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靶向Hiwi基因的siRNA干擾對(duì)誘導(dǎo)三陰乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞凋亡的影響

發(fā)布時(shí)間:2019-06-26 08:44
【摘要】:目的:探討干擾Hiwi基因?qū)θ幦橄侔┘?xì)胞MDA-MB-231凋亡的影響。方法:培養(yǎng)并轉(zhuǎn)染三陰乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231,按照實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)分為6組,轉(zhuǎn)染后應(yīng)用q RT-PCR、Western blot分析Hiwi基因的m RNA及其靶蛋白的表達(dá)情況,根據(jù)結(jié)果評(píng)估干擾效果篩選有效的si RNA干擾片段作為干擾組(Hiwi10330組),再按照試驗(yàn)設(shè)計(jì)分為3組分別是干擾組,陰性對(duì)照組(NC組)、空白對(duì)照組(Blank組),在細(xì)胞轉(zhuǎn)染后進(jìn)行細(xì)胞流式檢測各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞凋亡率。結(jié)果:靶向Hiwi基因的si RNA干擾后,干擾組中m RNA的表達(dá)量明顯降低(P0.05),Hiwi基因靶蛋白的表達(dá)也出現(xiàn)了明顯的抑制(P0.05)。靶向Hiwi基因的si RNA干擾后,干擾組MDA-MB-231細(xì)胞的凋亡率與NC和Blank組相比明顯升高(P0.05)。結(jié)論:si RNA靶向沉默Hiwi基因后,乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231的凋亡率明顯升高,提示Hiwi基因可能成為三陰乳腺癌的一潛在治療靶點(diǎn)。
[Abstract]:Objective: to investigate the effect of interfering Hiwi gene on apoptosis of Sanyin breast cancer cell line MDA-MB-231. Methods: Sanyin breast cancer cell line MDA-MB-231, was cultured and transformed into 6 groups according to the experimental design. The expression of m RNA and its target protein of Hiwi gene was analyzed by Q RT-PCR,Western blot. According to the results, the effective si RNA interference fragments were selected as interference group (Hiwi10330 group), and then divided into three groups according to the experimental design: interference group, negative control group (NC group) and blank control group (Blank group). The apoptosis rate of each experimental group was detected by flow cytometry after cell transfer. Results: after si RNA interference of targeted Hiwi gene, the expression of m RNA in interference group was significantly decreased (P 0.05), and the expression of target protein of), Hiwi gene was also significantly inhibited (P 0.05). After si RNA interference targeting Hiwi gene, the apoptosis rate of MDA-MB-231 cells in interference group was significantly higher than that in NC and Blank groups (P 0.05). Conclusion the apoptosis rate of breast cancer cell line MDA-MB-231 increased significantly after: si RNA targeted silencing of Hiwi gene, suggesting that Hiwi gene may be a potential therapeutic target for Sanyin breast cancer.
【作者單位】: 廣東醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院腫瘤中心四區(qū);廣東醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院乳腺外科;湛江市第四人民醫(yī)院乳腺科;
【基金】:廣東省湛江市科技攻關(guān)計(jì)劃項(xiàng)目(編號(hào):2015B01029)
【分類號(hào)】:R737.9

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本文編號(hào):2506068

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