【摘要】：紫花苜蓿(Medicago sativa L.)作為世界上栽培歷史最悠久、種植面積最大、利用價值最高的優(yōu)質(zhì)豆科牧草,其產(chǎn)業(yè)化日漸興起。伴隨著農(nóng)業(yè)、畜牧業(yè)生產(chǎn)模式的轉(zhuǎn)變,除草劑得到了大面積的推廣和使用,紫花苜蓿苗期長,植株生長緩慢,造成雜草迅速蔓延,阻礙紫花苜蓿幼苗生長及發(fā)育,嚴重影響其產(chǎn)量和質(zhì)量。隨著轉(zhuǎn)基因作物時代的到來,抗除草劑轉(zhuǎn)基因作物也成為一種普遍的種植要求。自從1986年的首例紫花苜蓿轉(zhuǎn)基因成功以來,紫花苜蓿遺傳轉(zhuǎn)化的研究已取得一定的進展。但現(xiàn)有的紫花苜蓿遺傳轉(zhuǎn)化體系轉(zhuǎn)化效率很低,限制了優(yōu)良外源基因?qū)ψ匣ㄜ俎５霓D(zhuǎn)化,降低了轉(zhuǎn)基因紫花苜蓿新品種的選育速度。本試驗以紫花苜蓿組培苗葉片為外植體,應(yīng)用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法,成功將CP4EPSPS基因轉(zhuǎn)到受體中。在試驗過程中,優(yōu)化了影響遺傳轉(zhuǎn)化的因素,包括草銨膦篩選濃度(2mg/L)、共培養(yǎng)時間(3d)、農(nóng)桿菌侵染濃度(OD_(600)=0.8)、農(nóng)桿菌種類(LBA105)、草甘膦噴施濃度(1%)等。試驗獲得73株抗性植株,PCR檢測驗證得到24轉(zhuǎn)基因植株,經(jīng)試紙條檢測和噴施草甘膦最終確定6株為陽性植株。
【圖文】：

圖 2. 不同濃度草銨膦溶液對愈傷組織的影響Fig.2 Effects of Different Concentrations of Glufosinate on Callus表 3-2 草銨膦抗性濃度篩選結(jié)果(30d)Table 3-2 Effect of Different Concentrations of Glufosinate on Callus Induction草銨膦濃度(mg/L)外植體數(shù)（個）愈傷組織數(shù) a(個)愈傷組織數(shù) b(個)愈傷組織數(shù) c(個)愈傷誘導(dǎo)率(％)01.01.52.02.5606060606020201430201813401919112098.3395.0063.3315.000.00

圖 3.噴施 1%濃度草甘膦溶液對紫花苜蓿的影響Fig.3 Effects of Spraying 1% Glyphosate Solution on Alfalfa表 3-3 不同濃度草甘膦溶液對紫花苜蓿影響結(jié)果Table 3-3 Effect of Different Concentrations of Glyphosate on Callus Inductio草甘膦濃度%植株成活數(shù)（個） 平均植株成活率10d 30d 10d 30dA 組 B 組 C 組 A 組 B 組 C 組 / /0 20 20 20 20 20 20 100 1000.5 19 19 18 14 16 16 93.33 76.670.7 11 8 9 8 7 7 46.67 36.671 5 3 4 2 3 3 20 13.332 0 0 0 0 0 0 0 0
【學位授予單位】：吉林農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：S541.9

【參考文獻】

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本文編號：2589195