【摘要】：對(duì)貴州省晴隆縣某種牛場(chǎng)暴發(fā)的疑似牛乳頭狀腫瘤病進(jìn)行診斷,采用流行病學(xué)調(diào)查、臨床癥狀觀察、病理切片觀察、PCR檢測(cè)和分子分型。結(jié)果顯示,該種牛場(chǎng)牛乳頭狀瘤病發(fā)病率為35%(7/20)。瘤體多呈結(jié)節(jié)狀及菜花狀,顏色多呈灰白色。病理切片顯示,瘤體呈現(xiàn)角質(zhì)化過(guò)度和細(xì)胞空泡化現(xiàn)象。遺傳進(jìn)化樹分析顯示,貴州省晴隆縣暴發(fā)的牛乳頭狀腫瘤病是由BPV2型牛乳頭瘤病毒所引起。本研究為貴州地區(qū)牛乳頭狀瘤病的科學(xué)防控提供了一定的理論依據(jù)。
【圖文】：

諉娌�、眼睛�?圍、頸部等位置。嚴(yán)重病例在面部、頸部均能見(jiàn)到大面積乳頭狀瘤狀物，瘤體間單獨(dú)或者連成一片生長(zhǎng)。瘤體多呈菜花狀，顏色呈灰白色，表面光滑或粗糙、質(zhì)地堅(jiān)硬。3.2病理組織學(xué)切片結(jié)果對(duì)皮膚腫瘤樣物病理組織切片，經(jīng)H.E.染色鏡檢顯示，表皮與真皮增生;腫瘤細(xì)胞呈梭形或星型，核呈卵圓形;表皮細(xì)胞呈現(xiàn)過(guò)度角質(zhì)化和部分顆粒細(xì)胞空泡化的現(xiàn)象，結(jié)果見(jiàn)中插彩版圖1A和1B。3.3PCＲ檢測(cè)結(jié)果牛乳頭狀瘤疑似病料中，PCＲ檢測(cè)陽(yáng)性樣品，經(jīng)1．2%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)，所擴(kuò)增的目的PCＲ產(chǎn)物的大小約1494bp，結(jié)果見(jiàn)圖2。圖2牛乳頭狀瘤疑似病料PCＲ產(chǎn)物電泳檢測(cè)結(jié)果M:DL-2000DNAMarker;1～3:擴(kuò)增結(jié)果;—:陰性對(duì)照3.4BPVL1基因核苷酸序列同源性分析將本實(shí)驗(yàn)克隆的L1基因(命名為BPV-QL1)與GenBank上公布的16株BPV各型的L1基因的對(duì)應(yīng)序列進(jìn)行比對(duì)分析，結(jié)果顯示，貴州省晴隆流行株與BPV2、BPV2-SW01和BPV2-AKS01參考株的核苷酸同源性分別為99．1%、99．9%、99．4%，同時(shí)與BPV13參考株、BPV1參考株的核苷酸同源性也達(dá)88．8%、84．4%，結(jié)果見(jiàn)圖3。3.5BPVL1基因遺傳進(jìn)化樹分析L1基因是BPV基因組中比較保守的衣殼蛋白，通常用于各型病毒之間的基因分型。將各型BPV的L1基因序列進(jìn)行對(duì)比分析，并采用NJ法(Neighbor-JingMethod)構(gòu)建BPV系統(tǒng)進(jìn)化樹(圖4)。經(jīng)DNAStar分析表明，BPV-GZ01與BPV2處于同一遺傳進(jìn)化分支，所以BPV-QL1屬于2型牛乳頭瘤病毒，且與BPV-1、BPV-13親緣關(guān)系比較接近。4討論牛乳頭狀瘤病毒(BPV)屬于乳多空病毒(pa-povavirus)科乳頭狀病毒屬［10］的一種雙鏈DNA病毒，已報(bào)道有14個(gè)基因型，還有很多假定基因型。在本研究中，根據(jù)牛的臨床癥狀［8－9］查閱相關(guān)資料，針對(duì)BPVL1保守序列設(shè)計(jì)特異性引物進(jìn)行PC?

ChineseJournalofVeterinaryMedicine中國(guó)獸醫(yī)雜志2017年(第53卷)第5期圖3BPV－QL1株與BPV不同基因型的L1基因核苷酸序列比較BPV1(X02346)、BPV2(M20219)、BPV2－SW01(KC878306)、BPV2－AKS01(KM455051)、BPV3(AF486184)、BPV4(X05817)、BPV5(AF457465)、BPV6(AJ620208)、BPV7(DQ217793)、BPV8(DQ098913)、BPV9(AB331650)、BPV10(AB331651)、BPV11(AB543507)、BPV12(JF834523)、BPV13(JQ798171)、BPV14(KP276343)圖4L1基因序列構(gòu)建的不同基因型BPV系統(tǒng)進(jìn)化樹發(fā)病牛和健康牛群居是導(dǎo)致牛之間互相感染牛乳頭狀瘤病毒的主要原因。該病一般呈良性經(jīng)過(guò)，死亡率不高，但康復(fù)時(shí)間比較長(zhǎng)，可用手術(shù)方法摘除瘤體，術(shù)后及時(shí)護(hù)理，并加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，，及時(shí)隔離病牛等措施進(jìn)行預(yù)防和治療。近兩年貴州省大力發(fā)展養(yǎng)牛業(yè)，從國(guó)外和省外引進(jìn)了優(yōu)質(zhì)的種牛，同時(shí)許多外來(lái)疾病也隨之帶入，從而威脅著貴州省養(yǎng)牛業(yè)的發(fā)展，給養(yǎng)牛業(yè)帶來(lái)巨大的挑戰(zhàn)。此次診斷為貴州地區(qū)外來(lái)疾病的科學(xué)防控提供了一定的理論依據(jù)。參考文獻(xiàn):［1］BrandtS，ApprichV，HacklV，etal．Prevalenceofbovinepapillo-mavirusandTreponemaDNAinbovinedigitaldermatitislesions［J］．Veterinarymicrobiology，2011，148(2):161-167．［2］OgawaT，TomitaY，OkadaM，etal．Broad－spectrumdetectionofpapillomavirusesinbovineteatpapillomasandhealthyteatskin［J］．Journalofgeneralvirology，2004，85(8):2191-2197．［3］梁辰，姜曉文，劉旭，等．牛乳頭狀瘤的病理學(xué)觀察及其病毒基因型分析［J］．中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2013，35(5):423-425．［4］賀志昊，劉賢俠，喬軍，等．奶牛乳頭狀瘤病理學(xué)診斷及病原分子檢測(cè)研究［J］．石河子大學(xué)學(xué)報(bào)，2013，31(6):7383-7384．［5］ＲopertoS?

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1 葉旭燕;鄭漢朋;邱乾德;;肝外膽管乳頭狀瘤病一例報(bào)告[A];2012年浙江省放射學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2012年

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1 于琦;乳頭狀瘤病和導(dǎo)管內(nèi)癌的克隆性分析[D];天津醫(yī)科大學(xué);2005年

本文編號(hào)：2617328