【摘要】：[目的]研究klotho基因G395A、F352V、C370S單核苷酸多態(tài)性(SNPs)在楚雄地區(qū)彝族健康人群、2型糖尿病患者中的基因型、等位基因頻率分布特征,探討klotho蛋白水平及基因多態(tài)性與2型糖尿病的相關(guān)性。[方法]①本研究選擇中國云南省楚雄地區(qū)20歲以上,居住滿20年,三代無族外通婚的彝族居民為研究對(duì)象,分為健康對(duì)照組(A組)120例(男82例,女38例),平均年齡52.22±5.63歲;2型糖尿病組(B組)128例(男73例,女55例),平均年齡55.48±7.18歲。②運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量-PCR(FQ-PCR)技術(shù)檢測kotho基因3個(gè)位點(diǎn)的SNP,比較兩組間基因型、等位基因分布頻率。③Olympas AU5400全自動(dòng)生化分析儀測定血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、尿酸(UA)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG),低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C),高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C);葡萄糖氧化酶法測定空腹血漿葡萄糖(FBG)和餐后兩小時(shí)血糖(2hPBG);乳膠凝集反應(yīng)法測定糖化血紅蛋白(HbA1C);放射免疫法測定空腹胰島素水平(FINS);ELISA檢測血漿klotho水平。比較不同基因型及糖尿病與非糖尿病組間的差異。④χ2檢驗(yàn)分析兩組間klotho基因G395A基因型、等位基因頻率分布差異;獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)分析血漿klotho水平與2型糖尿病相關(guān)性;Logistic分析2型糖尿病的影響因素。[結(jié)果]①Klotho基因G-395A分布頻率,GG基因型頻率68.5%,GA+AA基因型頻率31.5%,等位基因G和A的頻率分別為83.8%和16.2%;②未發(fā)現(xiàn)Klotho基因F352V、C370S多態(tài)性,所有樣本均為野生型(FF、CC型);③Klotho基因G395A位點(diǎn)的G/G型基因頻率及G等位基因頻率在B組高于A組(χ2=5.107,P=0.023;χ2=4.102,P=0.043);④血漿klotho 水平(ng/ml)在 2 型糖尿病組(8.66±2.04)低于健康對(duì)照組(11.80±1.69),P0.01;⑤血漿Klotho水平與年齡、SBP、DBP、FBG、TC、TG、LDL-C、BUN、Scr、UA 呈負(fù)相關(guān)(r分別為-0.164、-0.297、-0.191、-0.560、-0.396、-0.409、-0.416、-0.269、-0.325、-0.271,P均0.01)⑥Logistic回歸顯示,2型糖尿病的發(fā)生與FBG、TG、LDL-C正相關(guān)、klotho 蛋白水平負(fù)相關(guān)(OR 值分別為 37.013、6.852、41.261、0.259,P0.05),與G395A位點(diǎn)的G/G基因型無關(guān)(P0.05)。[結(jié)論]①楚雄地區(qū)彝族人群存在klotho基因G395A多態(tài)性,Klotho基因G395A位點(diǎn)的G/G型基因頻率及G等位基因頻率在2型糖尿病組高于健康對(duì)照組。②不存在F352V、C370S位點(diǎn)多態(tài)性。③2型糖尿病患者血漿klotho水平低于健康對(duì)照組,Logistic分析提示2型糖尿病的發(fā)生與FBG、TG、LDL-C正相關(guān)、klotho蛋白水平負(fù)相關(guān),klotho可能是2型糖尿病的保護(hù)因素。[目的]研究klotho基因G395A單核苷酸多態(tài)性在楚雄地區(qū)彝族健康人群、2型糖尿病、2型糖尿病合并下肢動(dòng)脈粥樣硬化患者中的基因型、等位基因頻率分布情況;探討klotho蛋白水平及基因多態(tài)性與云南省楚雄地區(qū)彝族人群2型糖尿病合并下肢動(dòng)脈粥樣硬化的相關(guān)性。[方法]①采用病例-對(duì)照研究,通過Alokaα10多普勒彩色超聲儀進(jìn)行雙下肢動(dòng)脈檢測。②將研究對(duì)象分為健康對(duì)照組(A組)120例(男82例,女38例),平均年齡52.22±5.63歲;2型糖尿病組(B1)61例(男40例,女21例),平均年齡53.79±6.59歲;2型糖尿病合并下肢動(dòng)脈粥樣硬化組(B2組)67例(男33例,女34例),平均年齡57.01±7.39歲;比較三組間血漿klotho蛋白水平與klotho基因G395A基因型、等位基因分布頻率。③卡方檢驗(yàn)分析三組間klotho基因G395A基因型、等位基因頻率分布差異;單因素方差分析血漿klotho水平與2型糖尿病合并下肢動(dòng)脈粥樣硬化相關(guān)性;Logistic分析2型糖尿病合并下肢動(dòng)脈粥樣硬化的影響因素。[結(jié)果]①Klotho基因G395A位點(diǎn)基因型及等位基因頻率分布在三組間無顯著差異(χ2=5.552,P0.05;χ2=4.289,P0.05);②2型糖尿病合并下肢動(dòng)脈硬化組、2型糖尿病組血漿Klotho濃度均低于正常對(duì)照組,且2型糖尿病合并下肢動(dòng)脈硬化組血漿Klotho水平低于2型糖尿病組(7.61±1.84vs9.82±1.58vs11.80±1.69),經(jīng)協(xié)方差分析,klotho 濃度在三組間差異仍然存在(p0.01);③直線相關(guān)分析彝族人群血漿klotho蛋白水平與年齡、SBP、DBP、FBG、TC、TG、LDL-C、BUN、Scr、UA、2hPBG、HBA1C、硬化評(píng)分呈負(fù)相關(guān)(r 分別為-0.164、-0.297、-0.191、-0.560、-0.396、-0.409、-0.416、-0.269、-0.325、-0.271、-0.253、-0.198、-0.530,P 均0.05);④多元逐步回歸分析,顯示年齡和動(dòng)脈硬化評(píng)分是影響血漿Klotho水平的獨(dú)立相關(guān)因素;⑤Logistic回歸顯示,糖尿病下肢動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生與FBG、TG、LDL-C、Scr、klotho 蛋白相關(guān)(OR 值分別為 1.372、1.827、4.206、1.054、0.401,P0.05)。[結(jié)論]①血漿klotho濃度在2型糖尿病合并下肢動(dòng)脈硬化組2型糖尿病組正常對(duì)照組,且與下肢動(dòng)脈硬化評(píng)分成負(fù)相關(guān),klotho蛋白可能對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化具有保護(hù)效應(yīng);②klotho基因G395A多態(tài)性與2型糖尿病合并下肢動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)病無相關(guān)性。
【圖文】：

圖１無模板空白對(duì)照實(shí)時(shí)熒光定量擴(kuò)增曲線逡逑５．邋１邋Ｇ－３９５Ａ基因型分析逡逑圖２所示為野生型純合子（ＧＧ基因型）樣本的實(shí)時(shí)ＰＣＲ反應(yīng)曲線，，隨著ＰＣＲ反逡逑應(yīng)的進(jìn)行，ＦＡＭ標(biāo)記的探針產(chǎn)生的熒光信號(hào)增高，而ＶＩＣ標(biāo)記的探針無熒光信號(hào)。逡逑＇Ｓｅｔｕｐ邋Ｙ邋Ｉｎｓ邋ｔｒｕｊｎｅｎｔ邋ＹＲｅｓｕｌ邋￣ｔｓ邋＼邐邐逡逑＾ｌａｔｅ邋Ｖ邋Ｓｐｅｃｔｒａ邋ＹＣｏｍｐｏｎｅｉｉｌ：邋Ｖ邋Ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ邋Ｐｌｏｔ邋Ｙ邋Ｓｔａｎｄａｒｄ邋Ｃｕｒｖｅ邋Ｖ邋Ｄｉｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ邋Ｖ邋Ｒｅｐｏｒｔ邋＼逡逑Ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ逡逑５０００００．００邐Ｉ—邋—ｐ邐Ｔ邋—邐Ｔ邋邋邐邐＾邋，逡逑Ｌ邋ｏｍｐｏｎｅｎｔ邋）逡逑■邋ＩＶ邋ＦＡＭ逡逑４５００００００邐ＨＰ

本文編號(hào)：2595610