【摘要】：靈芝是一種具有重要經(jīng)濟(jì)價(jià)值的大型藥用真菌。從靈芝中提取出的多糖、萜類、甾醇類以及生物堿類物質(zhì)被發(fā)現(xiàn)具有抗癌、抗氧化、抗病毒、抗腫瘤、抗菌、抗真菌、抗膽堿酯酶、抗炎、抗免疫調(diào)節(jié)活性等多種生物活性。本文主要研究三萜這一靈芝中的重要活性物質(zhì)。油酸作為一種外源性物質(zhì)可以誘導(dǎo)靈芝高產(chǎn)三萜。本文對油酸促進(jìn)靈芝菌絲體高產(chǎn)靈芝三萜發(fā)酵條件進(jìn)行了優(yōu)化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,促進(jìn)靈芝菌絲體高產(chǎn)靈芝三萜的最優(yōu)結(jié)果為:培養(yǎng)基成分為可溶性淀粉3.4%、魚蛋白胨0.72%、KH_2P0_4 0.3%、MgS0_4 0.15%、VB_1 0.005%(m/v),pH 5.5,在發(fā)酵培養(yǎng)第 0 d 加油酸4.38%(v/v);裝液量為100mL,接種量為10%(v/v),發(fā)酵周期為9d,胞內(nèi)三萜產(chǎn)量達(dá)到(287.67±3.77)mg/100 mL。本文利用HPLC-ESI-MS~n檢測靈芝三萜,初步鑒定出了 11種不同的三萜化合物,包括:Ganoderic acid C_2、Lucidenic acid N、Ganoderenic acid B、7,15-dihydroxy-4,4,14-trimethyl-3,11-dioxochol-8-en-24-oic acid、Ganoderic acid A、Ganolucidic acid A、Lucidenic acid A、Ganoderic acid D、Lucidenic acid D、GanolucidicacidD、GanodericacidJ。并對其進(jìn)行了油酸誘導(dǎo)后產(chǎn)量變化的實(shí)驗(yàn)分析,發(fā)現(xiàn)大部分種類的靈芝三萜可以被油酸誘導(dǎo)使產(chǎn)量提高。本文通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)考察了油酸誘導(dǎo)對靈芝三萜生物合成途徑中關(guān)鍵酶基因轉(zhuǎn)錄水平的影響。結(jié)果表明,油酸可使SQS和CYP51這兩個(gè)靈芝三萜生物合成途徑中的關(guān)鍵酶基因上調(diào)表達(dá),從而使靈芝菌絲體胞內(nèi)三萜產(chǎn)量大幅度提高。油酸對14α-LDM酶基因主要為抑制作用,從而抑制麥角甾醇這一代謝途徑,間接提高靈芝三萜產(chǎn)量。本文通過發(fā)酵罐對靈芝進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng),并將搖瓶、攪拌罐、氣升罐發(fā)酵情況進(jìn)行比較。攪拌罐胞內(nèi)三萜產(chǎn)量最高可達(dá)(182.28±3.78)mg/100mL,氣升罐胞內(nèi)三萜產(chǎn)量最高可達(dá)(245.44±5.12)g/100mL。以產(chǎn)量來說,無論是胞內(nèi)三萜產(chǎn)量還是生物量,都是搖瓶發(fā)酵最高;而攪拌罐和氣升罐發(fā)酵雖然產(chǎn)量相對較低,但是可以大大提高生產(chǎn)效率。此結(jié)果對于靈芝發(fā)酵的工業(yè)化生產(chǎn)具有重要意義。
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：TQ920.1

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1 蒲嵐;朱文優(yōu);王濤;田源;鐘桃;;黃水培養(yǎng)靈芝菌絲體適應(yīng)性研究[J];中國釀造;2011年02期

2 付銘;Q，

本文編號：2523736