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新型骨軟骨支架輔助Mosaicplasty技術(shù)和攜帶增強(qiáng)基因的ADSCs對(duì)大面積骨軟骨缺損的修復(fù)效果

發(fā)布時(shí)間:2019-11-24 10:32
【摘要】:目的考察新型骨軟骨支架輔助Mosaicplasty技術(shù)和攜帶增強(qiáng)基因的脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(ADSCs)對(duì)大面積骨軟骨缺損修復(fù)效果。方法復(fù)制比格犬軟骨全層缺損模型,使用多枚骨軟骨支架以Mosaicplasty術(shù)填充大部分缺損后,不用內(nèi)固定,作為E組;于骨軟骨支架內(nèi)及殘留間隙處緩慢由深至淺注入骨形態(tài)發(fā)生蛋白2(BMP-2)-ADSCs復(fù)合體作為D組;植入絲素蛋白(SF)/殼聚糖(CS)/納米羥基磷灰石(n HA)支架作為C組;植入SF/CS/n HA支架和BMP-2-ADSCs復(fù)合體作為B組;植入SF/CS/n HA支架與BMP-2-ADSCs聯(lián)合富血小板血漿(PRP)凝膠復(fù)合體作為A組。分別于術(shù)后4、8及16周各組隨機(jī)取2、2和4只比格犬在輕度麻醉狀態(tài)下,進(jìn)行組織外觀觀察,處死16周的比格犬,檢測(cè)病變軟骨部位的膠原蛋白Ⅰ和Ⅱ,體外檢測(cè)病變軟骨的極限應(yīng)力、應(yīng)變值和相應(yīng)彈性模量值。結(jié)果與E組比,A~D組的軟骨缺損表面平整,軟骨愈合較好,與B~D組比較,A組恢復(fù)最好。膝關(guān)節(jié)膠原蛋白Ⅰ和膠原蛋白Ⅱ表達(dá)、標(biāo)本中心相應(yīng)彈性模量值、標(biāo)本交界極限應(yīng)力和應(yīng)變值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),E組最低,A組最高。結(jié)論植入SF/CS/n HA支架與BMP-2-ADSCs聯(lián)合PRP凝膠復(fù)合體對(duì)于大面積軟骨缺損修復(fù)效果較好,值得臨床推廣。
【圖文】:

膠原蛋白,膝關(guān)節(jié),軟骨


ABCDE414bp359bp465bp膠原蛋白Ⅰ膠原蛋白ⅡGAPDH表2不同組病變膝關(guān)節(jié)膠原蛋白Ⅰ和膠原蛋白Ⅱ相對(duì)表達(dá)量的比較(x±s)指標(biāo)膠原蛋白ⅠmRNA膠原蛋白ⅡmRNAA組90.5±10.178.1±8.3B組75.4±12.663.8±9.1C組46.8±13.938.0±9.3D組36.7±13.728.6±9.8E組11.6±8.15.2±2.1F值27.73049.101P值0.0000.000Ⅱ表達(dá)均降低(P=0.000),C組和D組膝關(guān)節(jié)膠原蛋白Ⅰ和Ⅱ表達(dá)相當(dāng)(P>0.05),與D組比較,E組膝關(guān)節(jié)膠原蛋白Ⅰ和Ⅱ表達(dá)均降低(P=0.000),見表2和圖2~3。2.2不同組標(biāo)本中心極限應(yīng)力、應(yīng)變值和相應(yīng)彈性模量值不同組標(biāo)本中心極限應(yīng)力和應(yīng)變值存在E~A的順序逐漸增高的趨勢(shì),但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),與A組比較,D組彈性模量降低(F=12.102,P=0.004),與B組比較,D組彈性模量降低(F=6.785,P=0.021),見表3。圖1不同組比格犬膝關(guān)節(jié)恢復(fù)16周組織標(biāo)本A組B組C組D組E組測(cè)各組標(biāo)本極限應(yīng)力、應(yīng)變值和相應(yīng)彈性模量值。試驗(yàn)前將所有標(biāo)本置于4℃的Ringer液中1h,試驗(yàn)過程用Ringer液滴注保持濕潤(rùn)。1.9統(tǒng)計(jì)學(xué)方法數(shù)據(jù)分析采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件,計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,比較采用方差分析,兩兩比較用LSD-t檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2結(jié)果2.1標(biāo)本組織學(xué)觀察E組:4、8周時(shí)缺損底部大量纖維細(xì)胞團(tuán)增生,未完全修復(fù),16周軟骨缺損局部表面凹陷明顯,缺損仍遺留,與周圍正常軟骨界限清楚;D~B組:4、8周時(shí)支架開始降解,8周可見散在軟骨細(xì)胞樣細(xì)胞生成,,16周可見軟骨缺損內(nèi)充填以白色纖維樣組織,軟骨表面略不平整,偶見中心部分凹陷,間隙明顯縮校A組:4、8周時(shí)可見明顯軟骨樣細(xì)胞生成,形成軟骨,16周,軟骨缺損處色澤與正常軟骨相似,軟骨表面平整,與周圍

膝關(guān)節(jié),軟骨,軟骨缺損,中心極限


0±9.3D組36.7±13.728.6±9.8E組11.6±8.15.2±2.1F值27.73049.101P值0.0000.000Ⅱ表達(dá)均降低(P=0.000),C組和D組膝關(guān)節(jié)膠原蛋白Ⅰ和Ⅱ表達(dá)相當(dāng)(P>0.05),與D組比較,E組膝關(guān)節(jié)膠原蛋白Ⅰ和Ⅱ表達(dá)均降低(P=0.000),見表2和圖2~3。2.2不同組標(biāo)本中心極限應(yīng)力、應(yīng)變值和相應(yīng)彈性模量值不同組標(biāo)本中心極限應(yīng)力和應(yīng)變值存在E~A的順序逐漸增高的趨勢(shì),但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),與A組比較,D組彈性模量降低(F=12.102,P=0.004),與B組比較,D組彈性模量降低(F=6.785,P=0.021),見表3。圖1不同組比格犬膝關(guān)節(jié)恢復(fù)16周組織標(biāo)本A組B組C組D組E組測(cè)各組標(biāo)本極限應(yīng)力、應(yīng)變值和相應(yīng)彈性模量值。試驗(yàn)前將所有標(biāo)本置于4℃的Ringer液中1h,試驗(yàn)過程用Ringer液滴注保持濕潤(rùn)。1.9統(tǒng)計(jì)學(xué)方法數(shù)據(jù)分析采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件,計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,比較采用方差分析,兩兩比較用LSD-t檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2結(jié)果2.1標(biāo)本組織學(xué)觀察E組:4、8周時(shí)缺損底部大量纖維細(xì)胞團(tuán)增生,未完全修復(fù),16周軟骨缺損局部表面凹陷明顯,缺損仍遺留,與周圍正常軟骨界限清楚;D~B組:4、8周時(shí)支架開始降解,8周可見散在軟骨細(xì)胞樣細(xì)胞生成,16周可見軟骨缺損內(nèi)充填以白色纖維樣組織,軟骨表面略不平整,偶見中心部分凹陷,間隙明顯縮校A組:4、8周時(shí)可見明顯軟骨樣細(xì)胞生成,形成軟骨,16周,軟骨缺損處色澤與正常軟骨相似,軟骨表面平整,與周圍正常軟骨連接緊密、界限消失,硬度較正常軟骨無差異修復(fù)組織與周圍軟骨愈合較好,無明顯間隙存在。見圖1。不同組病變膝關(guān)節(jié)膠原蛋白Ⅰ和膠原蛋白Ⅱ相對(duì)表達(dá)量的比較,不同組病變膝關(guān)節(jié)膠原蛋白Ⅰ和Ⅱ相對(duì)表達(dá)量差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P=0.000

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1 李正賢,陳文弦;自體軟骨修復(fù)氣管軟骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究[J];中華耳鼻咽喉科雜志;1995年01期

2 服部高子 ,李軍;干細(xì)胞移植修復(fù)軟骨缺損的研究[J];日本醫(yī)學(xué)介紹;2003年02期

3 張積禮;武U

本文編號(hào):2565392


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