【摘要】：甜瓜(Cucumis melo L.)屬于葫蘆科甜瓜屬,在果實(shí)成熟特性的研究中是一種重要的模式植物。本研究以甜瓜品種河套蜜瓜(Cucumis melo L.cv.Hetao)為研究材料,利用分子生物學(xué)方法研究了CmGH18和CmEBF基因與果實(shí)成熟之間的關(guān)系。主要研究結(jié)果如下:(1)根據(jù)甜瓜果實(shí)轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)篩選出在甜瓜果實(shí)生長(zhǎng)期、成熟期、呼吸躍變期、以及呼吸躍變后期等四個(gè)時(shí)期內(nèi)具有顯著差異表達(dá)的CmGH18和CmEBF基因。(2)使用甜瓜果實(shí)為材料克隆了CmGH18和CmEBF基因的cDNA全長(zhǎng)序列。序列長(zhǎng)度分別為1097bp、2134bp,編碼300、640個(gè)氨基酸序列。生物信息學(xué)分析蛋白理化性質(zhì)、跨膜螺旋區(qū)、蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)、三級(jí)結(jié)構(gòu)以及信號(hào)肽與亞細(xì)胞定位。同時(shí),使用MEGA6.0與MEME在線軟件分析了蛋白CmGH18、CmEBF與其他10個(gè)物種相應(yīng)蛋白質(zhì)之間的親緣關(guān)系。(3)利用q RT-PCR方法檢測(cè)基因CmGH18、CmEBF在甜瓜果實(shí)不同發(fā)育時(shí)期的表達(dá)量。CmGH18基因在27d果實(shí)中表達(dá)量最高,CmEBF基因在躍變期果實(shí)中表達(dá)量最高。(4)成功構(gòu)建了CmGH18、CmEBF基因的超表達(dá)載體pPZP221-CmGH18、pPZP221-CmEBF以及CRISPER/Cas9編輯載體pCRI-CmGH18、p CRI-CmEBF。通過(guò)甜瓜子房注射法進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化,對(duì)獲得的T_1代植株進(jìn)行PCR檢測(cè),陽(yáng)性率分別為10%、12.5%、40%、41.7%。來(lái)源于陽(yáng)性率高的母果實(shí)的T_1代種子種植于溫室,觀察T_1代甜瓜的果實(shí)成熟相關(guān)表型,結(jié)果表明CmGH18基因具有促進(jìn)果實(shí)成熟的功能,CmEBF基因具有抑制果實(shí)成熟的功能。
【圖文】：

圖 1.5.1 F-box 蛋白以 SCF 復(fù)合物的形式參與生命活動(dòng)示意圖[38]g. 1.5.1 F-box protein participates in the life activity diagram in the form of SCF comox 蛋白與植物的生長(zhǎng)發(fā)育種中 F-box 蛋白數(shù)量不同，因而在植物體內(nèi)可形成大量不同的 SCF 復(fù)同的靶蛋白而參與調(diào)控植物生長(zhǎng)發(fā)育，，研究者們發(fā)現(xiàn) F-box 蛋白主要能力、自交不親和、葉片發(fā)育、葉片衰老以及種子的大小。-box 蛋白與花發(fā)育相關(guān)。被子植物的花器官發(fā)育由 ABC 三類基因A 類基因調(diào)控影響萼片和花瓣、B 類基因調(diào)控花器官的分化、C 類基擬南芥中分別鑒定出 UFO 和 SAF1 基因，屬于 F-box 家族。擬南芥 AP3 的正調(diào)控因子，UFO 突變可導(dǎo)致一系列花發(fā)育異常。在擬南芥 基因能與擬南芥 SCF 復(fù)合體中的 AsKI 和 Ateu-LI 蛋白相互作用，而[40]。擬南芥中鑒定的另一個(gè) F-box 蛋白 SAF1 基因的功能與花器官次明 SAF1 基因的過(guò)表達(dá)使花藥內(nèi)壁次生壁不能加厚導(dǎo)致生育能力降低

內(nèi)蒙古大學(xué)碩士學(xué)位論文轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程[53-56]。乙烯作為氣態(tài)分子參與植物激素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，乙烯ETRs 與 CTR1 協(xié)同負(fù)調(diào)控乙烯反應(yīng)。EIN2 和 EIN3/EILs 兩種乙烯正調(diào)控乙烯反應(yīng)。用乙烯處理能增加 EIN3 蛋白積累，抑制乙烯產(chǎn)此說(shuō)明 EIN3 蛋白的穩(wěn)定由乙烯的量調(diào)控；同樣乙烯信號(hào)蛋白 E[53]。最新研究表明，EIN2 介導(dǎo)乙烯促進(jìn) EBF1 和 EBF2 蛋白被降白的穩(wěn)定來(lái)實(shí)現(xiàn)植物對(duì)乙烯的反應(yīng)[54]（圖 1.5.2）。 核蛋白轉(zhuǎn)錄因子是廣泛存在于植物中的轉(zhuǎn)錄因子。F-box 家族蛋的降解。HIRANOK 在水稻以及 ARIIZUMIT 在擬南芥中都有發(fā)現(xiàn)促進(jìn) GID1 受體與 DELLA 蛋白結(jié)合形成 DELLA-GA-GID1 復(fù)合物 蛋白的穩(wěn)定[55，56]。
【學(xué)位授予單位】：內(nèi)蒙古大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：S652

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王吉明;尚建立;馬雙武;;甜瓜屬植物抗根結(jié)線蟲(chóng)種質(zhì)資源研究進(jìn)展[J];植物遺傳資源學(xué)報(bào);2009年01期

2 楊映根;黃先榮;毛春云;段靜霞;李鈺;張錫銅;葛澄明;;華萊士甜瓜貯藏保鮮研究初報(bào)[J];中國(guó)果品研究;1987年02期

3 熊韜;胡國(guó)智;吳海波;馬新力;馮炯鑫;;施磷量對(duì)盆栽甜瓜早醉仙產(chǎn)量和品質(zhì)的影響[J];浙江農(nóng)業(yè)科學(xué);2018年10期

4 王慶菊;彭云;侯文通;;親土1號(hào)土壤改良技術(shù)在甜瓜上的應(yīng)用效果[J];中國(guó)瓜菜;2018年05期

5 苗永美;簡(jiǎn)興;錢立生;徐榮華;;氯化鈣和水楊酸對(duì)弱光脅迫下甜瓜幼苗生長(zhǎng)及光合的影響[J];安徽科技學(xué)院學(xué)報(bào);2018年01期

6 曹明;張雪彬;陶凱;楊小鋒;;甜瓜西州密25號(hào)養(yǎng)分吸收與需肥特性研究[J];現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技;2018年11期

7 段莉莉;朱拼玉;李季;陳勁楓;;基因工程技術(shù)在甜瓜屬作物分子育種中的應(yīng)用與發(fā)展[J];中國(guó)瓜菜;2018年08期

8 李春華;李柯澄;;有機(jī)甜瓜一年三茬優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)栽培技術(shù)[J];長(zhǎng)江蔬菜;2018年01期

9 張銀歡;耿新麗;鄭賀云;廖新福;;甜瓜果實(shí)品質(zhì)構(gòu)成及其影響因素[J];現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技;2018年10期

10 黃倩;杭吟溪;劉中華;劉雪瑩;韓瑩琰;;北京地區(qū)不同品種甜瓜營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)分析[J];北京農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào);2018年03期

相關(guān)會(huì)議論文 前5條

1 莊玉豐;高峰;恩和巴雅爾;;甜瓜CmNramp基因家族的生物信息學(xué)分析[A];2017第七屆泛環(huán)渤海生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];2017年

2 莊飛云;陳勁楓;錢春桃;羅向東;雷春;;人工異源四倍體(Cucumis hytivus)染色體組間重組的細(xì)胞學(xué)及分子標(biāo)記研究[A];蔬菜分子育種研討會(huì)論文集[C];2004年

3 程周超;顧興芳;黃三文;張忠華;張圣平;苗晗;;黃瓜和甜瓜比較圖譜的構(gòu)建[A];慶祝中國(guó)園藝學(xué)會(huì)創(chuàng)建80周年暨第11次全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)論文摘要集[C];2009年

4 陳勁楓;錢春桃;婁群峰;莊飛云;;基于遠(yuǎn)緣雜交的黃瓜種質(zhì)資源的創(chuàng)新與利用研究[A];全國(guó)蔬菜和薯類種質(zhì)資源研究與利用研討會(huì)論文集[C];2006年

5 陳龍正;陳勁楓;婁群峰;錢春桃;;甜瓜屬遠(yuǎn)緣雜交及多倍化可誘發(fā)基因組DNA胞嘧啶甲基化變化[A];江蘇省遺傳學(xué)會(huì)第七屆代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要匯編[C];2006年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前1條

1 ;溫室富硒甜瓜栽培技術(shù)規(guī)程[N];河北科技報(bào);2018年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前9條

1 施澤平;溫室甜瓜生長(zhǎng)模型的研究及栽培管理專家系統(tǒng)的建立[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

2 哈斯阿古拉;甜瓜耐貯藏基因工程研究[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2004年

3 侯麗霞;甜瓜自交系再生與遺傳轉(zhuǎn)化體系的研究及蔗糖磷酸合成酶（SPS）基因的全長(zhǎng)cDNA克隆[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2006年

4 江雪飛;溫室甜瓜（Cucumis melo L.）對(duì)咸水灌溉的適應(yīng)機(jī)理研究及鹽害發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)分析[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2007年

5 張永兵;甜瓜細(xì)胞遺傳學(xué)、單倍體創(chuàng)制及抗蔓枯病分子標(biāo)記[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2007年

6 虞夏清;甜瓜屬異源多倍化引起葉色黃化的光適應(yīng)性評(píng)價(jià)和microRNAs分析[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

7 Joyce Wanjiru Ngure;黃瓜及甜瓜屬野生種種子油含量和脂肪酸的測(cè)定及油脂生物合成相關(guān)的關(guān)聯(lián)作圖[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

8 魏躍;甜瓜屬Cucumis×hytivus Chen and Kirkbride種間雜交的分子驗(yàn)證和細(xì)胞器基因的遺傳分析[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

9 李大偉;甜瓜屬遺傳比較作圖及黃瓜、辣椒NBS類抗病分子標(biāo)記開(kāi)發(fā)[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2012年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 俞志杰;新疆甜瓜抗細(xì)菌性果斑病基因的遺傳分析與定位[D];新疆大學(xué);2018年

2 趙薇;甜瓜ACS基因家族成員的鑒定及CmACS7和CmACS11的克隆與遺傳轉(zhuǎn)化[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2018年

3 李三培;不同質(zhì)構(gòu)甜瓜果實(shí)成熟軟化的轉(zhuǎn)錄組分析及XTH基因研究[D];天津大學(xué);2017年

4 劉暢;甜瓜不同抗性品種根系分泌物對(duì)枯萎病菌的化感作用研究[D];沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué);2018年

5 王紅艷;嫁接對(duì)甜瓜幼苗耐低溫性及光合產(chǎn)物運(yùn)轉(zhuǎn)的影響[D];沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué);2018年

6 王志冉;嫁接對(duì)甜瓜幼苗氮代謝的影響[D];沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué);2018年

7 劉暢;甜瓜CmNAC34和CmHsp83基因在果實(shí)發(fā)育中功能的初步分析[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2018年

8 靈芝;CmGH18和CmEBF基因在甜瓜果實(shí)成熟中功能的初步分析[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2018年

9 王昱丹;甜瓜雄性不育苗期早期鑒定方法[D];黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué);2018年

10 閆偉浩;白粉病菌對(duì)甜瓜幼苗葉片DNA甲基化和轉(zhuǎn)錄組的影響[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2017年

本文編號(hào)：2588065