【摘要】：為建立運用可視基因芯片技術快速、準確檢測蘭花病毒的方法,選擇黃瓜花葉病毒、齒舌蘭環(huán)斑病毒、建蘭花葉病毒編碼外殼蛋白(coat protein,CP)基因、辣椒褪綠病毒編碼核衣殼蛋白N基因、落葵皺紋花葉病毒編碼CI蛋白基因為目標基因,設計引物和探針(5'標記一段poly T)。利用多重RT-PCR方法進行病毒核酸擴增,將擴增產物與固定于芯片的特異性探針雜交,經清洗、可視化顯色后進行結果分析。在優(yōu)化的檢測條件下,本研究篩選出2組多重引物組合Cm(F2-R2a)、Ba(F1-R1);Or(F1-R1)、Cy(F2-R2)和Ca(F1-R1),5條特異性探針。所建立的可視基因芯片具有較好的特異性和重復性,可檢測出病毒陽性質粒的量為不低于10~3拷貝·μL~(-1)。

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本文編號：2579566