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抗草甘膦基因CP4-EPSPS表達(dá)載體構(gòu)建及對(duì)甘薯的遺傳轉(zhuǎn)化研究

發(fā)布時(shí)間:2019-12-05 06:47
【摘要】:甘薯是重要的糧食、飼料、工業(yè)原料及新能源。雜草危害對(duì)甘薯生產(chǎn)影響較大,可使其減產(chǎn)5%-15%。草甘膦是一種高效低毒的化學(xué)除草劑,可降低除草勞動(dòng)強(qiáng)度、提高除草效率。將抗草甘膦基因CP4-EPSPS轉(zhuǎn)入甘薯,可以獲得有草甘膦抗性的品種。本研究從抗草甘膦大豆中擴(kuò)增了CP4-EPSPS基因,將其安裝在載體pMD18-T上,并與載體pCAMBIA1301連接,成功構(gòu)建了雙元植物表達(dá)載體pCAMBIA1301-CP4-EPSPS。以真空滲透輔助的農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化甘薯品種廣薯87號(hào)和福薯18號(hào)的莖段,獲得了轉(zhuǎn)基因植株。此方法免去了組培過程,轉(zhuǎn)化后直接扦插,簡化了轉(zhuǎn)化程序,提高了轉(zhuǎn)化效率。PCR檢測結(jié)果表明,72個(gè)轉(zhuǎn)化株中有5個(gè)呈現(xiàn)陽性,其中廣薯87號(hào)1株,福薯18號(hào)4株。草甘膦耐受性鑒定結(jié)果顯示,3株轉(zhuǎn)基因福薯18號(hào)可以耐受0.12%的草甘膦。以上結(jié)果為抗草甘膦甘薯的選育及商業(yè)化生產(chǎn)奠定了基礎(chǔ),同時(shí)也證明真空滲透輔助、農(nóng)桿菌介導(dǎo)的莖段轉(zhuǎn)化法在甘薯上是可行的。
【學(xué)位授予單位】:廣東海洋大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:S531

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本文編號(hào):2569927

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