽培種花生兩個(gè)亞基因組的FAE1基因。本研究主要結(jié)果如下:(1)花生油過氧化值和酸值近紅外分析模型構(gòu)建。采集32份花生油近紅外光譜,并按標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行過氧化值和酸值測(cè)定。經(jīng)優(yōu)化,過氧化值的最佳光譜預(yù)處理方法為“一階導(dǎo)數(shù)+矢量歸一化”,過氧化值譜區(qū)范圍為7506~6094.3 cm-1,維數(shù)為6,模型的決定系數(shù)(R2)為91.93,根均方差(RMSECV)為1.23;酸值最佳光譜預(yù)處理方法為“矢量歸一化”,酸值譜區(qū)范圍為7506~6094.3 cm-1,維數(shù)為7,模型的決定系數(shù)(R2)為93.88,RMSECV為0.074。為快速測(cè)定花生油過氧化值和酸值,保證食用油質(zhì)量安全,以及通過評(píng)價(jià)各種措施的效果進(jìn)而延長(zhǎng)貨架期奠定了基礎(chǔ)。(2)花生自然風(fēng)干種子芥酸含量近紅外分析模型構(gòu)建。采集67份自然風(fēng)干花生種子近紅外光譜,并進(jìn)行芥酸含量色譜測(cè)定。采用交叉檢驗(yàn),構(gòu)建了多粒自然風(fēng)干花生種子樣品芥酸含量的近紅外定量分析模型。經(jīng)優(yōu)化,最佳光譜預(yù)處理方法為“消除常量偏移法”,芥酸含量譜區(qū)范圍為11980.2~4242.8 cm-1(厘米波數(shù)),維數(shù)為10,模型的決定系數(shù)(R2)為80.08,根均方差(RMSECV)為0.0238。構(gòu)建的模型為花生脂肪酸遺傳改良提供了快速的選擇手段,可用于花生油原料的質(zhì)量控制。(3)栽培種花生FAE1基因的克隆和序列分析。查找獲取二倍體野生種A.duranensis和A.ipaensis的FAE1編碼區(qū)序列,經(jīng)引物設(shè)計(jì)、PCR擴(kuò)增及克隆測(cè)序,從栽培種花生的兩個(gè)亞基因組中分別克隆到2個(gè)FAE1基因,分別命名為FAE1-A和FAE1-B。FAE1只有一個(gè)開放閱讀框,無內(nèi)含子,完整編碼區(qū)長(zhǎng)1536 bp,編碼511個(gè)氨基酸。利用相關(guān)軟件或在線工具進(jìn)行了FAE1同源序列查找、氨基酸序列分析、蛋白質(zhì)功能預(yù)測(cè)和系統(tǒng)發(fā)育分析。為花生低芥酸分子育種提供了便利。
【圖文】:

花生油,石英比色皿


石英比色皿(751G,宜興市儀器儀表總廠),電熱恒溫水槽(DK-8D,上海公司),傅立葉變換近紅外光譜儀(Matrix 型,德國(guó)布魯克光譜儀器公司)方法采集立葉變換近紅外光譜儀上掃描樣品,,采集光譜數(shù)據(jù)。該儀器的掃描譜區(qū)范圍為m-1,分辨率為 8 cm-1,共掃描 64 次。檢測(cè)樣品前須提前開機(jī)預(yù)熱 30 min,以在相近溫度下測(cè)定。采集光譜樣品為新配制花生油樣,每份材料約 4 mL,重減少因花生油均勻性不一致等影響光譜采集。光譜采集完成后,計(jì)算機(jī)自動(dòng)將成吸光度值進(jìn)行保存。行光譜采集時(shí),將勾兌的花生油樣品倒入石英比色皿中(倒?jié)M保證無氣泡),石英比色皿及其蓋子密封好,用濾鏡紙將石英比色皿外面擦拭干凈,放在多粒,光學(xué)設(shè)置為單粒掃描模式(使其掃描時(shí)不發(fā)生旋轉(zhuǎn)),在儀器上面蓋上紙板。一次掃描完成后,旋轉(zhuǎn)石英比色皿,一個(gè)樣品掃描 3 次,如圖 2.1 所示。

光譜圖,花生油,光譜圖,樣品


圖 2.2 花生油樣品的近紅外掃描光譜圖Fig.2.2 NIR spectra of peanut oil samples2.3.2 花生油過氧化值和酸值的化學(xué)分析采用滴定法測(cè)定 32 份花生油樣品過氧化值和酸值,如表 2.2。樣品化學(xué)值相關(guān)2.3,過氧化值均值為 13.9450 mmol/Kg,最大、最小值分別為 24.5070 mmol/Kgmmol/Kg;酸值均值為 0.9405 mg/g,最大、最小值分別為 1.3837 mg/g、0.4550 mg建;ㄉ瓦^氧化值和酸值變幅較大,可用于近紅外光譜模型構(gòu)建。
【學(xué)位授予單位】:河南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號(hào)】:S565.2

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本文編號(hào):2626142

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