【摘要】：為了揭示BpGT14基因的分子結(jié)構(gòu)特征,明確糖基轉(zhuǎn)移酶BpGT14基因的表達(dá)模式及其對非生物脅迫的響應(yīng)機(jī)制,初步探索其在白樺生長發(fā)育中的功能,在克隆白樺GT14基因全長序列的基礎(chǔ)上,利用生物信息學(xué)對其理化性質(zhì)進(jìn)行了分析,應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)分析BpGT14基因在野生白樺植株雄花序、木質(zhì)部、韌皮部及葉片4個(gè)不同部位不同月份的表達(dá)差異;同時(shí),選用白樺莖段懸浮細(xì)胞進(jìn)行了水楊酸(SA)、鹽脅迫(NaCl)、重金屬鎘(CdCl_2)及4℃低溫非生物脅迫處理,檢測目的基因?qū)δ婢车捻憫?yīng)情況。研究結(jié)果表明,BpGT14基因開放閱讀框?yàn)? 302 bp,編碼433個(gè)氨基酸。分析其氨基酸序列發(fā)現(xiàn),該蛋白含有乙酰氨基葡糖轉(zhuǎn)移酶結(jié)構(gòu)域,屬于14家族的重要結(jié)構(gòu)域。該蛋白與其他物種GT14蛋白比對分析表明,這些蛋白在100—350氨基酸區(qū)域內(nèi)保守性較高,而且該基因與毛果楊的GT14家族基因同源性高達(dá)79%。不同部位不同月份的表達(dá)模式分析結(jié)果表明,BpGT14基因的表達(dá)具有部位及時(shí)間特異性,其各部位表達(dá)量均與月份相關(guān),同時(shí)發(fā)現(xiàn)其在木質(zhì)部、韌皮部及葉片中的表達(dá)量較高,而在雄花序中表達(dá)量較低。非生物脅迫處理結(jié)果顯示,BpGT14基因?qū)Σ煌幚砭a(chǎn)生響應(yīng),但其響應(yīng)模式不盡相同:SA、CdCl_2及低溫處理結(jié)果顯示,處理初期(6 h)目的基因上調(diào)表達(dá),6 h處理時(shí)分別達(dá)到了對照組的51.2、48.9及3.3倍,24 h后相對表達(dá)量與對照組相比均下調(diào),只有低溫處理在96 h恢復(fù)上調(diào)表達(dá);NaCl處理使白樺BpGT14基因的表達(dá)量全部呈現(xiàn)下調(diào)趨勢,24 h處理后,BpGT14基因表達(dá)量下調(diào)明顯,24 h后比對照組降低了93.7%。
[Abstract]:In order to reveal the molecular structure characteristics of the BpGT14 gene, the expression pattern of the glycosyltransferase BpGT14 gene and the response mechanism to the non-biological stress are clarified, the function of the BpGT14 gene in the growth and development of the white birch is preliminarily explored, and on the basis of cloning the full-length sequence of the Betula platyphylla GT14 gene, The physical and chemical properties of BpGT14 gene were analyzed by using bioinformatics, and the expression of BpGT14 gene in the different parts of the inflorescence, xylem, phloem and leaf of the wild betula platyphylla was analyzed by real-time fluorescence quantitative PCR. At the same time, Salicylic acid (SA), salt stress (NaCl), heavy metal salt (CdCl _ 2) and low-temperature abiotic stress at 4 鈩，

本文編號：2507200