發(fā)布時間：2020-01-23 10:48

【摘要】：苯酚是重要的化工原料,也是危害環(huán)境的重要酚類污染物之一。在反硝化細菌Thauera aromatica K172中,苯酚經(jīng)過磷酸化和羧化可轉(zhuǎn)化成毒性較低的4-羥基苯甲酸。磷酸苯酯羧化酶是這一過程的關(guān)鍵酶,由4個亞基α、δ、β和γ構(gòu)成。本研究以編碼δ和γ亞基的開放閱讀框架(open reading frame,ORF)orf 5和orf 12為模板構(gòu)建了DNA探針,通過Southern blot的方法,對部分T.aromatica及Azoarcus evansii菌株中相關(guān)基因的多樣性進行了分析,發(fā)現(xiàn)這些菌株普遍含有多個orf 5同源序列,而雜交圖譜顯示該基因不具備屬的特異性。相比之下,orf 12僅分布在T.aromatica K172和S100以及A.evansii T中,相關(guān)的基因簇為單一拷貝,且均位于一個Pst I消化的大小一致的片段中;在培養(yǎng)實驗中也只有這3個菌株能夠穩(wěn)定地在反硝化條件下以苯酚為唯一碳源生長。因此推測,T.aromatica K172,S100和A.evansii T中降解代謝苯酚的途徑是相同的,可能是在進化過程中獲得了相同的苯酚代謝的基因或基因簇。本研究進一步證明了orf 12編碼的γ蛋白是磷酸苯酯羧化酶的亞基之一,為深入探討苯酚的無氧代謝提供了實驗基礎(chǔ)。

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