多穗柯黃酮3-羥化酶基因的克隆與序列分析
發(fā)布時(shí)間:2020-02-19 14:04
【摘要】:目的克隆多穗柯Lithocarpus polystachyus黃酮3-羥化酶(flavanone 3-hydroxylase,F3H)基因,了解其基因特征并初步探明其在各器官中的表達(dá)情況。方法分別提取多穗柯葉片的總RNA及基因組DNA,根據(jù)轉(zhuǎn)錄組測序結(jié)果,設(shè)計(jì)特異性引物,PCR擴(kuò)增得到多穗柯F3H基因的c DNA及DNA序列,測序后進(jìn)行生物信息學(xué)分析,通過qRT-PCR法檢測多穗柯F3H基因在不同器官中的表達(dá)情況。結(jié)果多穗柯F3H基因c DNA全長1 340 bp,包含長1 092 bp的開放閱讀框,編碼363個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì),定位于細(xì)胞質(zhì)中。qRT-PCR結(jié)果表明F3H基因在多穗柯各器官中均有表達(dá),但表達(dá)量具有顯著性差異(P0.05)。結(jié)論首次對(duì)多穗柯F3H基因進(jìn)行了克隆和生物信息學(xué)分析,證實(shí)F3H基因在多穗柯不同器官中表達(dá)量差異顯著,為多穗柯中黃酮類的次生代謝研究奠定了基礎(chǔ)。
本文編號(hào):2581034
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,本文編號(hào):2581034
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