【摘要】：【目的】克隆菊花CmAPETALA1基因(CmAP1)并構(gòu)建植物表達(dá)載體,為該基因功能的遺傳改良打下研究基礎(chǔ)�！痉椒ā坎捎猛纯寺〖癛T-PCR從菊花葉片中克隆CmAP1基因,運(yùn)用在線生物信息學(xué)分析工具對(duì)其核苷酸及氨基酸序列進(jìn)行分析,利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR對(duì)該基因的組織表達(dá)差異進(jìn)行分析,并用雙酶切法將目的基因與pCAMBIA1300載體連接,構(gòu)建植物表達(dá)載體。【結(jié)果】克隆獲得的CmAP1基因(Gen Bank登錄號(hào)KU872999)編碼區(qū)開放閱讀框(ORF)長(zhǎng)741 bp,編碼246個(gè)氨基酸;CmAP1蛋白屬親水性蛋白,分子質(zhì)量約28.3 kD、理論等電點(diǎn)(p I)為8.76,預(yù)測(cè)該蛋白內(nèi)含10個(gè)磷酸化位點(diǎn)和2個(gè)潛在的N-糖基化位點(diǎn);蛋白氨基酸序列比對(duì)和系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化分析結(jié)果表明,CmAP1蛋白與CDM111蛋白的同源性達(dá)98%,屬M(fèi)ADS-box基因家族A類基因的euAP1分支;實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析結(jié)果表明,CmAP1基因在花蕾中表達(dá)量極高,在舌狀花和筒狀花中表達(dá)量較低,而在營(yíng)養(yǎng)器官中僅痕量表達(dá)。將CmAP1基因連接到pCAMBIA1300載體上,可成功構(gòu)建植物表達(dá)載體pCAMBIA1300-CmAP1�！窘Y(jié)論】CmAP1基因在花的發(fā)育及形成過程中發(fā)揮重要作用,成功構(gòu)建獲得的植物表達(dá)載體pCAMBIA1300-CmAP1可為后期利用基因工程手段改變菊花花形態(tài)結(jié)構(gòu)、調(diào)控花期及遺傳改良打下基礎(chǔ)。
【作者單位】： 鄭州師范學(xué)院生物工程研究所;河南農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院;鄭州好日子園藝有限公司;
【基金】：河南省科技攻關(guān)項(xiàng)目(524050005) 鄭州市重大科技專項(xiàng)項(xiàng)目(141PZDZX038)
【分類號(hào)】：Q943.2;S682.11

【參考文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2552482