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谷子窄穎花突變體sins1的表型分析和突變基因定位

發(fā)布時(shí)間:2019-07-22 15:27
【摘要】:利用甲基磺酸乙酯(EMS,ethyl methyl sulfonate)誘變劑處理野生型Yugu1(豫谷1號),在后代中發(fā)現(xiàn)了一個(gè)可以穩(wěn)定遺傳的穎花明顯變窄的突變體,將其命名為sins1。與Yugu1相比,突變體sins1的株高顯著降低了3.89%,穗長和穗粗分別顯著降低了17.42%和21.62%,旗葉葉長和葉寬分別顯著降低了15.09%和25.78%,千粒重顯著降低了40.96%,谷碼數(shù)顯著降低了25%,均達(dá)到顯著水平(P0.05)。利用突變體sins1為母本、SSR41為父本構(gòu)建F_2定位群體,F_2正常穎花與窄穎花植株數(shù)目的分離比例為3∶1,表明該突變性狀由隱性單基因控制。利用F_2群體隱性單株,最終將突變基因定位在3號染色體上SSR標(biāo)記3-2658與CAAS3031間約7.709 Mb的距離內(nèi),為下一步精細(xì)定位提供了基礎(chǔ),同時(shí)也為促進(jìn)禾本科作物穎花的研究提供了方向。
【圖文】:
野生型(Yugu1)和突變體(sins1)成熟期表型比較
3期張浩等:谷子窄穎花突變體sins1的表型分析和突變基因定位A、B、D、E、F:成熟期的植株、穗、谷碼、根、葉;C:花A,B,D,E,F(xiàn):Wholeplantphenotype,spike,spikelet,root,leafatmaturestage,C:Flower圖1野生型(Yugu1)和突變體(sins1)成熟期表型比較Fig.1Phenotypeofthemutant(sins1)anditswild-typeparent(Yugu1)atmaturestage2.3突變體sins1的初步定位在9條染色體上均勻選取了196對SSR引物,檢測它們在突變體sins1與SSR41之間的多態(tài)性。最終確定可用的標(biāo)記數(shù)量為66個(gè)。這66個(gè)標(biāo)記基本覆蓋了9條染色體,分布頻率滿足BSA隱性個(gè)體基因混池法的要求,其中在1~9號染色體上分別有7、8、8、6、8、7、6、7、9個(gè)多態(tài)性標(biāo)記。利用BSA隱形混池法對這66個(gè)標(biāo)記分別擴(kuò)增父本SSR41、母本sins1、F1、隱性混池(P),發(fā)現(xiàn)在3號染色體上有1個(gè)與目的基因緊密連鎖的標(biāo)記CAAS3031(圖3-A)。從圖3-A可以看出,在標(biāo)記CAAS3031的混池條帶中母本(sins1)帶擴(kuò)增明顯,,未出現(xiàn)父本(SSR41)條帶。進(jìn)一步在CAAS3031的上下游尋找標(biāo)記,最后選出3個(gè)可用的標(biāo)記,分別為SIMS18978、CAAS3132、CAAS3036。用這3個(gè)標(biāo)記分別檢測120株收取的窄穎花表型植株葉片DNA,根據(jù)電泳檢測結(jié)果,將窄穎花突變基因sins1定位在SIMS18978(圖3-B)與CAAS3031這2個(gè)標(biāo)記之間,物理距離為11.53Mb。為了縮小區(qū)間,在11.53Mb的區(qū)間內(nèi),設(shè)計(jì)了20個(gè)SSR標(biāo)記,對這些SSR標(biāo)記在母本(sins1)與父本(SSR41)之間進(jìn)行多態(tài)性檢測,僅發(fā)現(xiàn)5對標(biāo)記可用,分別為3-2318、3-2428、3-2534、3-2658、3-2979。通過6%聚丙烯酰胺凝膠電泳對F2群體中963份隱性單株進(jìn)行檢測,最終將目的基因定位在標(biāo)記3-2658和CAAS3031間的7.709Mb區(qū)間(表1)。因?yàn)镕2群體只選取了963份單株,因此無法繼續(xù)?
窄穎花突變基因sins1的定位Fig.4Genemappingofthenarrowspikeletmutantsins1
3期張浩等:谷子窄穎花突變體sins1的表型分析和突變基因定位表1SSR標(biāo)記檢測結(jié)果Table1TestresultsofSSRmarkers株號CodeSSR標(biāo)記SSRmarkersSIMS189783-23183-24283-25343-26583-2979CAAS3132CAAS3031CAAS30362HSSSSSSSS18HHHHSSSSH21HHHSSSSSS34HSSSSSSSS45HSSSSSSSS84SSSSSSSSH85HHHSSSSSS109SSSSSSSSH114HSSSSSSSH158HHHHHSSSS553SSSSSSSHH554HHHSSSSSS567HHSSSSSSS610HHHHSSSSS773SSSSSSSHH779HHSSSSSSH792SSSSSSSHH921SSSSSSSHHS:母本sins1突變體帶型;H:同時(shí)具有雙親帶型S:Thestripofsins1,H:Theindividualswiththestripsofparents圖4窄穎花突變基因sins1的定位Fig.4Genemappingofthenarrowspikeletmutantsins13討論花性狀的變異是非常重要的表型突變,會(huì)直接導(dǎo)致糧食作物產(chǎn)量的變化。之前關(guān)于花發(fā)育的研究多集中在模式作物擬南芥,但是近年來隨著生物技術(shù)的發(fā)展,在單子葉植物的研究也越來越多。如在水稻中,GS3基因負(fù)責(zé)編碼一個(gè)包含232個(gè)氨基酸的蛋白,并且含有一個(gè)類PEBP結(jié)構(gòu)域。GS3含有5543
【作者單位】: 山西大學(xué)生物工程學(xué)院;中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物科學(xué)研究所;山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)作物品種資源研究所/農(nóng)業(yè)部黃土高原作物基因資源與種質(zhì)創(chuàng)制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:國家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系(CARS07-13.5-A02) 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院創(chuàng)新工程雜糧團(tuán)隊(duì) 國家“863”計(jì)劃(2013AA102603) 國家自然科學(xué)基金(31301328,31522040)
【分類號】:S515

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本文編號:2517709

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