【摘要】：目的半乳糖凝集素-3(Galectin-3)在腫瘤血管形成中起重要作用,關(guān)于其在血管內(nèi)皮細(xì)胞生物學(xué)行為中的研究較少。本研究探討siRNA轉(zhuǎn)染下調(diào)Galectin-3表達(dá)對(duì)血管內(nèi)皮EA.hy926細(xì)胞增殖和遷移能力的影響。方法將EA.hy926細(xì)胞分為干擾組、陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組,干擾組轉(zhuǎn)染Galectin-3特異性小干擾RNA(small interference RNA,siRNA),陰性對(duì)照組轉(zhuǎn)染陰性對(duì)照siRNA,空白對(duì)照組只加轉(zhuǎn)染空白試劑。蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)轉(zhuǎn)染前后EA.hy926細(xì)胞內(nèi)Galectin-3蛋白表達(dá)的變化,MTT比色法檢測(cè)轉(zhuǎn)染前后EA.hy926細(xì)胞增殖變化,Transwell小室法檢測(cè)轉(zhuǎn)染前后EA.hy926細(xì)胞遷移變化。結(jié)果干擾組EA.hy926細(xì)胞轉(zhuǎn)染3條靶向siRNA后,Galectin-3蛋白表達(dá)量分別為0.07±0.02、0.25±0.01和0.26±0.04,其中序列1的干擾效果最佳。轉(zhuǎn)染序列1的EA.hy926細(xì)胞中Galectin-3蛋白表達(dá)低于陰性對(duì)照組的0.77±0.05(t=9.52,P=0.011),也低于空白對(duì)照組的0.87±0.11(t=11.23,P=0.003),故選擇轉(zhuǎn)染序列1的細(xì)胞作為干擾組進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。干擾組EA.hy926細(xì)胞增殖能力在72h為0.38±0.02,低于陰性對(duì)照組的0.52±0.01(t=11.32,P=0.001)和空白對(duì)照組的0.54±0.01(t=11.73,P=0.001)。干擾組EA.hy926細(xì)胞遷移的細(xì)胞數(shù)目為32.67±9.02,低于陰性對(duì)照組的84.00±2.65(t=12.54,P=0.001)和空白對(duì)照組的85.33±4.73,t=12.66,P=0.001。結(jié)論靶向Galectin-3的特異siRNA能夠下調(diào)Galectin-3在EA.hy926細(xì)胞中的蛋白表達(dá)水平,有效抑制EA.hy926細(xì)胞的增殖和遷移能力。
【作者單位】： 鎮(zhèn)江市第四人民醫(yī)院檢驗(yàn)科;南京醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院臨床分子基因檢測(cè)中心;
【分類號(hào)】：R730.2

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本文編號(hào)：2532251